時(shí)間分辨免疫熒光與化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法測(cè)定光法標(biāo)志物的比較

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1、時(shí)間分辨免疫熒光與化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙肝標(biāo)志物的比較作者:不詳??來源:本站??發(fā)布時(shí)間:2006-11-1521:26:33??瀏覽:43字號(hào)選擇〖?大中小?〗摘?要目的:比較化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定(CL)、酶聯(lián)免疫(EIA)與時(shí)間分辨免疫熒光(TRFIA)三種方法檢測(cè)乙肝病毒免疫標(biāo)志物的優(yōu)缺點(diǎn)。方法:用上述三種方法的檢測(cè)試劑及儀器對(duì)189例臨床血清標(biāo)本分別進(jìn)行檢測(cè),然后進(jìn)行結(jié)果分析。結(jié)果:三者對(duì)乙肝表面抗原的檢測(cè)靈敏度均達(dá)到了0.1ng/ml。對(duì)HBcAb的測(cè)定,以CL的靈敏度最高,ELISA最低。對(duì)表面抗體、E抗原及E抗體的檢測(cè),

2、相互符合率均在95%以上,但對(duì)核心抗體的檢測(cè)符合率,TRFIA與CL為83.23%,TRFIA與EIA為85.19%。結(jié)論:三種方法的檢測(cè)性能相差不大,但操作性各有特點(diǎn),應(yīng)按各實(shí)驗(yàn)室具體情況加以選擇?! £P(guān)鍵詞:化學(xué)發(fā)光法,酶聯(lián)免疫試驗(yàn),時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定  本文作者:肖征周薇薇 白立彥 趙莉萍??Comparisonofchemiluminescence,ELISAandtime-resolvedfluoroimmunoassayindetectingHepatitisBmarkers肖征,副主任醫(yī)師,副教授周薇薇,主管技師白立彥,主

3、管技師趙莉萍,主管技師解放軍總醫(yī)院微生物科,100853北京ZhengXiao,WeiweiZhou,LiyanBai,LipingZhaoGeneralHospitalofPLA,Beijing,100853PRC?AbstractSubject:TocomparethreedeferentassaystoseetheirabilitiesindetectinghepatitisBmarkers.  Methods:ByusingChemiluminescence(CL),ELISAandTime-resolvedfluoroimmun

4、oassay(TRFIA),189serumsamplesweretestedforhepatitisBmarkers,thentheresultswereanalyzed.  Results:Thethreeassaysallcandetectaslowas0.1ng/mlofHBsAg.ButinHBcAb,TheCLshowedthehighestsensitivity,ELISAshowedthelowestsensitivity.ThecoincidencesofthethreemethodsindetectingHBsAb,H

5、BeAg,andHBeAbarenormallyabove95%,butforHBcAb,thecoincidencewas83.23%betweenTRIFandCL,and85.19%betweenTRIFAandEIA.  Conclusion:TherewerenotmuchdifferenceamongthesethreemethodsregardingtheirabilitiesindetectinghepatitisBmarkers,butthemaneuverflexibilitiesofeachmethoddiffere

6、dalot.Oneshouldconsiderhisownlab'ssituationbeforemakingchoice.??  Keywords:chemiluminescence,ELISA,time-resolvedfluoroimmunoassay?自二十世紀(jì)七十年代以來,許多高靈敏度的測(cè)定方法應(yīng)用于臨床免疫學(xué)檢測(cè)。其中,酶聯(lián)免疫法應(yīng)用最廣。近年來發(fā)展起來的CL與TRFIA測(cè)定據(jù)稱是靈敏度非常高的方法[1,2,3]。本文就這三種方法對(duì)乙肝免疫標(biāo)志物的測(cè)定作一比較,以下結(jié)果供大家參考。?材料與方法1.試劑與器材:時(shí)間分辨免疫熒光測(cè)

7、定為上海新波生物公司生產(chǎn)的乙肝兩對(duì)半測(cè)定試劑盒,及由該公司提供的洗板機(jī)、孵育器和時(shí)間分辨免疫熒光測(cè)定儀以及分析判定結(jié)果軟件系統(tǒng)?! ∶嘎?lián)免疫方法試劑為SORIN公司(HBsAg)、科華公司(HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)產(chǎn)品;儀器有洗板機(jī)(WELLWASH4)、酶標(biāo)比色儀(READER230S),部分試驗(yàn)在FAME(全自動(dòng)開放式酶免分析儀)上進(jìn)行。  化學(xué)發(fā)光法為強(qiáng)生公司VitrosEci化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定系統(tǒng)及配套的專門試劑盒。  標(biāo)本為臨床檢測(cè)乙肝標(biāo)志物的血液標(biāo)本,分離血清,-20℃保存?zhèn)溆?。HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品購自北京市

8、臨床檢驗(yàn)中心(2ng/ml),使用時(shí)稀釋至所需濃度。2.方法  ELISA按產(chǎn)品說明書進(jìn)行。主要步驟有:加樣、孵育、洗板、加酶或底物、顯色、比色。其中HBcAb測(cè)定的樣本經(jīng)1:30稀釋?! 

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