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《香菇多糖的提取及分離方案.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、香菇中多糖的提取分離與檢測方案設(shè)計:根據(jù)所查文獻,影響因素:料液比>提取時間>提取次數(shù)>提取溫度一.香菇多糖的提取稱取干香菇粉2克5份→于1-5號錐形瓶中→加入(20,30,40,50,60)ml熱水70℃→超聲波發(fā)生器(水預(yù)熱在60℃左右,功率80W左右)→提取40min(中間停頓2次,每15min一次停頓,每次5min)→抽濾,用量筒量取所得濾液體積→濾渣→向濾渣中加入與濾液體積相等的熱水,熱水70℃→提取30min(中間停頓2次,每10min一次停頓,每次5min)→抽濾→合并濾液→量體積標識
2、貯藏備用二.香菇多糖的測定1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白質(zhì):采用氯化鈣法:量取所得的1-5號儲備液各20ml,將溶液PH調(diào)節(jié)至8---9(NaOH溶液),加熱到85℃,加入氯化鈣使?jié)舛冗_5%(w/v),攪拌,冷卻至室溫,過濾,得脫蛋白多糖液。2.制作標準曲線:準確稱取葡萄糖20mg置于500ml容量瓶定容(40ug/L),分別準確量取0.2,0.6,1.0,1.4,1.8于比色管,補水至2ml(用移液管量取1.8,1.4,1.0,0.6,0.2蒸餾水),然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0m
3、l,搖勻冷卻,室溫放置20分鐘以后于490nm測吸光度,以2.0ml水按同樣顯色操作為空白,橫坐標為多糖濃度,縱坐標為吸光度,得標準曲線。3.樣品的測定:取去完蛋白的樣液2ml,然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻,室溫放置20分鐘以后于490nm測吸光度。將吸光度控制在0.2-0.8三.儀器與試劑1.儀器:恒溫水槽,超聲波發(fā)生器,紫外分光光度計,分析天平,錐形瓶(100ml)5個,燒杯(100ml)5個,電熱套,溫度計,抽濾裝置,玻璃棒,攪拌子,勺子,移液管(2ml,5ml),比
4、色管(10ml)10個,容量瓶(50ml)6個。2.材料:干香菇粉(已脫脂、脫單糖和低聚糖)(60g),氯化鈣(60g),葡萄糖標準溶液(1mg/ml)(30ml),6%苯酚(30ml),濃硫酸(100ml),NaOH溶液,高純水。注:1.加入氯化鈣使?jié)舛冗_5%(w/v):液體總體積*5%2.溶液遇水會變紅色,所以應(yīng)潤洗幾次。本實驗方案由第三小組全體組員共同協(xié)作完成。