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《hplc法測(cè)定輻花中獐牙菜苦苷的含量》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、HPLC法測(cè)定輻花中獐牙菜苦苷的含量作者：張秀橋,黃鳳嬌,陳家春,劉焱文【摘要】目的建立輻花中獐牙菜苦苷含量測(cè)定的方法。方法用高效液相色譜法,色譜柱為AlltimalC18(5μm,250mm×4.6mm),流動(dòng)相為甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脫,流速1mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)234nm,柱溫30℃。結(jié)果獐牙菜苦苷在3.10～30.98μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)為0.9991；平均回收率為98.0%,RSD＝2.66%(n＝6)。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便,分離度好,為建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。【關(guān)鍵詞】輻花；高
2、效液相色譜法；獐牙菜苦苷；含量測(cè)定Abstract：ObjectiveToestablishamethodforcontentdeterminationofswertiamarininLomatogoniopsisalpina.MethodsHPLCmethodfordeterminationwasused.Chromatographiccolumn：AlltimalC18(250mm×4.6mm,5μm).Mobilephase：methanol-water(including0.05%H3PO4),andgradient
3、elution.Flowrate：1mL/min.Wavelength：234nm.Columntemperture：30℃.ResultsThecalibrationcurveofswertiamarinwasingoodlinearityovertherangeof3.10～30.98(r=0.9991).Theaveragerecoverieswere98.0%,withRSD＝2.66%(n＝6).ConclusionItis6asimpleandsensitivemethodincontrollingthequal
4、ityofLomatogoniopsisalpina. Keywords：Lomatogoniopsisalpina；HPLC；swertiamarin；determination輻花來源于龍膽科輻花屬植物L(fēng)omatogoniopsisalpinaT.N.HoetS.W.Liu,主要產(chǎn)于西藏東北部、青海南部及四川等地,生于云杉林緣、陰坡草甸及灌叢草甸中。輻花是國(guó)務(wù)院于1999年8月4日批準(zhǔn)的《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生植物名錄(第一批)》保護(hù)級(jí)別為Ⅱ級(jí)的品種之一。為了變野生為家種,為建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),本試驗(yàn)用HPLC法測(cè)定
5、了輻花中獐牙菜苦苷(swertiamarin)的含量。 1儀器與試藥 美國(guó)Agilent1100高效液相色譜儀(G1311A泵、柱溫箱、G1316A紫外檢測(cè)器、Shemstation色譜工作站),SartoriusBP211D分析天平。 藥材采自四川省阿壩州金川縣俄熱,經(jīng)華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院陳家春教授鑒定為龍膽科輻花屬植物L(fēng)omatogoniopsisalpinaT.N.HoetS.W.Liu。6 對(duì)照品獐牙菜苦苷自提,HPLC歸一法測(cè)定純度>98%。甲醇為色譜純,水為重蒸水,均經(jīng)0.45μm濾膜濾過?！ ?
6、方法和結(jié)果 2.1色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱為AlltimalC18(250mm×4.6mm,5μm)。流動(dòng)相為甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脫,0～25min,甲醇由20%增至50%；25～35min,甲醇由50%增至60%；流速1mL/min。檢測(cè)波長(zhǎng)234nm,柱溫30℃。理論塔板數(shù)均>104,對(duì)稱因子0.95～1.05。色譜圖見圖1?！ ?.2供試品溶液的制備 2.2.1對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取對(duì)照品獐牙菜苦苷一定量,混合后用甲醇超聲溶解并定容,制成濃度分別為1.549mg/mL的溶液
7、,經(jīng)0.45μm濾膜濾過,濾液作為對(duì)照品溶液?！ ?.2.2樣品溶液的制備6 取輻花全草0.5kg,置45℃烘箱干燥至恒重,粉碎,過80目篩,混合均勻后取約0.25g,精密稱定。用約8mL甲醇浸泡過夜,超聲提取2次,每次30min,濾過。合并濾液,濾液水浴蒸干后用甲醇定容至10mL,經(jīng)0.45μm濾膜濾過,濾液作為樣品溶液。 2.3方法學(xué)考察 2.3.1線性關(guān)系考察試驗(yàn) 取上述對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣2、4、8、10、12、16、18、20μL(n＝2),以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸計(jì)算,獐牙菜苦苷回歸方程為
8、：Y＝594.29X＋127.34,r＝0.9991,進(jìn)樣量在3.10～30.98μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?！ ?.3.2精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣5次,每次10μL,計(jì)算峰面積,RSD＝0.93%,結(jié)果表明精密度良好。 2.3.3重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品5份,按“2.2.2”
