粗提技術(shù)論文:壇紫菜r-藻紅蛋白的分離純化工藝與分析鑒定

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1、粗提技術(shù)論文:壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝與分析鑒定【中文摘要】藻紅蛋白作為壇紫菜中的一種重要生理活性物質(zhì),已廣泛應(yīng)用到食品、輕工業(yè)、化妝和醫(yī)藥等行業(yè),具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前藻紅蛋白主要是從紅藻中分離提取獲得,現(xiàn)已報(bào)道的分離純化工藝多為破壁粗提,鹽析沉淀粗分離再結(jié)合多步色譜層析純化獲得,這種工藝存在多種問題,比如細(xì)胞破碎不充分,提取效率較低、鹽析沉淀操作步驟繁瑣、多步柱層析成本較高等等,使得藻紅蛋白生產(chǎn)難以工業(yè)化,高純度藻紅蛋白價(jià)格十分昂貴,極大限制了藻紅蛋白的廣泛應(yīng)用。故本文針對(duì)壇紫菜R-藻紅蛋白分離純化存在的一系列問題,對(duì)比了多種破壁粗提技術(shù)并加以條件優(yōu)化,結(jié)

2、合兩步色譜層析,建立了壇紫菜R-藻紅蛋白分離純化新工藝,為藻紅蛋白大規(guī)模開發(fā)和利用提供了理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。(1)壇紫菜R-藻紅蛋白是胞內(nèi)蛋白,破壁技術(shù)作為藻紅蛋白提純的第一步直接關(guān)系到原料的利用率和藻紅蛋白的生產(chǎn)成本,具有十分重要的意義。故本研究比較了4種具有大規(guī)模提取應(yīng)用前景的粗提技術(shù)——溶脹法、化學(xué)處理法、超聲波法和攪切法對(duì)壇紫菜R-藻紅蛋白的提取效果,以R-藻紅蛋白提取得率、純度和提取時(shí)間為參數(shù),確定攪切法為最佳粗提技術(shù),并對(duì)這種方法的物料比、攪切轉(zhuǎn)速和攪切時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化,結(jié)果表明當(dāng)物料比為1:...【英文摘要】Asanimportantphysiologica

3、lactivesubstanceofPorphyrahaitanensis,R-phycoerythriniswidespreadappliedinfood,cosmeticsandpharmaceuticalindustrywithaveryhigheconomicvalue.Atpresentphycoerythrinismainlyseparatedfromtheredalgae.Therearemanyreportsoftheseparationandpurificationaboutitathomeandabroad.Conventionalproteinpu

4、rificationproceduresinvolvethreesteps:pretreatmentofthesampletoallowtheintracellularmaterialtobecomeliberated,makingacrudeextract...【關(guān)鍵詞】粗提技術(shù)離子交換色譜凝膠過濾色譜壇紫菜R-藻紅蛋白分離純化【英文關(guān)鍵詞】ExtractionandPurificationIonExchangeChromatographyGelFiltrationR-phycoerythrinAnalysis【目錄】壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝與分析鑒定摘要4-

5、6Abstract6-7目錄8-11引言11-121文獻(xiàn)綜述12-241.1藻紅蛋白的概論12-171.1.1藻紅蛋白與藻膽蛋白12-131.1.2藻紅蛋白的結(jié)構(gòu)與組成13-151.1.3藻紅蛋白的分類15-161.1.4藻紅蛋白的理化性質(zhì)16-171.2藻紅蛋白的應(yīng)用17-191.2.1在免疫熒光技術(shù)方面的應(yīng)用17-181.2.2在食品行業(yè)和精細(xì)化工方面的應(yīng)用181.2.3在醫(yī)藥保健藥物開發(fā)方面的應(yīng)用18-191.3藻紅蛋白的提取與粗分離19-211.3.1破壁粗提19-201.3.2粗制方法20-211.4藻紅蛋白的分離純化21-221.4.1吸附層析21-221.

6、4.2離子交換層析221.4.3凝膠柱層析221.5本文研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線22-242壇紫菜R-藻紅蛋白的粗提技術(shù)的比較24-362.1材料與方法24-252.1.1材料與試劑242.1.2儀器及設(shè)備242.1.3細(xì)胞破碎方法24-252.1.4壇紫菜R-藻紅蛋白得率和純度的計(jì)算252.2結(jié)果與討論25-352.2.1溶脹法25-272.2.2化學(xué)處理法27-292.2.3超聲破碎法29-322.2.4攪切法32-352.3本章小結(jié)35-363壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝的建立36-553.1材料與方法36-383.1.1材料與試劑363.1.2儀器與裝置36-37

7、3.1.3實(shí)驗(yàn)方法37-383.2結(jié)果與討論38-533.2.1離子交換介質(zhì)種類的選擇39-403.2.2緩沖液種類的選擇40-423.2.3起始緩沖液pH的優(yōu)化42-443.2.4洗脫液鹽濃度的優(yōu)化44-473.2.5上樣體積的優(yōu)化473.2.6洗脫流速的優(yōu)化47-483.2.7離子交換層析的放大48-493.2.8不同孔徑超濾膜的選擇49-503.2.9凝膠過濾層析50-533.3本章小結(jié)53-554壇紫菜R-藻紅蛋白的分析鑒定55-654.1材料與方法55-584.1.1材料與試劑554.1.2儀器與設(shè)備554.1.3實(shí)驗(yàn)方法55-

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