甘草有效成分的提取與分離

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1、2012-2013學(xué)年第二學(xué)期藥用植物資源與開(kāi)發(fā)論文名稱(chēng)甘草化學(xué)成分的提取與分離年級(jí)2010學(xué)院中藥材學(xué)院專(zhuān)業(yè)植物科學(xué)與技術(shù)學(xué)號(hào)07107107姓名林俊旭任課教師張永剛完成時(shí)間2013-5-11成績(jī)甘草中化學(xué)成分的提取與分離摘要：本文主要介紹了甘草中主要的化學(xué)成分以及這些化學(xué)成分的含量和性質(zhì)，并簡(jiǎn)述了甘草酸，甘草次酸和甘草甘的提取和有效成分的含量測(cè)定，為進(jìn)一步的生產(chǎn)實(shí)踐做出貢獻(xiàn)。關(guān)鍵詞：甘草化學(xué)成分提取正文：甘草屬于豆科甘草屬，以根和根狀莖入藥。甘草在我國(guó)集中分布于三北地區(qū)(東北、華北和西北各省區(qū))，而以新疆、內(nèi)蒙古、寧夏和甘肅為中心

2、產(chǎn)區(qū)。隨著藥學(xué)及其相關(guān)學(xué)科以及科研設(shè)備的發(fā)展，甘草中主要含有的甘草酸、甘草次酸、黃酮、生物堿和氨基酸等化學(xué)成分，具有廣泛的生物活性。一、化學(xué)成分藥用甘草質(zhì)量與其化學(xué)成分的組成、積累變化有直接的關(guān)系。先后從甘草屬植物中提取、分離、鑒定了200多種化學(xué)成分，涉及甘草屬植物10個(gè)種。其中最重要并已證實(shí)具有生物活性的成分主要是甘草酸等三萜皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)、多糖、生物堿、氨基酸等。三萜皂苷類(lèi)化合物：甘草屬植物中三萜皂類(lèi)成分具有量高、生理活性強(qiáng)的特點(diǎn)，甘草的許多藥理作用都與這類(lèi)成分有直接關(guān)系。至今在甘草屬植物中已鑒定得到61種三萜類(lèi)化合物

3、，其中苷元45個(gè)。這些三萜類(lèi)化合物其苷元均為3β-經(jīng)基齊墩果烷型化合物的衍生物；皂苷一般為3β-羥基上的氧苷，糖元多為D-葡萄糖酸或D-葡萄糖。甘草酸一直被認(rèn)為是甘草中最重要三萜類(lèi)化合物，《中國(guó)藥典》把甘草酸的量作為評(píng)價(jià)甘草藥材及其制品質(zhì)量的重要指標(biāo)，通常要求不低于2％。黃酮類(lèi)成分：是近年來(lái)研究最活躍的天然活性成分之一，廣泛存在于植物界中。這類(lèi)化合物的存在對(duì)植物生長(zhǎng)、發(fā)育、開(kāi)花、結(jié)果以及抵御異物的侵入起著重要的作用。目前，從甘草屬植物中已發(fā)現(xiàn)黃酮及其衍生物153種，它們的基本母核結(jié)構(gòu)類(lèi)型有15種，其中包括：黃酮、黃酮醇、雙氫黃酮、雙氫

4、黃酮醇、查爾酮、異黃酮、雙氫異黃酮、異黃烷、異黃烯等。對(duì)甘草中黃酮類(lèi)成分的藥理作用研究表明，這些成分在抗腫瘤、抗氧化、抗病毒方面作用顯著。甘草中黃酮類(lèi)成分的分布和積策也表現(xiàn)出一定的特點(diǎn)。烏拉爾甘草無(wú)論是野生還是栽培，在一個(gè)生長(zhǎng)季中，葉中總黃酮量最高，而地下部分的t相對(duì)較低；在5—10月，葉中的總黃酮量逐漸下降，而地下部分總黃酮盆具有上升趨勢(shì)。各器官中總黃酮量在生長(zhǎng)季中呈現(xiàn)波動(dòng)現(xiàn)象，尤其在具有運(yùn)輸功能的部分如復(fù)葉柄、地上莖表現(xiàn)更突出，這種波動(dòng)可能與繁殖有關(guān)。光果甘草不同器官中光甘草定，主要分布于粗根木栓層，而木質(zhì)部中主要分布的是甘草素和

5、異甘草素，地上器官、種子中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)這類(lèi)成分(PN)、甘草二氫黃酮(LN)分布于幼葉表面及莖中，而根中不存在。但三年生烏拉爾甘草中地上部分的二氫黃酮盆遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于地下部分；葉中二氫黃酮量是莖中的4倍，根中皮部與木質(zhì)部量相同，主根中的量高于根頭和側(cè)根。這種結(jié)果可能暗示著在種間、生長(zhǎng)發(fā)育期之間及產(chǎn)地之間存在不同的分布規(guī)律．二有效成分的提取一、甘草酸的提取：試劑：甘草粗粉，濃H2SO4，95%乙醇，80%乙醇，濃氨水，冰醋酸。取甘草粗粉40g,加水煮沸2次(15倍,1.25h;12倍，1h),脫脂棉過(guò)濾，合并濾液，濃縮，冷卻，攪拌下加入濃硫酸至不

6、再析出甘草酸粘性沉淀為止（約PH=1）。放置，傾出上清液，棕色粘性沉淀用水洗滌數(shù)次，60℃以下干燥，粉碎，即得甘草酸粗品，稱(chēng)重。將甘草酸粗品稱(chēng)重后加3.5—4倍量95%乙醇浸泡0.5—1h，抽濾，濾渣加3倍量80%乙醇回流1—2h，濾液冷卻后加濃氨水（邊加邊攪拌）調(diào)至弱堿性（PH=8），減壓回收乙醇至糖漿狀，趁熱加入等體積冰醋酸浸泡洗滌，放冷，析出結(jié)晶，過(guò)濾，即得甘草酸單銨鹽粗品。稱(chēng)重后，用70—80%乙醇重結(jié)晶，即得甘草酸單銨鹽純品，稱(chēng)重，得率。二、甘草次酸的提?。涸噭?%H2SO4，氯仿，乙醇。取甘草酸單銨鹽，加5%H2SO4，

7、加熱10h,抽濾，水洗至中性，干燥，即得白色甘草次酸粗品，加熱氯仿溶解，趁熱過(guò)濾，所得濾液放冷，通過(guò)AL2O3柱，用氯仿洗脫，得甘草次酸粗品，加乙醇重結(jié)晶，得甘草次酸結(jié)晶。三、甘草苷的提?。涸噭?0％乙醇，甲醇。取干燥藥材粗粉約lOg，精密稱(chēng)定，加10倍量70％乙醇，回流提取2次，每次3h回流提取，紗布過(guò)濾，將提取液倒入已恒重的蒸發(fā)皿中，水浴濃縮至干，再減壓干燥至恒重，得浸膏。精密稱(chēng)取甘草浸膏量的l／20置于25mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理30min，冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用045um的微孔濾膜過(guò)濾，即制得供試品溶液

8、。四、藥典同時(shí)提取甘草酸和甘草苷：試劑：70％乙醇，取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）0.2g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇100ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，取出，放冷，再