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《香菇多糖的提取及分離方案.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、香菇中多糖的提取分離與檢測方案設(shè)計：根據(jù)所查文獻，影響因素：料液比>提取時間>提取次數(shù)>提取溫度一．香菇多糖的提取稱取干香菇粉2克5份→于1-5號錐形瓶中→加入（20,30,40,50,60）ml熱水70℃→超聲波發(fā)生器（水預(yù)熱在60℃左右，功率80W左右）→提取40min（中間停頓2次，每15min一次停頓，每次5min）→抽濾，用量筒量取所得濾液體積→濾渣→向濾渣中加入與濾液體積相等的熱水，熱水70℃→提取30min（中間停頓2次，每10min一次停頓，每次5min）→抽濾→合并濾液→量體積標識
2、貯藏備用二．香菇多糖的測定1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白質(zhì)：采用氯化鈣法：量取所得的1-5號儲備液各20ml，將溶液PH調(diào)節(jié)至8---9（NaOH溶液），加熱到85℃，加入氯化鈣使?jié)舛冗_5%(w/v)，攪拌，冷卻至室溫，過濾，得脫蛋白多糖液。2.制作標準曲線：準確稱取葡萄糖20mg置于500ml容量瓶定容（40ug/L），分別準確量取0.2,0.6,1.0,1.4,1.8于比色管，補水至2ml（用移液管量取1.8,1.4,1.0,0.6，0.2蒸餾水），然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0m
3、l,搖勻冷卻，室溫放置20分鐘以后于490nm測吸光度，以2.0ml水按同樣顯色操作為空白，橫坐標為多糖濃度，縱坐標為吸光度，得標準曲線。3.樣品的測定：取去完蛋白的樣液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻，室溫放置20分鐘以后于490nm測吸光度。將吸光度控制在0.2-0.8三．儀器與試劑1.儀器：恒溫水槽，超聲波發(fā)生器，紫外分光光度計，分析天平，錐形瓶（100ml）5個，燒杯（100ml）5個，電熱套，溫度計，抽濾裝置，玻璃棒，攪拌子，勺子，移液管（2ml，5ml），比
4、色管（10ml）10個，容量瓶（50ml）6個。2.材料：干香菇粉（已脫脂、脫單糖和低聚糖）（60g），氯化鈣（60g），葡萄糖標準溶液（1mg/ml）（30ml），6%苯酚（30ml），濃硫酸（100ml），NaOH溶液，高純水。注：1.加入氯化鈣使?jié)舛冗_5%(w/v)：液體總體積*5%2.溶液遇水會變紅色，所以應(yīng)潤洗幾次。本實驗方案由第三小組全體組員共同協(xié)作完成。
