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1、光氣染毒對(duì)小鼠肝臟的損傷作用論文李文麗，海春旭，劉瑞，張曉迪，秦緒軍【關(guān)鍵詞】肝臟/損傷【Abstract】AIM:TostudytheliverinjuryandKupffercell(KC)changesinducedbyphosgeneinmice.METHODS:Fortymicelydividedinto4groupsiceineach.Themiceincontrolgroupairandthemiceinpositivegroupsg/Lphosgenefor5minutes,respecti
2、vely.Attheendof2hours,4hoursand8hoursafterexposuretophosgene,allthemicealondialdehyde(MDA)andreductiveglutathion(GSH),andtheactivitiesofthetotalsuperoxidedismutase(TSOD)inlivericeeprolonged,andtheTSODactivitysignificantlyincreasedat2hoursafterphosgeneexpos
3、ure(P0.05).Hepatocyteicroscope,andincreasedlipiddropletsinhepatocytes,livebleeding,andapoptosisofKupffercellsiceunderelectronmicroscope.CONCLUSION:Phosgenemayinducehepatocyticoxidativeinjury,fatdenaturalizationandapoptosisofKupffercellsinmice.【Keyice【摘要】目的
4、：研究小鼠光氣染毒對(duì)肝臟的損傷作用與枯否氏細(xì)胞的變化.方法：40只小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為4組.正常對(duì)照組小鼠以空氣為對(duì)照，染毒組小鼠給予11.9mg/L劑量的光氣.freelin,染毒后2,.freelg/L劑量的光氣，時(shí)間為5min.1.2.2指標(biāo)測(cè)定染毒后2,4,8h斷頭取肝臟.右葉肝臟加生理鹽水制成1∶5的勻漿液，3000r/min離心10min，取上清測(cè)定MDA和GSH含量、TSOD活性.正常組和4h組立即取左下葉切小米粒大的肝組織20g/L戊二醛固定，其余用40g/L的甲醛固定，進(jìn)行透射電鏡觀察
5、及常規(guī)石蠟包埋和HE染色.MDA含量測(cè)定采用改進(jìn)的硫代巴比妥酸熒光法，TSOD活性測(cè)定采用改良鹽酸羥胺法，GSH含量采用改良熒光法.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s表示，應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.2結(jié)果2.1光氣染毒后不同時(shí)間小鼠肝臟MDA,GSH含量和TSOD活力的變化小鼠給予11.9mg/L劑量的光氣后可見(jiàn)：隨著染毒后時(shí)間的延長(zhǎng)，小鼠肝臟的MDA含量有升高趨勢(shì)，8h組顯著高于對(duì)照組（P0.05）；染毒組小鼠GSH含量與對(duì)照組相比顯著降低（P0.05）；TS
6、OD活力在染毒后2h組顯著升高（P0.05），4h開(kāi)始下降，8h顯著低于對(duì)照組（P0.05,Tab1）.表1光氣染毒后不同時(shí)間小鼠肝臟MDA,GSH含量和TSOD活力的變化（略）2.2光氣染毒小鼠肝臟光鏡病理改變光氣染毒小鼠可引起肝臟損傷，肝臟切片HE染色可見(jiàn)肝細(xì)胞有些腫脹，胞質(zhì)可見(jiàn)空泡，血管有充血（Fig1）.2.3光氣染毒小鼠肝臟超微病理改變光氣染毒小鼠肝細(xì)胞出現(xiàn)多種損傷(Fig2)，脂滴增多，肝臟出血，枯否氏細(xì)胞(Kupffercell,KC)胞核染色質(zhì)聚集成團(tuán)塊，呈現(xiàn)凋亡征象(Fig3).3討論光氣
7、的研究以往主要集中于它對(duì)肺臟的損傷［5-7］，本文針對(duì)光氣引起的肝臟損傷進(jìn)行研究.研究結(jié)果表明，光氣染毒后2h，GSH含量顯著低于對(duì)照組.隨著染毒后時(shí)間的延長(zhǎng)，GSH含量也隨之降低.已經(jīng)證實(shí)，光氣能與組織大分子的親核基團(tuán)如氨基、羥基、巰基發(fā)生?；磻?yīng)，引起蛋白和脂肪變性、不可逆的膜結(jié)構(gòu)改變、酶和其他細(xì)胞功能的破壞.光氣可耗竭肺組織的親核成分，特別是GSH［8］.本實(shí)驗(yàn)在肝組織也驗(yàn)證了這一觀點(diǎn).MDA是活性氧引起的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，是反映氧化損傷的可靠指標(biāo)［9］.實(shí)驗(yàn)中，肝臟MDA含量在染毒后2h,4h
8、未見(jiàn)明顯升高，8h后顯著高于對(duì)照組，提示光氣染毒后可造成肝臟的氧化損傷，并且急性光氣中毒早期測(cè)定肝臟的還原性GSH含量比MDA含量更加靈敏.Jaskot等［10］研究表明，急性光氣接觸幾天后，作為肺損傷的應(yīng)激反應(yīng)，肺組織的SOD增加.本研究表明，光氣染毒后2h，肝組織TSOD活性顯著高于對(duì)照組，這可能正是肝損傷的應(yīng)激反應(yīng)所致.實(shí)驗(yàn)中，光氣染毒后4h，肝組織TSOD活性開(kāi)始降低，GSH含量繼續(xù)降低；染毒后8h,TS
