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《芽孢桿菌產(chǎn)β甘露聚糖酶的產(chǎn)酶條件及粗酶性質(zhì)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、／形-·京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會(huì)暨新思想、新觀點(diǎn)、新方法論壇-，論文集和作用，從而阻斷病毒細(xì)菌的黏著。PIMP添加到肉雞的飲水和飼料中，使GC數(shù)量和slgA數(shù)量及活性增強(qiáng)，說(shuō)明PIMP對(duì)杯狀細(xì)胞和腸道淋巴細(xì)胞的發(fā)育有一定的調(diào)節(jié)作用，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與一些資料的報(bào)道相一致。抗菌肽是一類廣泛存在于生物體中的小分子多肽，具有廣譜抗菌性，理化性質(zhì)穩(wěn)定，微生物不易對(duì)其產(chǎn)生抗藥性，是生物體自身防御系統(tǒng)的一部分。由于其能抗革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、真菌，抑殺多重耐藥性菌株和腫瘤細(xì)胞，并且對(duì)病毒、原蟲(chóng)及癌細(xì)胞也有作用，近二十年來(lái)，
2、抗菌肽在醫(yī)藥、轉(zhuǎn)基因應(yīng)用、農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)、食品和化妝品等領(lǐng)域均顯示了廣泛的應(yīng)用前景。作為屠宰加工的副產(chǎn)物，豬小腸粘膜來(lái)源豐富，小腸粘膜抗菌肽的加工工藝簡(jiǎn)單易操作，提取的小腸粘膜抗菌肽物理性質(zhì)穩(wěn)定，不易變性分解，保存方便，有利于生產(chǎn)實(shí)踐中的使用?？咕某煞譃橐紫盏陌被幔勺鳛樾笄蒿暳咸砑觿┤〈虿糠秩〈壳帮曃箘?dòng)物所用的抗生素，減少抗生素對(duì)動(dòng)物體的危害。在肉雞飲水和飼料中添加PIMP，能顯著提高腸道的吸收作用和腸道粘膜的免疫作用，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)吸收加強(qiáng)，天然免疫力增加，能夠促進(jìn)肉雞的生長(zhǎng)，縮短生長(zhǎng)期，有望作為一種新
3、型的飼料添加劑應(yīng)用于生產(chǎn)中。參考文獻(xiàn)(略)芽孢桿菌產(chǎn)p一甘露聚糖酶的產(chǎn)酶條件及粗酶性質(zhì)研究楊新建(北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院北京102442)摘要：為確定芽孢桿菌WXY一100的最佳搖瓶培養(yǎng)工藝，采用了汐(弼)正交實(shí)驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基成分以及培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，最佳培養(yǎng)基成分為：酵母抽提物209／L，魔芋粉209／L，(Nil,)2SO。29／L，KIt2P04．『∥L，Mgso?！?1-120lg／L。最佳培養(yǎng)條件為：種齡8—12h，接種量為6％，裝液量為25mL，pHz5，培養(yǎng)溫度們℃，培養(yǎng)時(shí)間25h。該酶在pH4—8
4、和6D℃以下穩(wěn)定，作用最適條件是pH5．0和6D℃，CⅡn和C∥+對(duì)酶有較顯著的激活作用，而n92+對(duì)酶有強(qiáng)烈的抑制作用。關(guān)鍵詞：口一甘露聚糖酶；芽孢桿菌；產(chǎn)酶條件；性質(zhì)有研究表明，B一甘露聚糖酶能有效分解存在于魔芋粉、槐豆膠、沙蒿膠、瓜兒豆膠等不同植物中的甘露聚糖以及葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖，主要產(chǎn)物為甘露低聚糖，而甘露低聚糖為功能糖類，有利于腸道雙歧桿菌、乳酸菌的生長(zhǎng)，抑制有害菌繁殖，從而改善腸道功能，增強(qiáng)免疫力【1’2J，同時(shí)甘露低聚糖還用于食品的加工貯藏、果汁的澄清[3】、紙漿的漂白[4]、植物膠質(zhì)的降解
5、以及低溫油井破膠[5】。本實(shí)驗(yàn)以提高B一甘露聚糖酶活力為目的，對(duì)影響酶活力的參數(shù)進(jìn)行了正交設(shè)計(jì)，得到了最佳產(chǎn)酶培養(yǎng)基以及培養(yǎng)條件，并對(duì)該酶的部分性質(zhì)做了研究，為進(jìn)一步的研究工作打下了基礎(chǔ)。1材料與方法1．1菌種芽孢桿菌WXY一100，由本室保藏。1．2種子培養(yǎng)基～級(jí)種子培養(yǎng)基：NaCI109／L，Yeastextract59／L，Trypetone109／L，pH7．2，高壓滅菌后備用。接“京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會(huì)暨新思想、新觀點(diǎn)、新方法論壇，，論文集／緲?lè)N單個(gè)芽孢桿菌菌落，37℃振搖培養(yǎng)(200r／min)8
6、—12h，為一級(jí)種子。二級(jí)種子培養(yǎng)基：酵母抽提物109／L、魔芋粉7．59／L、(NH4)2SO。19／L、KH2P040．59／L、MgS04·7H200．59／L，pH7．5。按照5％的接種量接入一級(jí)種子，37。C振搖培養(yǎng)(200r／min)8—12h，為二級(jí)種子。1．3發(fā)酵培養(yǎng)基酵母抽提物209／L、魔芋粉209／L、(NH4)2S0429／L、KH2P04lg／L、MgS04·7H20lg／L，pH7．5。1．4發(fā)酵條件：250mL三角瓶裝25mL發(fā)酵培養(yǎng)基，接人6％的二級(jí)種子，40％搖床培養(yǎng)25h(200
7、r／min)。發(fā)酵液于80009／min條件下離心20min，上清即為粗酶液。1．5酶活力測(cè)定取0．5％槐豆角(Sigma產(chǎn)品，50mmol／LTris—CI，pH7．5配制)溶液0．5mL加入反應(yīng)管中，然后加入適當(dāng)稀釋的粗酶液0．1mL(6支平行管，其中2個(gè)在沸水浴之前加入酶液，作為0點(diǎn)，另外4支作為45rain的反應(yīng)，記為45點(diǎn))，40。C水浴反應(yīng)45min后，加入1．5mL的DNS反應(yīng)試劑，沸水浴5min，冷至室溫后離心，測(cè)定550nm吸光值。在由標(biāo)準(zhǔn)甘露單糖溶液制定的標(biāo)準(zhǔn)曲線上將相應(yīng)的吸光值(A45，Ao)
8、轉(zhuǎn)換成糖濃度(M45，M0)，根據(jù)每升百萬(wàn)活性單位的發(fā)酵液45min反應(yīng)后，產(chǎn)生的還原糖相當(dāng)于5．49／L的甘露單糖標(biāo)準(zhǔn)，運(yùn)用公式：酶活性=(M45一M0)÷5．4×稀釋倍數(shù)×密度×103(單位mL)，計(jì)算出粗酶液的活性大小。1．6培養(yǎng)條件的優(yōu)化1．6．1碳源對(duì)產(chǎn)酶的影響改變發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源的種類與濃度(木糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、甘油、乳糖、0．5％魔芋粉
