芽孢桿菌產(chǎn)甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的提高論文

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1、目錄摘要1ABSTRACT2第一章緒論31.1β-甘露聚糖酶的研究現(xiàn)狀31.1.1β-甘露聚糖酶的來(lái)源31.1.2β-甘露聚糖酶的性質(zhì)41.1.3β-甘露聚糖酶的誘導(dǎo)41.2β-甘露聚糖酶的純化51.2.1純化的意義51.2.2分離純化工藝61.3β-甘露聚糖酶的穩(wěn)定性及穩(wěn)定化71.4β-甘露聚糖酶的應(yīng)用81.4.1石油鉆采81.4.2飼料添加劑81.4.3食品保健81.4.4造紙工業(yè)91.4.5紡織工業(yè)91.4.6工具酶91.5研究目的和研究?jī)?nèi)容91.5.1研究目的91.5.2研究?jī)?nèi)容10第二章枯草芽孢桿菌β-甘露聚糖酶的產(chǎn)生及性質(zhì)102.1實(shí)驗(yàn)儀器與材料102.1.1實(shí)驗(yàn)

2、儀器與設(shè)備102.1.2試劑112.1.3菌種112.1.4培養(yǎng)基122.2實(shí)驗(yàn)方法122.2.1粗酶液的制備122.2.2酶活的測(cè)定122.2.3溫度對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響142.2.4不同濃縮倍數(shù)對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性影響142.2.5反復(fù)凍融對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響142.2.6激活劑對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響142.2.7防腐劑對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響152.2.8金屬離子螯合劑對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響152.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析152.3.1溫度對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響152.3.2不同濃縮倍數(shù)對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定

3、性影響162.3.3反復(fù)凍融對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響172.3反復(fù)凍融情況下酶的穩(wěn)定性172.3.4保護(hù)劑對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響172.3.5防腐劑對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響182.3.6金屬離子螯合劑對(duì)β-甘露聚糖酶酶活穩(wěn)定性的影響18結(jié)論18展望19參考文獻(xiàn)20致謝22摘要β一甘露聚糖酶是一種重要的半纖維素酶,應(yīng)用廣泛,多采用微生物發(fā)酵制備。本文首先利用芽孢桿菌對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),并通過(guò)分離純化制得高純酶進(jìn)行運(yùn)用。對(duì)酶的穩(wěn)定性進(jìn)行研究,通過(guò)添加穩(wěn)定化試劑,儲(chǔ)存于不同的溫度,將酶濃縮成不同的倍數(shù),以及反復(fù)凍融來(lái)研究酶的穩(wěn)定性。主要工作如下:對(duì)芽孢桿

4、菌發(fā)酵產(chǎn)生的酶液進(jìn)行穩(wěn)定性檢測(cè)試驗(yàn),確定了芽孢桿菌產(chǎn)甘露聚糖酶的在各種不同的條件下酶活的穩(wěn)定性情況;優(yōu)化了酶液在儲(chǔ)存過(guò)程中的可能遇到的各種情況,大大降低了運(yùn)輸和儲(chǔ)存成本,有利于產(chǎn)品的后續(xù)精制以及使用。β一甘露聚糖酶粗酶液經(jīng)鹽析、超濾、離子交換層析、凝膠層析及超速離心即可制得純酶液。利用酶活隨溫度和反復(fù)凍融、不同濃縮倍數(shù)以及各種添加劑的變化而變化的規(guī)律,初步探討了各種外界因素對(duì)酶活力的影響??疾炝似叻N添加劑(葡萄糖、海藻酸鈉、山梨酸鉀、苯甲酸鈉、明膠、EDTA、乙醇)在不同濃度下對(duì)制備的β一甘露聚糖酶穩(wěn)定性的影響,結(jié)果表明:添加葡萄糖可大幅提高酶的熱穩(wěn)定性,4℃時(shí)甘露聚糖酶的穩(wěn)

5、定性較高。確定了濃縮酶的穩(wěn)定性,以及反復(fù)凍融對(duì)芽孢桿菌產(chǎn)甘露聚糖酶的穩(wěn)定性的影響。關(guān)鍵詞:芽孢桿菌甘露聚糖酶濃縮溫度反復(fù)凍融添加劑穩(wěn)定性ABSTRACTβ-mannanaseisanimportanthemicellulase,widelyused,theuseofmicrobialfermentationpreparation.ThefirstuseofBacillusculturefermentationmedium,andseparationandpurificationsystem,highpurityenzymeuse.Tostudythestabilityofth

6、eenzymebyaddingstablereagent,storedatdifferenttemperatures,theenzymeisconcentratedintoadifferentmultiples,aswellasrepeatedfreezingandthawingtostudythestabilityoftheenzyme.Themainworkisasfollows:EnzymeproducedbyBacillusstabilitytestingtodeterminethestabilityofthesituationBacillusmannanaseact

7、ivityinavarietyofconditions;tooptimizetheenzymeduringstoragemayencountervarioussituations,whichgreatlyreducesthecostoftransportationandstorage,follow-upofrefinedproductsandtheuseof.β-mannanasecrudeenzymesolutionbysaltingout,ultrafiltration,ionexchangechr

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