免疫防齲的研究新進展.doc

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1、免疫防齲的研究新進展齲病被認為是人類最普遍的感染性疾病。關(guān)于免疫防齲的研究已有近30年歷史。早在60年代末期，國外學(xué)者即開始了防齲疫苗的探索，期望通過接種某種防齲疫苗，有效地阻止致齲菌在宿主口內(nèi)的粘附與定殖，達到預(yù)防齲齒的目的。近年來，運用免疫學(xué)手段控制齲病更為其研究的熱點。大量研究證實，主動免疫與被動免疫均為有效的防齲手段。我們就近期國內(nèi)外免疫防齲的研究動態(tài)作一評述?！　∫弧⒅鲃用庖叻例x研究　　主動免疫是用人工接種的方法給機體輸入抗原性物質(zhì)，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而提高機體抗病能力。在主動免疫防齲研究過程中，存在著一些障礙，主要包括三個方面：①變形鏈球菌（簡稱變鏈菌）等致齲菌

2、一般定殖在宿主組織表面，在這些部位難以激發(fā)有效的免疫反應(yīng)；②抗變鏈菌抗體能與機體組織蛋白特別是心臟組織發(fā)生交叉反應(yīng)，產(chǎn)生免疫復(fù)合物介導(dǎo)的疾病如細菌性心內(nèi)膜炎；③變鏈菌與口內(nèi)其他鏈球菌具有交叉反應(yīng)性抗原，防齲疫苗介導(dǎo)的免疫反應(yīng)可能破壞口內(nèi)正常菌群的生態(tài)平衡。因此，多年來學(xué)者們一直致力于通過改變免疫原、免疫途徑、免疫佐劑和免疫頻率等手段，尋找一種安全有效的防齲疫苗。　　1．全菌疫苗：早期的防齲疫苗研究，主要是利用變鏈菌全細胞制備滅活死疫苗和減毒活疫苗。通過對大鼠、猴等實驗動物的免疫研究發(fā)現(xiàn)，免疫后的動物唾液和血清中抗變鏈菌抗體水平明顯升高，能有效地抑制變鏈菌在牙面的聚集，降低齲病的發(fā)生率。這

3、一時期的研究充分表明，利用變鏈菌全細胞多價疫苗可防止齲病的發(fā)生。但進一步研究顯示，與其他鏈球菌相似，變鏈菌某些抗原或成分可誘發(fā)與人心臟組織發(fā)生交叉反應(yīng)的抗體?！　?．純抗原亞單位疫苗：80年代開始，隨著對變鏈菌細胞壁各種抗原性多聚物的逐漸認識，免疫防齲轉(zhuǎn)入以變鏈菌單一抗原成分制備亞單位防齲疫苗的研究。研究的焦點集中于兩種候選疫苗，即變鏈菌主要表面蛋白抗原（pAc或agⅠ／Ⅱ、pl、spaA等）和葡糖基轉(zhuǎn)移酶（gTase），它們在介導(dǎo)變鏈菌對牙面的粘附和定殖過程中起著重要作用。近10年的大量研究證實，用pAc和gTase主動免疫能明顯抑制實驗動物和自愿受試者牙面變鏈菌的粘附和齲病發(fā)生率，且

4、純化的抗原不會介導(dǎo)心臟交叉反應(yīng)。但研究者發(fā)現(xiàn)，由于純抗原免疫原性較弱，單一免疫常難以同時激發(fā)有效的系統(tǒng)和局部免疫反應(yīng)。因此，學(xué)者們嘗試了經(jīng)口服、鼻內(nèi)注射、皮下注射和腹腔注射等多種途徑并加以佐劑進行免疫?！　Ac或gTase制備成微乳化的脂質(zhì)體疫苗，不僅經(jīng)濟、簡便，且能激發(fā)有效的血清和唾液抗變鏈菌抗體，明顯抑制實驗動物齲齒的發(fā)生。將pAc或gTase與霍亂毒素b亞單位（cTB）制備成嵌合疫苗，也是增強抗原免疫性的有效手段，能激發(fā)有效的循環(huán)抗體和局部粘膜反應(yīng)。我們（1996）將pAc與弗氏佐劑乳化后，給bALB／c小鼠皮下注射，結(jié)果顯示，免疫組血清特異性igG和唾液特異性igA抗體水平顯

5、著升高?！　∑暇厶墙Y(jié)合蛋白（gBPs）也被證實為有效的候選疫苗。smith等（1996）將gBP59給大鼠唾液腺周圍皮下注射，明顯抑制了鼠牙的光滑面及窩溝齲的發(fā)生。4　　3．多肽疫苗：自90代年以來，隨著免疫學(xué)、分子生物學(xué)和基因工程技術(shù)的飛速發(fā)展，從分子水平對變鏈菌pAc和gTase的認識逐步深入。目前，編碼這兩種抗原的基因pac和gtf已被克隆，核苷酸序列已基本清楚。用pAc和gTase分子中與某特定功能相關(guān)并具有免疫原性的核酸序列制備多肽防齲疫苗，已成為免疫防齲研究的熱門。目前研究證實，pAc分子的n末端唾液結(jié)合區(qū)（sBR）、粘附功能區(qū)（816～1213位殘基）、a區(qū)的t細胞和b細胞

6、抗原決定簇等；gTase分子的氨基末端的酶促區(qū)（cAT）、羧基末端的葡聚糖結(jié)合區(qū)（gLU）和高度保守的酶活性片段（gGY和aND）等是理想的候選多肽?！　∮捎诙嚯囊呙鐑H為病原體的單一保護性抗原或某一抗原決定簇，單純以游離的多肽免疫動物，常不能產(chǎn)生理想的免疫效果，也需將其結(jié)合至大分子載體上以增強其免疫原性。將pAcSBR與cT-B嵌合并以cT為佐劑，經(jīng)鼻內(nèi)免疫大鼠，可激發(fā)高水平的唾液抗pAcIgA抗體，并導(dǎo)致實驗動物齲活性下降。以sBR與cTA2／b嵌合口服免疫小鼠，也能激發(fā)高水平的特異性唾液sIgA和血清igG抗體。另外大腸桿菌的熱不穩(wěn)定毒素b亞單位（lT-B）也被證實能增加連接的spa

7、A多肽的免疫原性和生物學(xué)活性?！　×硗?，改變多肽結(jié)構(gòu)也是增強其免疫原性的有效手段。senpuku等（1996）發(fā)現(xiàn)將pAc分子的兩個肽段聯(lián)接后免疫動物，比分別用單一肽段免疫所激發(fā)的抗rPAc抗體明顯升高。因此認為，將多肽偶聯(lián)成束能顯著增強其免疫原性。smith等（1997）將gTF酶活性片段gGY和aND以賴氨酸為核心分別構(gòu)建有8條支鏈結(jié)構(gòu)的多肽疫苗，經(jīng)唾液腺周圍免疫大鼠，結(jié)果顯示，將抗原決定簇設(shè)計成這種結(jié)構(gòu)具有高度的免疫原性，能誘