資源描述：
《叔丁基對苯二酚對熱應激小鼠肝臟氧化損傷的緩解作用-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、動物營養(yǎng)學報2014，26(9)：2779—2788ChineseJournalofAnimalNutritiondoi：10．3969／j．issn．1006-267x。2014．09．041叔丁基對苯二酚對熱應激小鼠肝臟氧化損傷的緩解作用周鑫黃毅李延森李春梅(南京農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，南京210095)摘要：本試驗旨在研究叔丁基對苯二酚(tBHQ)對熱應激小鼠肝臟氧化損傷的影響。試驗選用50只6周齡ICR雄性小鼠隨機分為2組，每組25只，tBHQ(一)組飼喂基礎飼糧，tBHQ(+)組飼喂基礎飼糧中
2、添加1％tBHQ的試驗飼糧。飼喂14d后，小鼠每天進行42℃2h熱應激處理，連續(xù)8d。在熱應激之前(熱應激0d)和熱應激l、2、4、8d，每組各取5只小鼠處死，采集肝臟，測定肝臟重量和抗氧化指標，免疫組織化學方法檢測轉(zhuǎn)錄因子E2相關因子2(Nrf2)和血紅素加氧酶l(HO—1)蛋白表達，實時定量PCR法測定Nrf2及其調(diào)控表達基因的表達量。結果表明：1)tBHQ(一)組肝臟指數(shù)在熱應激4d恢復正常水平，而tBHQ(+)組在熱應激2d即恢復正常水平。2)與tBHQ(一)組相比，熱應激0d，tBHQ(+)
3、組肝臟總超氧化物歧化酶(T—SOD)活力顯著升高(P<0．05)，在熱應激4d時，還原型谷胱甘肽含量以及T—sOD、銅，鋅超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶活力顯著降低(P<0．05)。3)熱應激2d，tBHQ(一)組比tBHQ(+)組肝臟損傷情況更為嚴重。4)熱應激0d，tBHQ(一)組未檢測到Nrf2蛋白在肝臟組織表達，熱應激后各時間點都檢測到Nrf2蛋白的表達，而tBHQ(+)組在各階段均有表達；tBHQ(一)組在熱應激0、l、4和8d都檢測到HO一1蛋白的表達，而tBHQ(+)組在
4、熱應激0、l和2d時檢測到了HO·1蛋白的表達。5)與tBHQ(一)組相比，tBHQ(+)組多個Kelch樣ECH相關蛋白(Keap1)一Nf2／ARE信號通路相關基因表達量均顯著升高(P<0．05)。綜上所述，飼糧添加l％tBHQ對熱應激造成的小鼠肝臟氧化損傷能夠起到一定的緩解作用。關鍵詞：叔丁基對苯二酚；肝臟；熱應激；氧化損傷中圖分類號：S852．2文獻標識碼：A文章編號：1006-267X(2014)09．2779—10在現(xiàn)代畜牧生產(chǎn)過程中，高密度、集約化生產(chǎn)42℃全身熱應激，發(fā)現(xiàn)熱應激后小鼠體
5、重減輕，體帶來的各種應激因素越來越受到人們的重視，其表溫度和直腸溫度顯著升高，睪丸和附睪組織丙中高溫帶來的熱應激是一種常見的危害畜牧業(yè)的二醛(MDA)含量以及活性氧自由基(ROS)、超氧不利因素。通過營養(yǎng)調(diào)控手段，緩解熱應激對動化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—物造成的負面影響，已受到越來越多的學者關注。Px)活力升高。Kim等研究發(fā)現(xiàn)，熱應激后大鼠小鼠在急性熱應激后，會出現(xiàn)急躁不安，心率肝臟中脂肪酸合酶和氧化還原類酶活力以及脂質(zhì)加快，體表和直腸溫度升高，身體水分蒸發(fā)加劇，過氧化物相關
6、的基因轉(zhuǎn)錄水平顯著升高，MDA含進而導致脫水，血清滲透壓升高，體重減少。量顯著升高。本實驗室研究發(fā)現(xiàn)，體表溫度和直姜忠玲利用化學恒溫培養(yǎng)箱對小鼠實施持續(xù)腸溫度在熱處理后都極顯著高于熱處理前；組織收稿日期：2014-03-01基金項目：國家自然科學基金(31272485)；青藍工程；“十二五”國家科技支撐計劃(2012BAD39B02)作者簡介：周鑫(1988～)，男，浙江金華人，博士研究生，動物營養(yǎng)與飼料科學專業(yè)。E．mail：zhouxin_(2046@126．com}通訊作者：李春梅，教授，博士生
7、導師，E-mail：chunmeili@njau．edu．cn2780動物營養(yǎng)學報形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，熱處理導致小鼠肝臟組織充血TaKaRaPrimeScript固RTreagentKit反轉(zhuǎn)錄試劑盒和肝細胞水腫；小鼠肝臟MDA含量在熱處理2d和TaKaRaSYBR@PremixExTaqTM定量試劑盒為較對照組顯著升高，還原型谷胱甘肽(GSH)含量、日本TaKaRa公司產(chǎn)品；小鼠Nrf2特異性抗體購GSH—Px活力和T-SOD活力在熱處理4和12d都自美國SantaCruz公司；小鼠HO—l特異性抗體購
8、有升高J。上述研究結果表明，小鼠熱處理后，肝自武漢博士德生物工程有限公司；免疫組織化學臟中產(chǎn)生了顯著的氧化應激。ABC染色試劑盒購自武漢博士德生物工程有限氧化應激是指機體在遭受各種有害刺激時，公司。體內(nèi)高活性分子如ROS和活性氮自由基產(chǎn)生過1．2方法多，氧化速度超出氧化物的清除速度，氧化系統(tǒng)和1．2．1試驗設計抗氧化系統(tǒng)失衡，從而導致組織損傷。過多的自50只6周齡雄性ICR小鼠[(35+1)g]隨機由基會攻擊蛋白質(zhì)、脂肪酸、磷脂和核酸等生物大分為2組，每
