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《血小板-t細(xì)胞活化抗原1論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、血小板/T細(xì)胞活化抗原1論文1985年Burns等以活化T細(xì)胞為免疫原制備了抗活化T細(xì)胞表面抗原的單克隆抗體，并將其中1株單克隆抗體Leo-A1識別的抗原命名為人T細(xì)胞系特異性活化抗原1（Tlineage-specificactivationantigen1,TLiSA1），實(shí)驗(yàn)證實(shí)TLiSA1參與了CTL細(xì)胞的活化與分化〔1-3〕。隨后的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)TLiSA1也高表達(dá)于血小板表面，并與血小板的活化和凝集功能有關(guān)，遂將此抗原重新命名為血小板/T細(xì)胞活化抗原1（plateletandTcellactivationantigen1,PTA1）〔4〕。1997年我實(shí)
2、驗(yàn)室與澳大利亞Neolecular-1,DNAM-1）序列相同。DNAM-1分子的發(fā)現(xiàn)過程同PTA1十分相似，最初作者制備針對人CTL的單抗.freelinidase）消化唾液酸后，其pI由3.5～4.2轉(zhuǎn)變?yōu)?.8～8.2。PTA1穿膜區(qū)由25個(gè)疏水氨基酸組成。胞漿區(qū)有61個(gè)氨基酸，含有3個(gè)酪氨酸、6個(gè)絲氨酸和6個(gè)蘇氨酸，胞漿區(qū)尾部含有一段EDIYVNY基序，中央酪氨酸的氨基端有2個(gè)帶負(fù)電荷的谷氨酸和天冬氨酸（ED），羧基端為纈氨酸、天冬酰胺和酪氨酸（VNY），此基序可作為非受體型蛋白酪氨酸激酶（proteintyrosinekinase,PTK）的底物。
3、并可以和蛋白酪氨酸磷酸酶2（proteintyrosinephosphatase2,PTP2）氨基端的SH2結(jié)構(gòu)域結(jié)合。另外，在PTA1胞漿區(qū)還存在著酪蛋白激酶Ⅱ（caseinkinaseⅡ）和PKC作用的底物S/T結(jié)構(gòu)。胞漿區(qū)的上述結(jié)構(gòu)和基序提示PTA1分子可能參與T細(xì)胞和血小板活化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程〔4，5〕。人、猿、猴PTA1分子cDNA及蛋白水平的同源性為93%～95%，表明PTA1在生物進(jìn)化過程中高度保守并可能具有重要的功能。Burns等通過Leo-A1單抗親和層析的方法從血小板上純化了PTA1分子，并進(jìn)行了蛋白部分序列測定，證實(shí)PTA1分子為一全新的
4、分子。通過純化的PTA1分子再次免疫制備了抗PTA1的單克隆抗體NEA刺激的Jurkat細(xì)胞膜表面，并且平均熒光強(qiáng)度相同，但NEA刺激的Jurkat細(xì)胞膜表面著色，當(dāng)增加Jurkat細(xì)胞膜通透性后，NEA刺激的Jurkat細(xì)胞及血小板胞膜，再用磷酸肌醇磷脂酶C（phosphatidylinositolphospholipaseC）處理細(xì)胞，然后在Jurkat細(xì)胞上清中可以檢測到從細(xì)胞膜上釋放的PTA1抗原，表明PTA1分子至少是部分通過糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol,GPI）方式錨定于細(xì)胞膜上的。其它參與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
5、的膜表面分子中，有部分是通過GPI方式錨定于細(xì)胞膜表面的。而在血小板上清中未發(fā)現(xiàn)PTA1抗原的釋放，可能血小板PTA1分子主要以跨膜方式連接于血小板胞膜上，另一種可能是血小板胞膜對外源性酶的作用不敏感。PTA1的表達(dá)及表達(dá)調(diào)節(jié)已獲得的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，PTA1主要表達(dá)于巨核/血小板譜系、活化T細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、及多種轉(zhuǎn)化的造血細(xì)胞系。PTA1較高水平地表達(dá)于血小板，平均1200個(gè)分子/每個(gè)血小板〔4〕。PTA1在巨核/血小板譜系有組成性表達(dá)，并且受到TPA（PKC激活劑）及PHA的上調(diào)。在部分白血病細(xì)胞系中，PTA1具有異質(zhì)性表達(dá)(如紅白血病細(xì)
6、胞TF-1、巨核細(xì)胞Dami及HEL組成性表達(dá)PTA1，而紅白血病細(xì)胞K562不表達(dá)PTA1〔9〕。上述結(jié)果提示，PTA1可能與髓樣干細(xì)胞→CFU-GEMM→巨核細(xì)胞→血小板的發(fā)育過程及功能有關(guān)。另外，某些T細(xì)胞雜交瘤、T細(xì)胞白血病細(xì)胞高表達(dá)PTA1，HUT-102B2細(xì)胞系表達(dá)較高水平的PTA1，長臂猿細(xì)胞系MLA-144也高表達(dá)PTA1分子〔8〕。PHA活化的正常T細(xì)胞及混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中的活化T細(xì)胞表達(dá)PTA1分子，并受細(xì)胞因子及其它活化劑的調(diào)節(jié)，其中IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、TNF-α及佛波酯PMA（phorbolester）均對P
7、TA1表達(dá)有上調(diào)作用。IL-1和IL-2最佳反應(yīng)劑量為200U/ml，PMA的最佳濃度為20～50ng/ml。幾乎所有的刺激實(shí)驗(yàn)均表明PTA1在刺激后半小時(shí)至1小時(shí)內(nèi)引起Leo-A1McAb結(jié)合的減少，隨后在10～20小時(shí)內(nèi)PTA1的表達(dá)達(dá)到高峰。TGF-β對PTA1的表達(dá)有下調(diào)作用〔3〕。PMA和IL-2對PTA1表達(dá)的上調(diào)作用依賴于蛋白質(zhì)的合成。100μg/ml放線菌酮（cycloheximide）即完全抑制了IL-2和PMA對PTA1表達(dá)的誘導(dǎo)。而IL-1的刺激實(shí)驗(yàn)有所不同，在實(shí)驗(yàn)早期PTA1的表達(dá)沒有減少，表達(dá)的高峰在刺激后7～8小時(shí)，15～18小時(shí)
8、后降回本底水平，放線菌酮對IL-1的誘導(dǎo)作用幾乎無影
