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1、姜黃素對(duì)MPP+誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡的抑制作用作者:陳靜,李波,李紅軍,肖長(zhǎng)義【摘要】目的觀察姜黃素(Curcumin,Cur)對(duì)MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的影響,并且探討其作用機(jī)理。方法采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,碘化丙啶染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)PC12細(xì)胞凋亡,羅丹明123染色FCM檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位(△Ψm),雙氫羅丹明123染色FCM檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的含量。結(jié)果不同濃度MPP+作用PC12細(xì)胞24h后,細(xì)胞存活率顯著下降(P<0.01),與單純MPP+處理組比較,20μmol/LCur和不同濃度的MPP+同時(shí)處理PC12細(xì)胞24h后,細(xì)胞存活率顯著升高(P&
2、lt;0.01);一定濃度的Cur對(duì)PC12細(xì)胞作用24h后無明顯凋亡誘導(dǎo)作用,但可使MPP+處理組細(xì)胞凋亡率下降(P<0.01);20μmol/LCur可抑制MPP+引起的PC12細(xì)胞△Ψm降低及細(xì)胞內(nèi)ROS含量增多。結(jié)論姜黃素可以抑制MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡,其作用機(jī)理可能與維持線粒體正常膜電位,穩(wěn)定線粒體功能,清除ROS有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】姜黃素;1-甲基-4-苯基-吡啶;細(xì)胞凋亡;活性氧;帕金森病 Abstract:ObjectiveToinvestigatethecytopretectionofcurcumin(Cur)againstPC12cellapoptosisin
3、ducedby121-methyl-4-phenylpyridium(MPP+)andthemechanisms.MethodsAMTTassaywasusedtodetectthecellvitality,andPIstainingflowcytometry(FCM)wasusedtoanalyzethePC12cellapoptosis,fluorescentprobeofrhodamine123stainingwasusedtomeasurethemitochondrialpotential(△Ψm),dihydrohodamine123(DHR)stainingFCMwasusedt
4、odetectthelevelsofreactiveoxygenspecies(ROS).ResultsPC12cellswereexposedtodifferentconcentrationsofMPP+for24hours.Thecellsvitalitydecreasedsignificantly(P<0.01).ComparedtoMPP+alonegroup,aftertreatedwith20μmol/LCurincombinationwithdifferentconcentrationsofMPP+,thecellvitalityelevatedsignificantly
5、(P<0.01).TheindicateconcentrationsofCurdidnotinduceapoptosisinPC12cells.However,theproportionofPC12cellsapoptosisinducedbyMPP+decreasedsignificantlyaftertreatedwithCur(P<0.01).20μmol/LCurcouldpreventthedecreaseof△ΨmandtheelevationofROSinducedbyMPP+.ConclusionCurcaninhibitthePC12cellsapoptosis
6、inducedbyMPP+,itsmechanismmaybeassociatedwithmaintenanceof△ΨmandremovalROS. Keywords:curcumin;1-methyl-4-phenylpyridium;apoptosis;reactiveoxygnspecies;Parkinsondisease12 帕金森?。≒arkinson’sdisease,PD)是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,形態(tài)學(xué)研究表明PD病人腦內(nèi)多巴胺(Dopamine,DA)能神經(jīng)元呈凋亡樣改變,提示細(xì)胞凋亡可能參與了PD的發(fā)病過程[1],但其具體機(jī)理尚未完全明了,目前認(rèn)為可能與線
7、粒體功能障礙、氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)導(dǎo)致活性氧(ROS)過多有關(guān)。目前還沒有根治帕金森病的有效方法,現(xiàn)有的主要治療方法只能在發(fā)病初期緩解癥狀,隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng),藥效逐漸下降,并且常常出現(xiàn)嚴(yán)重的副作用[2]。因此現(xiàn)在研制和開發(fā)療效高、副作用少、能真正阻止病程發(fā)展的治療藥物是臨床迫切需要解決的問題?! 〗陙硖烊凰幬镌谥委熒窠?jīng)退行性病中的作用已經(jīng)引起各國學(xué)者的廣泛關(guān)注。姜黃(CurcumalongaL)是一種多年