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《豆豉生產(chǎn)中高產(chǎn)蛋白酶的米曲霉誘變及產(chǎn)酶條件優(yōu)化-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、生物工程食品科技FOODSCIENCEANDTECHNOLoGY2014~第39卷第O5期重豉生產(chǎn)中高聲蛋白酶的米霉誘變及聲酶務(wù)件優(yōu)吳滿剛，吳雪燕，管泳宇，葛慶豐，于海，汪志君(揚州大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，揚州225127摘要：為了提高豆豉發(fā)酵品質(zhì)，采用紫外和亞硝基胍方法對產(chǎn)蛋白酶菌株的米曲霉進(jìn)行誘變處理，以最佳誘變條件篩選得到突變菌株，使其蛋白酶活力提高38．01％，且菌株能夠保持較好的遺傳穩(wěn)定性。進(jìn)一步利用響應(yīng)面分析法研究培養(yǎng)溫度、濕度和時間對該菌株產(chǎn)蛋白酶活力的影響，得到最佳條件為：培養(yǎng)溫度42．8℃、濕度84．5％、時I'~-]
2、66．6h，此條件下產(chǎn)酶模型預(yù)測值為5l8．63U／g，驗證實驗中產(chǎn)酶活力值為507．87U／g，表明預(yù)測值與實驗值擬合良好，達(dá)到設(shè)計要求，顯示誘變所得米曲霉突變株發(fā)酵產(chǎn)蛋白酶能力有較大提升。關(guān)鍵詞：豆豉：米曲霉；復(fù)合誘變；蛋白酶中圖分類號：TS201．3文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1005—9989(2014)05—0010—05MutagenesisofAspergillusoryzaeofproducingproteasefr0mfermentedsoybeansandoptimizationofitsprotease—produci
3、ngconditionsWUMan—gang，wUXue-yan，GUANYong-yu，GEQing—feng，YUHai，WANGZhi-jun(CollegeofFoodScienceandEngineering，YangzhouUniversity，Yangzhou225127)Abstract：Ultraviolet(UV)andnitrosoguanidine(NTG)wereemployedtomutateAspergillusoryzaefromfermentedsoybeanstoimprovetheproductqu
4、ality．Theproteaseactivityofthemutanlstrainwasimproved38．01％comparedwiththeoriginalstrainandthemutantcouldkeepgoodhereditarystability．Responsesurfacedesignwasusedtoexploretheeffectsofincubationtemperature。incubationhumidityandtimeontheactivityofprotease．Resultsshowedthatt
5、heoptimalconditionswereIncubationtemperatureof42．8℃，incubationhumidityof84．5％andlncubationtimeof66．6h．Undertheseoptimizedconditions：theactivityofproteasewouldreach518．63U／g．Theactivityofproteaseofvalidationexperimentreached507．87U／g，whichwasinagreementwiththecalculatedva
6、lue．1tsuggestedtheproteaseformingcapacityoftheAspergillusmutanthadbeenmuchimproved．Keywords：fermentedsoybean；Aspergilusoryzae；combinedmutagenesis；protease豆豉是我國傳統(tǒng)的調(diào)味品，作為大豆發(fā)酵制養(yǎng)價值。傳統(tǒng)發(fā)酵豆豉采用的是自然制曲，口口口，其不僅具有良好的風(fēng)味，還具有很高的營包括酵母及曲霉等多種微生物，屬于多菌種混收稿日期：2013—11—03通訊作者作者簡介：吳滿剛(1977—)，男，
7、博士，講師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品加工方向的研究工作。’10‘食品科技2014~第3蜷第05期FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY生物工程合發(fā)酵豆豉；其中，米曲霉型豆豉起源最早且1．2．5突變菌株篩選將1330株突變株在雙層瓊脂分布廣泛】，其所分泌的蛋白酶對發(fā)酵過程平板培養(yǎng)基培養(yǎng)2d，以原始菌株為對照，挑選單中所產(chǎn)生的風(fēng)味和營養(yǎng)具有重要作用【8]。一般野菌落透明圈直徑和菌落直徑的比值增大的菌株進(jìn)生型菌株的性能及耐受性較差，遺傳不穩(wěn)定，往行復(fù)篩。將通過初篩的菌株制成的單孢子懸液接往不能滿足現(xiàn)代快速發(fā)酵的需求，因此采用不同種到碾碎的大豆
8、做成的曲料中，28℃培養(yǎng)2d后，處理方法進(jìn)行菌種選育是必不可少的【l。?！，通過每5g曲加6OmL蒸餾水，40℃振蕩1h，過濾得到誘變能夠得到適用于豆豉發(fā)酵的高效菌株，以達(dá)蛋白酶液，測定其蛋白酶活力。到縮
