植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

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1、MS培養(yǎng)基是目前使用最普遍的培養(yǎng)基。其具有較高的無(wú)機(jī)鹽濃度，能夠保證組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長(zhǎng)。由于配方中的離子濃度高，在配制、貯存和消毒等過(guò)程中，即使有些成分略有出入，也不會(huì)影響離子間的平衡。MS固體培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)愈傷組織，也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養(yǎng)，其液體培養(yǎng)基用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)能獲得明顯的成功。MS培養(yǎng)基的無(wú)機(jī)養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適，足以滿足植物細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)上和生理上的需要。因此，一般情況下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分。和其它培養(yǎng)基的

2、基本成分相比，MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高，這是它的顯著特點(diǎn)。1．下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)，說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　A　)A．對(duì)材料的選擇最常用的方法是焙花青—鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色醋酸洋紅法B．材料消毒時(shí)需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸鈣溶液浸泡，最后用無(wú)菌水沖洗C．接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照，但幼小植株形成后需要光照D．若接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或形成胚狀體后，要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便進(jìn)一步分化成再生植株。2．MS培養(yǎng)基和培養(yǎng)微生物所配制的培養(yǎng)基的主要區(qū)別是(　A　)A．MS培養(yǎng)基一

3、般含植物激素，微生物培養(yǎng)基不含植物激素B．MS培養(yǎng)基需要氨基酸，微生物培養(yǎng)基不含各種氨基酸C．MS培養(yǎng)基需要碳源，微生物培養(yǎng)基不含碳源D．MS培養(yǎng)基含維生素B1和維生素B2，而微生物培養(yǎng)基不含3．(2010年臨沂模擬)菊花的花粉經(jīng)組織培養(yǎng)可發(fā)育成一株幼苗，這一過(guò)程不涉及下列哪一項(xiàng)(　D　)A．有絲分裂、細(xì)胞分化、組織器官的形成B．呼吸作用、光合作用、相關(guān)激素的調(diào)控C．DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的生物合成D．等位基因的分離、非等位基因的自由組合4．某種花卉感染了植物病毒，葉子呈現(xiàn)皰狀，欲培養(yǎng)出無(wú)病毒的后代，

4、應(yīng)采取的方法是(　C　)A．用種子培養(yǎng)后代B．用無(wú)明顯癥狀部分的枝扦插C．用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)誘導(dǎo)出植株D．用葉表皮細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，誘導(dǎo)出植株5．如下圖所示，圖Ⅰ為植物組織培養(yǎng)流程圖，圖Ⅱ?yàn)橹参锝M織培養(yǎng)過(guò)程的部分示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是____________植物細(xì)胞的全能性_______________。(2)圖Ⅰ中外植體是從植物____器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體____分離出來(lái)的。(3)圖Ⅰ中的②和圖ⅡA中培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物都是由無(wú)特定形態(tài)與功能的細(xì)胞組成，稱為_(kāi)___愈傷組織

5、____。(4)圖Ⅱ中D培養(yǎng)物已經(jīng)形成幼體。請(qǐng)根據(jù)植物組織培養(yǎng)過(guò)程對(duì)圖Ⅱ重新排序：　　B→A→D→C　　　　?！敬鸢浮俊?1)植物細(xì)胞的全能性　(2)器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體　(3)愈傷組織　(4)B→A→D→C6．利用植物組織培養(yǎng)的方法可快速、大量地繁殖植物。在培養(yǎng)過(guò)程中，取該植物的花芽并將其分別培養(yǎng)在含有不同比例的吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基中，花芽的生長(zhǎng)狀況如下表所示。生長(zhǎng)素=吲哚乙酸！??！A組花芽B組花芽C組花芽D組花芽E組花芽吲哚乙酸03ppm3ppm0.03ppm0細(xì)胞分裂素00.2ppm0

6、.002ppm1.0ppm0.2ppm花芽生長(zhǎng)狀況組織、切塊形成愈傷組織愈傷組織分化出根愈傷組織分化出嫩芽稍生長(zhǎng)請(qǐng)據(jù)表回答下列問(wèn)題：(1)在此過(guò)程中能實(shí)現(xiàn)脫分化的花芽是____BCD____組。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，能誘導(dǎo)新芽形成的條件是_____________細(xì)胞分裂素濃度大于吲哚乙酸濃度_____________________________________________________________________________________。(2)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，

7、誘導(dǎo)芽和根形成的關(guān)鍵是_________________________________培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素含量與生長(zhǎng)素含量之間的比例(或培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的濃度比)__________________________。在生產(chǎn)實(shí)踐中，欲快速、大量獲得此植物的花芽，可選用___D___組的培養(yǎng)基進(jìn)行大量生產(chǎn)。7．葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過(guò)程可以用下圖解簡(jiǎn)單表示：(1)圖解中“酶解”所用的酶應(yīng)該包括______纖維素酶、果膠酶_______。(2)圖解中“原生質(zhì)體”的結(jié)構(gòu)由細(xì)胞的______細(xì)

8、胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核______三部分組成。(3)“DPD培養(yǎng)基”的成分中，除了糖類、無(wú)機(jī)鹽等各種營(yíng)養(yǎng)成分外，還必須含有_植物激素_才能獲得愈傷組織。(4)獲得原生質(zhì)體后，需要對(duì)其活力進(jìn)行檢查，下列哪種實(shí)驗(yàn)最適合？___B____。A．觀察原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)是否完整B．觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)C．觀察細(xì)胞的有絲分裂D．觀察葉綠體數(shù)目的多少(5)一般在培養(yǎng)基上培養(yǎng)24～48小時(shí)后，大部分原生質(zhì)體已再生出細(xì)胞壁?？梢匀?，利用25%的蔗糖溶液以