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《b組柯薩奇病毒對心肌細胞感染模式的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、B組柯薩奇病毒對心肌細胞感染模式的研究作者:張中海,張琦,閆長棟,鐘照華【摘要】目的觀察B組柯薩奇病毒(CoxsackievirusB,CVB)在原代心肌細胞中的感染特點,從而研究CVB對心肌細胞的致病機制。方法原代培養(yǎng)Balb/c乳鼠心肌細胞,并獲得純化的心肌細胞。使用B組柯薩奇病毒嗜心肌毒株3型(CVB3m)攻擊原代心肌細胞,觀察病毒感染心肌細胞后心肌細胞的細胞病變、超微結(jié)構(gòu)和心肌酶的變化。結(jié)果成功原代培養(yǎng)了Balb/c乳鼠心肌細胞。心肌細胞在病毒感染后,細胞病變(CPE)不明顯,與在HeLa等細胞中的典型CPE不同。心肌細胞在CVB3m感染后保持細胞形態(tài)和
2、博動超過2周時間。電鏡顯示心肌細胞結(jié)構(gòu)正常,細胞器數(shù)量增加,在心肌細胞胞質(zhì)中可見晶格樣病毒顆粒排列。培養(yǎng)細胞的上清液中心肌酶升高。結(jié)論CVB在原代心肌細胞中表現(xiàn)為持續(xù)感染,CVB在心肌細胞中的致病機制不同于HeLa細胞?!娟P(guān)鍵詞】心肌細胞;B組柯薩奇病毒;Balb/c乳鼠;原代細胞培養(yǎng) Abstract:ObjectiveToinvestigatethecharacteristicsofCoxsackievirusB(CVB)onprimarilyculturedmyocardialcellsandtoexplorethepathogenesisofcardi
3、omyocytes.MethodsCardiomyocytesfromBalb/csucklingmousewereculturedinvitro,16andpurifiedmyocardialcellswereobtained.TheculturedmyocardialcellswereattackedwithCVB3m,amyocardialtropicCoxsackievirusBstrain.Thecytopathiceffect(CPE)andultrastructureoftheCVB3m-infectedmyocardialcellswereobs
4、erved.Thevariationsofmyocardialenzymesinthesupernantoftheculturemediumweredetermined.ResultsThecardiomyocytesfromneonateBalb/cmiceweresuccessfullycultured.NoapparentCPEcouldbeobservedintheculturedmyocardialcellsfollowingtheCVB3mattack,whichwasdifferentfromthetypicalCPEintheinfections
5、ofHeLacells.Thecardiomyocytesretainedintactmorphologyandpulsationforovertwoweeksasoftheinfection.Theelectronicmicroscopyshowedthatthemyocardialcellshadnormalultrastructure,withanincreaseinthenumberoforganellesandvisiblecrystally-arrangedviralparticlesinthecytoplasm.Thelevelofmyocardi
6、alenzymesinthesupernatantoftheinfectedmyocardialcellswashigherthanthatofthecontrolgroup.ConclusionCVBcanpersistentlyinfectcardiomyocytes.ThepathogenesisofCVBonmyocardialcellsdiffersfromthatinHeLacell. Keywords:cardiomyocytes;CoxsackievirusB;sucking16Balb/cmouse;primarycellculture B
7、組柯薩奇病毒(CoxsackievirusB,CVB)是病毒性心肌炎和心肌病的主要病因,其敏感動物模型是Balb/c乳鼠,如果要離體研究CVB對心肌的致病性,必須原代培養(yǎng)Balb/c乳鼠心肌細胞[1]。CVB感染細胞通常表現(xiàn)為急性殺細胞病變,例如,宮頸癌細胞HeLa細胞是CVB致病機制研究中最常用的細胞平臺,CVB感染HeLa細胞后,在24h出現(xiàn)明顯細胞病變(CPE),細胞變圓聚集,48h細胞死亡脫落;理論上,CVB感染心肌細胞也應(yīng)該表現(xiàn)為殺細胞效應(yīng)。但是,分子流行病學(xué)研究證明,CVB可以持續(xù)存在心肌組織中。Quigley等[2]觀察23例臨床和組織學(xué)表現(xiàn)為心肌
8、炎的患者,其中12例在平