黃芩苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠腦損傷的保護(hù)作用論文

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1、黃芩苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠腦損傷的保護(hù)作用論文.freelagefolloentalintracerebralhemorrhageinrats.MethodsRatmodelofintracerebralhemorrhageethod.Theratslydividedintoshamoperationcontrolgroup,modelgroup,high-,middle-andloeasuredatthethirdandseventhdayaftermodelingrepectively.Resultsparedoperationcontrolgroup,.freelo

2、delgroup.Thebrainiddle-andloodelgroup.ConclusionBaicalinhasevidentprotectiveeffectonbraindamageafterexperimentalintracerebralhemorrhageinrats,ayberelatedtotheincreaseofSODanddecreaseofMDA,NOandNOS.Keyorrhage;brainorrhage,ICH)是指腦實(shí)質(zhì)內(nèi)血管破裂出血,多由高血壓、腦動(dòng)脈硬化、腫瘤等引起,其發(fā)病年齡多在40~60歲,男性多于女性。腦出血是臨床常見(jiàn)病,具

3、有較高發(fā)病率、病死率及致死率1。本研究通過(guò)檢測(cè)黃芩苷對(duì)大鼠腦出血后腦組織含水量及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等生化指標(biāo)的影響,探討其對(duì)大腦的保護(hù)機(jī)制。1實(shí)驗(yàn)材料1.1動(dòng)物健康SD大鼠,雌雄各半,共100只,體重200~250g,購(gòu)于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,合格證號(hào):皖醫(yī)動(dòng)準(zhǔn)字03號(hào)。1.2藥物與試劑Ⅶ型膠原酶(批號(hào)036k8600)由Sigma公司提供;肝素鈉(批號(hào)F20041223)由國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供;黃芩苷由博泰生物科技有限公司提供;SOD試劑盒(批號(hào)20070414)、MDA試劑盒(批號(hào)2007

4、0416)、NO試劑盒(批號(hào)20070416)、NOS試劑盒(批號(hào)20070414)及考馬斯亮蘭蛋白試劑盒(批號(hào)20070413),均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。1.3儀器腦立體定位儀(江灣Ⅰ型C);7200型紫外分光光度計(jì)(尤尼柯上海儀器有限公司);冷凍離心機(jī)(Sigma,3K30);玻璃勻漿器、微量進(jìn)樣器均為上海儀器二廠產(chǎn)品。2實(shí)驗(yàn)方法2.1分組與給藥隨機(jī)將大鼠分為5組,即假手術(shù)組、模型組及黃芩苷高、中、低劑量組,每組12只。造模成功后2h開(kāi)始給藥。黃芩苷低、中、高劑量組分別按50、100、200mg/kg劑量腹腔注射,之后連續(xù)用藥3~7d,每日1次;假手術(shù)組與模型

5、組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)注射等體積生理鹽水,每日1次。2.2大鼠腦出血模型制作1大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉(380mg/kg)。將大鼠俯臥固定于立體定位儀上,使前囟與后囟相平,剪去頂毛,局部皮膚消毒,頭皮正中切口0.8cm,暴露前囟,于前囟后0.2mm,中線右旁開(kāi)2.9mm處鉆孔,用固定于立體定向儀上的微量注射器(5μL,針頭直徑0.7mm)沿鉆孔進(jìn)針,深約6mm(此處為尾狀核位置),緩慢注入含0.5U/μLⅦ型膠原酶和7U/μL肝素的生理鹽水1.2μL,留針8min后退針,縫合頭皮。假手術(shù)組:注入等量生理鹽水。2.3神經(jīng)癥狀觀察根據(jù)Bederson等2的評(píng)定方法分為3級(jí)。

6、1級(jí):將大鼠尾巴提起,癱瘓側(cè)前肢回收屈曲于腹下,正常側(cè)前肢向地面伸展(0~4分);2級(jí):除1級(jí)體征外,向癱瘓側(cè)倒推大鼠時(shí)阻力較從對(duì)側(cè)明顯降低(0~4分);3級(jí):除以上體征外,大鼠有向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn)的行為(0~4分)。術(shù)后根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分,將不符合此標(biāo)準(zhǔn)及死亡的大鼠剔除。2.4腦含水量測(cè)定分別于3d和7d后將動(dòng)物處死迅速取腦,并取含注射部位腦組織做腦含水量測(cè)定。腦含水量測(cè)定采用干濕重法:稱量濕重后,在100℃烘箱內(nèi)烘干24h至恒重,稱量干重。腦含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。2.5腦組織超氧化物歧化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的檢測(cè)分別于造模后3d和7d

7、將動(dòng)物處死取腦,制備腦勻漿,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。SOD測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法,MDA測(cè)定采用硫代巴比妥酸(TBA)法,NO測(cè)定采用硝酸還原酶法。2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以x±s表示,組間差異用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析。3結(jié)果(見(jiàn)表1、表2)表1各組大鼠腦組織SOD、MDA、NO、NOS含量比較(略)注:與假手術(shù)組比較,*P0.05;與模型組比較,△P0.05(下同)表2各組大鼠腦含水量比較(略)4討論腦組織水份含量測(cè)定是反映腦水腫的主要指標(biāo),腦含水量的高低直接反映腦水腫的嚴(yán)重程度,同時(shí)也可反映腦細(xì)胞的損傷程度。本研究采用膠原酶注

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