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《重組人血管內(nèi)皮抑制素凍干粉針劑研制及質(zhì)量評(píng)價(jià)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、重組人血管內(nèi)皮抑制素凍干粉針劑研制及質(zhì)量評(píng)價(jià)【摘要】目的研究重組人血管內(nèi)皮抑制素(endostar)凍干粉針劑的制備和質(zhì)量控制。方法以4%甘露醇、2%蔗糖、30mm乙酸鈉為輔料，將endostar制備成凍干粉針劑。分別采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)和高效液相法(HPLC)分析凍干粉的純度，使用人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)分析凍干粉的活性，其他檢測(cè)項(xiàng)目按照《中國(guó)藥典》進(jìn)行。結(jié)果Endostar凍干粉的純度大于99%，生物學(xué)活性每支含量2.4×10??5?U，等電點(diǎn)主區(qū)帶在8.8~9.8之間，凍干粉用胰蛋白酶消
2、化后，肽圖與理化對(duì)照品一致。結(jié)論按照此工藝制備的endostar凍干粉針劑各項(xiàng)指標(biāo)均符合《中國(guó)藥典》要求。?【關(guān)鍵詞】血管內(nèi)皮抑制素；凍干粉；純度；生物學(xué)活性；肽圖ProductionandQualityResearchofRecombinantHumanEndostatinFreeze-driedPowderLIUWu,YAOXue-jing,LIZhuang-lin.ShandongSimcere-MedgennBio-PharmaceuticalCo.,Ltd,Yantai264006,China?
7【Abstrac
3、t】ObjectiveTopreparerecombinanthumanendostatin(endostar)freeze-driedpowderandresearchitsquality.MethodsEndostarfreeze-driedpowderwaspreparedwith4%mannitol,2%sucrose,30mMsodiumacetate.TheproductpuritywasanalysedbySDS-PAGEandHPLC,andbiologicalactivitywasmeasuredwithH
4、UVEC.Othertestmethodswereperformedaccordingtochinesepharmacopoeia.ResultsThepurityofendostarfreeze-driedpowderwasmorethan99%.Thebiologicalactivitywas2.4±10??5?Uperpieceandisoelectricpointwasbetween8.8~9.8.Thepeptidemappingofendostarfreeze-driedpowderwasconsistentwi
5、threferencesubstance.ConclusionEndostarfreeze-driedpowderpreparedinaccordancewiththeprocesswereinlinewithchinesepharmacopoeiastandards.?【Keywords】Endostatin;Freeze-driedpowder;Purity;Biologicalactivity;Peptidemapping?
7?作者單位:264006煙臺(tái),山東先聲麥得津生物制藥有限公司血管內(nèi)皮抑制素是1997年O?R
6、eilly等從小鼠血管內(nèi)皮瘤的細(xì)胞培養(yǎng)液中分離獲得的天然蛋白分子，它是內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和新生血管生成的專一性抑制劑[1]，后來經(jīng)證實(shí)是膠原XVIIINC1結(jié)構(gòu)域C末端的多肽片段[2]。重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液于2005年9月在我國(guó)上市，主要用于非小細(xì)胞肺癌等惡性腫瘤的治療，并且具有無毒副作用、不容易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)[3,4]。但由于重組人血管內(nèi)皮抑制素水針劑需要低溫儲(chǔ)藏和冷鏈運(yùn)輸，因此其凍干粉針劑的研制和質(zhì)量控制具有重要意義。?1儀器與材料?1.1設(shè)備、儀器和細(xì)胞西林瓶灌裝機(jī)(長(zhǎng)沙楚天)；LYO-13凍干機(jī)(上海東富龍公
7、司)；電泳儀(Bio-Rad公司)；CO??2?培養(yǎng)箱(Sanyo公司)；酶標(biāo)儀(ThermoScientific公司)；HP1100型高效液相色譜儀(Agilent公司)；C??18?反相柱，粒度5μm，孔徑300?，4.6mm×25cm(Vydac公司)；HUVEC細(xì)胞株(本室保存)。?1.2藥品和試劑7Endostar原藥(批號(hào)YY2009024，濃度10.2mg/ml)、理化對(duì)照品(批號(hào)BZ08013，濃度2.64mg/ml)、活性標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)BZ09001，每支7.5mg，含1.2×10??5?U活性單位)均為山東
8、先聲麥得津生物制藥有限公司生產(chǎn)；內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基(ECM)(Sciencell公司)；胰蛋白酶(Sigma公司)；三氟乙酸，分析純，(E.Merk公司)；乙腈，色譜純(FisherScientific公司)；甘露醇(山東潔晶集團(tuán))；蔗糖(湖南爾康制藥)；三水合乙酸鈉(北京燕京藥業(yè))；MTS染
