組蛋白去乙酰化酶在mpp+誘導(dǎo)pc12細(xì)胞凋亡中的作用研究

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1、碩士學(xué)位論文+論文題目組蛋白去乙?;冈贛PP誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡中的作用研究研究生姓名翟北平指導(dǎo)教師姓名張正春專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)研究方向腦血管病論文提交日期2013年4月中文摘要組蛋白去乙?;冈贛PP+誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡中的作用研究II+組蛋白去乙?;冈贛PP誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡中的作用研究中文摘要+組蛋白去乙?;冈贛PP誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡中的作用研究中文摘要目的:++1.觀察MPP對PC12細(xì)胞的存活率、凋亡率的影響,分析MPP處理后I型組蛋白去乙?;傅谋磉_(dá)水平以及組蛋白乙酰化水平的變化;+2.觀察組蛋白去乙?;敢种苿┍焖幔╒PA)對MPP所致

2、PC12細(xì)胞凋亡的抑制作用;+3.觀察MPP對帕金森病致病蛋白α-synuclein轉(zhuǎn)錄及表達(dá)水平的影響,并分析丙戊酸的拮抗作用。方法:+1.分別用不同濃度的MPP(100、300、500μmol/L)處理PC12細(xì)胞48h,MTT法檢測細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,Westernblot分析Caspase3、Acetyl-H3、Acetyl-H4以及HDAC1、2、3、8表達(dá)水平的變化;+2.HDAC抑制劑丙戊酸(VPA)預(yù)處理PC12細(xì)胞30min,然后給予MPP處理48h,MTT法檢測細(xì)胞存活率,Westernblot檢測caspase3、Ace

3、tyl-H3、Acetyl-H4的表達(dá)水平;3.HDAC抑制劑丙戊酸(VPA)預(yù)處理PC12細(xì)胞30min,然后給予MPP+處理48h,real-timeRT-PCR分析α-synuclein轉(zhuǎn)錄水平的變化,Westernblot檢測α-synuclein表達(dá)水平的變化。結(jié)果:+1.不同濃度的MPP處理PC12細(xì)胞48h后,隨著藥物濃度的增加細(xì)胞存活率顯著降低(P<0.001),細(xì)胞凋亡率升高(P<0.001);Caspase3被剪切激活,Acetyl-H3、Acetyl-H4的表達(dá)下降,HDAC1、2、3、8表達(dá)升高;I中文摘要組蛋白去乙?;冈贛PP+誘導(dǎo)P

4、C12細(xì)胞凋亡中的作用研究2.1.0mmol/L的VPA可顯著提高細(xì)胞的存活率(P<0.001)、降低細(xì)胞凋亡率(P<0.05);Caspase3的活化受到抑制,Acetyl-H3、Acetyl-H4的表達(dá)升高;3.1.0mmol/L的VPA預(yù)處理后,α-synuclein的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)水平均顯著降低(P<0.01)。結(jié)論:+1.MPP可顯著降低PC12細(xì)胞的存活率,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,其機制可能與其上調(diào)I型HDAC的表達(dá)水平有關(guān);+2.HDAC抑制劑VPA可顯著拮抗MPP所致的PC12細(xì)胞凋亡;3.VPA可顯著降低PD致病蛋白α-synuclein的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)水平。+

5、關(guān)鍵詞:組蛋白去乙?;?;MPP;PC12細(xì)胞;細(xì)胞凋亡;帕金森病作者:翟北平導(dǎo)師:張正春II+StudyontheeffectofhistonedeacetylaseinapoptosisofPC12cellbyMPPAbstractStudyontheeffectofhistonedeacetylaseinapoptosisof+PC12cellbyMPPAbstractObjective+1.ToobservedtheinfluenceofMPPonPC12cellscellviability、apoptosisrate,and+analysistheex

6、pressionlevelofIhistonedeacetylaseaftertreatedbyMPPandchangesinthelevelofhistoneacetylation;2.Toobservedtheinhibitoryeffectofthehistonedeacetylaseinhibitorvalproicacid+(VPA)onPC12cellapoptosisinducedbyMPP;+3.ToobservedtheeffectsofMPPonParkinsondiseaseproteintranscriptionandexpression

7、oftheα-synuclein,andanalysistheantagonisticeffectofvalproicacid.Methods+1.PC12cellsweretreatedwithdifferentconcentrationsofMPPfor48h,thecellsviabilitywasanalyzedbyMTTassay;Flowcytometrywasusedtostudytheapoptotic;WesternblotanalysiswereusedtostudytheexpressionlevelofCaspase3,HDAC1,2,3

8、,8andAcetyl-

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