茶花蜂花粉中總黃酮的提取與含量測定(1)

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1、萬方數(shù)據(jù)第26卷，第2期209年3月光譜實(shí)驗(yàn)室ChineseJournalofSpectroscopyLaboratoryV01．26。No．2March，209茶花蜂花粉中總黃酮的提取與含量測定田寶娟①王孟歌康永勝(保定學(xué)院化學(xué)系河北省保定市七一東路3027號071000)摘要用超聲波輔助乙醇溶液浸提法和索氏提取法提取茶花粉中黃酮化合物。利用分光光度法．以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品．對其進(jìn)行絡(luò)合顯色，在510nm處測定提取物中總黃酮的含量。對于兩種提取方法．茶花粉中總黃酮的含量以蘆丁計(jì)算分別為11．25％和9．03％，平均加標(biāo)回收率分別分別為99．20％和98．22％。關(guān)鍵詞

2、分光光度法，茶花，蜂花粉．黃酮。中圖分類號：R15，0657．32文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B文章編號：1004—8138(2009)02—0303—031前言茶花蜂花粉是蜜蜂采自茶樹花蕊聚集而成，包含了蜜蜂的唾液和花蜜，味甘、微堿性、清涼無毒。有清頭目、除煩渴、化痰、消食、利尿、解毒之功效。國內(nèi)外文獻(xiàn)對黃酮的測定多采用HPI，C法‘h削、比色法‰婦等，高效液相色譜方法需要較多單體標(biāo)準(zhǔn)品，且受實(shí)驗(yàn)條件所限。本文分別采用超聲波輔助乙醇溶液浸提法和索氏提取法提取茶花粉中黃酮類化合物，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，利用分光光度法測定了茶花花粉中總黃酮的含量，方法簡便、快速、重現(xiàn)性好，可作為檢測茶花

3、花粉中總黃酮含量的一種手段。2實(shí)驗(yàn)部分2．1儀器與試劑UVl901紫外可見分光光度計(jì)(北京普析儀器公司)；B3200S—T超聲波清洗器[必能信超聲(上海)有限公司]；GZX一9240ME電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司)；蘆丁對照品(中國生物制品檢定所)；無水乙醇，甲醇，石油醚均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為二次去離子水。2．2對照品溶液的制備精密稱取在120C干燥至恒重的蘆丁對照品10．8mg，置50mL容量瓶中，加乙醇適量，超聲處理使溶解，放冷，加50％乙醇水溶液至刻度，搖勻，為對照品儲備液。2．3供試品溶液的制備精密稱取茶花粉細(xì)粉約10．og，置250mi。錐形瓶

4、中，加70％乙醇水溶液120ml。，密閉，超聲浸提1h，放置過夜，過濾，濾渣用少量70％乙醇水溶液洗滌2次，合并濾液，置鼓風(fēng)干燥箱中蒸干，殘?jiān)舆m量50％乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用10mI。石油醚萃取2次，棄去石油醚，轉(zhuǎn)移至250mi。量瓶中，加50％乙醇至刻度，搖勻，作為供試品儲備液，取供試品儲備液25mL，濾過，置于①聯(lián)系入·電話：(0312)5972186；E—mail,tbj2001@163．com作者簡介：田寶娟(1971一)．女·河北省保定市入·副教授·主要從事儀器分析的教學(xué)與科研工作．收稿日期z2008—05—20；接受日期：2008—09—29

5、萬方數(shù)據(jù)光譜實(shí)驗(yàn)室第26卷50mI。容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品儲備液I。男取茶花粉細(xì)粉lg，準(zhǔn)確稱定，置于索氏提取器中，加人乙醚加熱回流提取震提取液光色，棄去乙醚液，藥浚揮去乙醚，加甲醇繼續(xù)提取至無色，提取液在鼓風(fēng)于燥箱審蒸干，殘?jiān)印蓿ヒ掖妓芤喝芙?，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶審，加50％乙醇至刻度，搖勻，作為供試品儲備液。取供試品儲備液，過濾，準(zhǔn)確量取續(xù)濾液5mL，麓25mi。容量瓶巾，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品儲備液Ⅱ。3結(jié)果與討論3．1校準(zhǔn)曲線與線性范圍準(zhǔn)確量取對照品儲備潑l、2、3、4、5、6mI，，分別至25m1。容量瓶啦，各加水至6m

6、I。，加入s％亞硝酸鈉溶液lmI。，搖勻，放置6min，加lo％硝酸鏹溶液lml，，搖勻，放囂6min，加4％氫氧化鈉試液10mI。，弭加水至刻度，搖勻，放置15rain，以相應(yīng)試劑為空白，立即在510nm波長處測定吸光度，以吸光度為繳坐標(biāo)，濃度為橫黛標(biāo)，求線性方程，結(jié)聚表醒，在0。oo一5l。84Fg／mI，范圍內(nèi)呈線蛙關(guān)系良好，線性相關(guān)方程：A=0．01134C+0．00125，線性相關(guān)系數(shù)為0．9999。3．2樣品測定準(zhǔn)確量取供試晶儲備波l秘l各2mt，，分割蓮25mi。容量瓶審，照棱準(zhǔn)鼗線裁備頊下的方法，依法顯色、測定吸光度，由線性回歸方裰計(jì)算供試品溶液中

7、蘆丁的濃度，本品按干燥品計(jì)算，含總黃酮(以無水蘆丁計(jì))分別為9．03oA和11．25oA。3。3精密度實(shí)駿按提取方法不同，分別準(zhǔn)確稱取5份茶花粉樣品，按上述條件測定總黃酮含量，每個(gè)樣品平均測定5次，取其平均值，測定結(jié)果見表l。表1方滾的精密度提取方法樣品號樣紫胖均≯糶(R％SD)提取方法樣品號櫸品質(zhì)量平均測定結(jié)果Rs?tgJtg，k翔，(g)婦)(％)l0。96620．i0532。031’9．82540。88982，8921．00870．11332．152’10．03610．90350．30索氏提取30．99850．11401．97超聲浸提3’9．79520．90

8、211．9