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《4種細(xì)胞學(xué)檢測(cè)方法對(duì)良惡性胸腹腔積液的鑒別價(jià)值.doc》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、4種細(xì)胞學(xué)檢測(cè)方法對(duì)良惡性胸腹腔積液的鑒別價(jià)值作者:張志慧,馮覺平,雷德利,李敏,方靜,陳嬌,盧娜【摘要】目的:比較4種細(xì)胞學(xué)檢測(cè)方法在鑒別良、惡性胸腹腔積液(胸腹水,malignantpleuraleffusion,MPE)中的差異。方法:對(duì)40例胸腔積液患者的胸腹水標(biāo)本分別同時(shí)采用石蠟包埋(CB)法、液基薄層制片法(TCT)、細(xì)胞離心涂片法、直接涂片(CS)法檢測(cè),結(jié)合組織病理檢查或治療、隨訪觀察比較4種方法的診斷符合率。結(jié)果:40例胸腹水中CB法、TCT法、細(xì)胞離心涂片法、CS法找到惡性腫瘤細(xì)胞分別為25例、21例、2例、0例,余為良性病變,
2、陽(yáng)性檢出率分別為62.5%、52.5%、5%、0%。經(jīng)與組織病理或臨床治療、隨訪結(jié)果對(duì)比,診斷符合率分別為:94.9%、84.6%、41.0%、35.9%。結(jié)論:CB法診斷符合率最高,TCT次之。這兩種方法在鑒別良、惡性胸腹水方面有較大的診斷價(jià)值。【關(guān)鍵詞】胸腹腔積液;細(xì)胞學(xué)檢測(cè);方法;隨訪觀察 胸腹腔積液(胸腹水)是臨床上較為常見的癥狀、體征之一,細(xì)胞學(xué)檢查是鑒別診斷良、惡性胸腹水的關(guān)鍵。尋找或改進(jìn)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)方法,提高臨床檢出率,是目前的熱點(diǎn)之一。目前臨床上多采用直接涂片(CS)法和細(xì)胞離心涂片法,少數(shù)采用液基薄層制片法(TCT)及石蠟包埋(C
3、B)法。然而有關(guān)4種細(xì)胞學(xué)方法的系統(tǒng)比較及其與臨床治療、隨訪的比較研究尚不多見。為此我們收集了40例胸腹水標(biāo)本,同時(shí)結(jié)合組織病理檢查或臨床隨訪觀察,系統(tǒng)比較了4種細(xì)胞學(xué)方法在診斷符合率上的差異,并對(duì)細(xì)胞塊CB法作一些小的改良,獲得了比較滿意的療效,現(xiàn)報(bào)道如下?! ?材料與方法 1.1臨床病例收集我院呼吸科、腫瘤科胸腹腔積液患者的胸、腹水標(biāo)本共40例,其中男性27例,女性13例;年齡20歲~87歲,平均年齡54歲;對(duì)胸腔積液量采取前肋計(jì)算法[1],大量胸腔積液(第2前肋水平以上)13例,中等量胸腔積液(第2至第4前肋水平)13例,少量胸腔積液(第4
4、前肋水平以下)12例(其中含極少量胸腔積液6例),腹水2例。留取胸腹水同時(shí)以CS法、細(xì)胞離心涂片法、TCT法和CB法檢測(cè)。部分有胸部腫塊(中央型)的患者作纖維支氣管鏡檢查。全部患者隨訪觀察。 1.2儀器與試劑 1.2.1儀器液基薄層自動(dòng)細(xì)胞制片機(jī)MZ-1、MZ-2型(寧波美生醫(yī)療器械有限公司),生物組織自動(dòng)脫水機(jī)ZT-12P2型(湖北亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司),石蠟切片機(jī)LEICARM52135(廣州三元科技有限公司),生物組織包埋機(jī)YB-6型(湖北亞光醫(yī)用電子技術(shù)研究所),光學(xué)電子顯微鏡OLYMPUSBX51TF型(日本生產(chǎn))?! ?.2.2
5、材料及試劑細(xì)胞采集器、細(xì)胞收集瓶、標(biāo)本轉(zhuǎn)移注射器、試管、吸嘴、膠環(huán)、載玻片及0.75蘇木精和EA/OG、碳酸鋰染液、橙黃G染液、EA液、95%酒精、二甲苯、氨水、伊紅?! ?.3方法 1.3.1CS法將送檢胸腹水標(biāo)本靜置10min~20min,棄上清,取容器底部液體5ml~10ml,涂于干凈載玻片上,冷風(fēng)吹干后,立即置酒精乙醚混合固定液中固定10min?! ?.3.2細(xì)胞離心涂片法常規(guī)胸腔穿刺,留取胸液100ml,肝素抗凝,以1000r/min的速度離心4min~10min,棄上清,取沉渣涂片,干燥后行常規(guī)蘇木素伊紅(HE)染色和瑞氏染色?! ?
6、.3.3TCT法常規(guī)胸腔穿刺,留取胸液100ml~200ml,靜置沉淀,棄去上清液,剩余液體以1000r/min的速度離心4min,棄上清,剩余約1.5cm左右沉渣,吹打混勻,而后利用離心沉淀技術(shù)自動(dòng)完成制片過程,最后在載玻片上形成一個(gè)直徑約1cm大小的細(xì)胞薄層,再行手工巴氏染色備檢?! ?.3.4CB法參照鄭暉方法[1]加以改良。將送檢胸腹水標(biāo)本靜置5min后,取容器底部液體100ml~200ml,離心10min,1000r/min,棄上清,管底剩余細(xì)胞液視情況不同而改變處理步驟:若送檢胸腹水中含黏液和纖維蛋白質(zhì)樣物質(zhì),離心震蕩后凝結(jié)成團(tuán)的細(xì)胞團(tuán)
7、塊不完全溶解,則將細(xì)胞團(tuán)直接用雙層紗布包好入包埋小框,自動(dòng)脫水機(jī)常規(guī)脫水,浸蠟,石蠟包埋;若送檢胸腹水標(biāo)本離心震蕩后,細(xì)胞團(tuán)完全溶解,則再次棄上清,其后將剩余底層的液體加入蛋清約1ml,用吸管吹打試管底部液體,使細(xì)胞沉渣與蛋清充分混合,盡量使細(xì)胞成團(tuán)懸浮于蛋清中;離心4min,1000r/min;去除上層多余蛋清,再次吹打混勻剩余的蛋清和細(xì)胞沉渣,用吸管將其全部移入鋪有雙層紗布?jí)K的包埋框內(nèi),紗布包裹,自動(dòng)脫水機(jī)常規(guī)脫水,浸蠟,包埋,切取3μm石蠟切片,60℃烤片,手工HE染色備檢?! ?結(jié)果 2.1細(xì)胞離心涂片法、TCT法與CB法比較本文中以CS
8、法無一例腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性,無法圖示。余如圖所示,細(xì)胞離心涂片法所涂片細(xì)胞量少,細(xì)胞分散不均勻,核漿對(duì)比欠清晰(圖1);TCT法