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1、臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志JClinExpPathol2015Mar;31(3)·255·網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間:2015—3—2316:36網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20150323.1636.004.html胃癌中Cav一1的異常表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制郭艷麗,周珍,郭煒,鄺鋼,楊植彬,董稚明摘要:目的檢測(cè)胃癌(gastriccancer,GC)細(xì)胞系及其組織標(biāo)本中小凹蛋白一1(Car一1)的表達(dá),并探討基因甲基化對(duì)Cav一1表達(dá)的影響。方法應(yīng)用甲基化特異性PCR(methylationspecifi
2、cPCR,MSP)技術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞株(AGS、MKN45、BGC-823)及104例胃癌及相應(yīng)癌旁組織中Cav-1基因的甲基化狀態(tài),應(yīng)用RT—PCR技術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞株中Cav一1mRNA的表達(dá),應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)胃癌組織中Cav一1的表達(dá)。結(jié)果甲基化抑制劑5-aza一2’一deoxycytidine(5-Aza—Dc)處理細(xì)胞株后,AGS中Cav一1mRNA由陰性表達(dá)恢復(fù)為陽(yáng)性表達(dá),MKN45及BGC一823中Cav一1mRNA在處理前后均呈陽(yáng)性;用組蛋白去乙?;敢种苿┣乓志谹(trichostatinA,TSA)分別處理3株細(xì)胞,處理前后Car
3、一1mRNA表達(dá)均無(wú)明顯變化。MSP檢測(cè)結(jié)果顯示,AGS細(xì)胞株可擴(kuò)增出甲基化條帶,5-Aza—Dc處理后,甲基化條帶消失,MKKN45及BGC一823處理前后均無(wú)甲基化條帶擴(kuò)出。胃癌組織中Cav一1基因甲基化率為29.8%(31/104),明顯高于癌旁組織(P=0.000);癌組織中Car一1基因高甲基化與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及上消化道腫瘤家族史(uppergastrointestinalcancers,UGIC)相關(guān)(P<0.05),與病理分級(jí)及臨床分期無(wú)關(guān)(P>0.05);胃癌組織中Cav一1的陽(yáng)性率為51.9%(54/104),明顯低于癌旁組織,差異有
4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000),且癌組織中Cav一1表達(dá)與其基因高甲基化狀態(tài)明顯相關(guān)(P=0.000)。結(jié)論Cav一1在胃癌組織中表達(dá)下調(diào),并且基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的高甲基化狀態(tài)可能是引起其表達(dá)下調(diào)的機(jī)制之一。關(guān)鍵詞:胃腫瘤;小凹蛋白一1;基因甲基化中圖分類號(hào):R735.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1001—7399(2015)03—0255—05doi:10.13315/j.cnki.cjcep.2015.03.004AbnormalexpressionanditsregulationmechanismofCav-1geneingastriccancer
5、GUOYan—li,ZHOUZhen,GUOWei,KUANGGang,YANGZhi—bin,DONGZhi—ming(DepartmentofPathology,theFourthHospitalAfiliatedtoHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050011,China)Abstract:PurposeToinvestigatetheexpressionofCav一1ingastriccancer(GC)celllinesandGCsamples,andtoanalyzethepos—sibleeffect
6、ofgenemethylationinexpressionofCav一1.MethodsMethylationspecificPCR(MSP)methodwasappliedtoexaminetheCpGmethylationoftheCav一1promoterinGCcelllines(AGS,MKN45,BGC一823)and104samplesofGCandcorrespondingad—jacenttissues.RT—PCRmethodwasappliedtoexaminethemRNAexpressioninGCcelllines.IHCw
7、ereappliedtoexaminethepro—teinexpressionofCav一1intheGCtissues.ResultsTheexpressionlevelofCav一1mRNAwasobviouslyincreasedaftertreatedwith5一aza一2’一deoxycytidine(5-Aza—Dc,ademethylationagent)inAGScellline.WedetectedthepositiveexpressionofCav一1geneinMKN45andBGC一823celllinesbeforeanda
8、ftertreatedwith5-Aza—Dc.ThelevelofCav一1mRNAexpr