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《葛根對成骨細(xì)胞opg、rankl mrna 表達(dá)的影響論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、葛根對成骨細(xì)胞OPG、RANKLmRNA表達(dá)的影響論文.freelRNA表達(dá)的影響，力求從細(xì)胞水平和分子水平對葛根抗骨質(zhì)疏松的機(jī)制進(jìn)行探討，為葛根應(yīng)用于臨床防治骨質(zhì)疏松提供有力的實驗依據(jù)。方法將(250±10)g的SD大鼠36只，隨機(jī)分為兩組：對照組灌服生理鹽水，中藥組灌服2g/ml的葛根10ml/kg·d，1日2次灌胃.freell細(xì)胞懸液，24h待細(xì)胞貼壁后加入實驗因素，6天后用異硫氰酸胍一步法提取總RAN，然后用RT-PCR檢測OPG、RANKLmRNA的表達(dá)。結(jié)果最后一次用藥后2h采血的中藥血清可明顯
2、上調(diào)成骨細(xì)胞OPGmRNA表達(dá)，且明顯下調(diào)成骨細(xì)胞RANKLmRNA的表達(dá)。隨血清添加量的增加，對成骨細(xì)胞OPGmRNA表達(dá)上調(diào)作用越強，對成骨細(xì)胞RANKLmRNA的表達(dá)無影響。結(jié)論實驗表明，葛根可能通過上調(diào)成骨細(xì)胞OPGmRNA的表達(dá)，下調(diào)成骨細(xì)胞RANKLmRNA的表達(dá)，抑制破骨細(xì)胞的產(chǎn)生和功能，為葛根防治骨質(zhì)疏松提供了有力的實驗依據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】葛根；成骨細(xì)胞；OPG；RANKL【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectsofrootsofkudzuvineonthemR
3、NAexpressionofOPGandRANKLofosteoblastsusingRT-PCR.ToprovidetheexperimentalbaseforitspreventingandtreatingtheOPinclinic，itisurgenttoexplorethemechanismofrootsofkudzuvineanti-osteoporosisincellandmolecularlevel.Methods36SDratslydividedintotinisteredorallyediu
4、msagittatummaxim（2g/ml）tl/kgbodythefemoralarteryatonehour，tinistrationofmedicine.Primaryratosteoblastsneousecalvariae.Thethirdpassageosteoblastslin75mlcultureflask，tentfactorsosteoblastsusingguanidine，andmRNAexpressionofOPGandRANKLinedusingRT-PCR.ResultsSer
5、umofrootsofkudzuvinecanup-regulatemRNAexpressionofOPGofosteoblastsanddoRNAexpressionofRANKLofosteoblasts.Theeffectofserumofmedicineharvestedat2hafterthelastmedicineadministrationisthemoststrongandtheeffectforOPGanner，hoanner.ConclusionTheexperimentshoightin
6、hibitthegenerateandfunctionofosteoclastbyup-regulatingthemRNAexpressionofOPGanddoRNAexpressionofRANKL.IthasprovidedtheexperimentbaseforrootsofkudzuvinepreventingandtreatingtheOPinclinic.【KeyRNA表達(dá)的影響，力求從細(xì)胞水平和分子水平對葛根抗骨質(zhì)疏松的機(jī)制進(jìn)行探討，為葛根應(yīng)用于臨床防治骨質(zhì)疏松提供有力的實驗依據(jù)。1材料與方法
7、1.1實驗動物出生24h內(nèi)的SD大鼠，(250±10)gSD大鼠，由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。1.2藥物與試劑葛根（購于保定市第三中心醫(yī)院），DMEM培養(yǎng)基（GiBco），胰蛋白酶（GiBco），Ⅱ型膠原酶（Sigma），新生小牛血清（NCF）（北京鼎國生物試劑公司），RT-PCR試劑（北京賽百盛基因技術(shù)公司），PCR引物：OPG(genebank：NM-012870)北京賽百盛基因技術(shù)公司合成，上游引物：5′-CGAGTGATGAATGCGTGTA-3′下游引物：5′-TTCTGAAGTAGCAGGAG
8、GC-3′擴(kuò)增產(chǎn)物為301bp；OPGL(genebank：NM-057149)北京賽百盛基因技術(shù)公司合成，上游引物：5′-CCATCGGGTTCCCATAAAG-3′下游引物：5′-TGAAGCAAATGTTGGCGTA-3′擴(kuò)增產(chǎn)物為142bp；β-actin(genebank：NM-031144)上海捷倍斯公司合成，上游引物：5′-GAGACCTTCAAGACCCCAGCC-3′下游引物：5′
