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《山茶蜂花粉粗多糖的脫蛋白研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)3蜜蜂雜志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)NO．32009Mar．山茶蜂花粉粗多糖的脫蛋白研究付中民，劉偉，楊文超，繆曉青(福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院。福建福州350002)摘耍：對(duì)山茶蜂花粉粗多糖的脫蛋白方法進(jìn)行了初步研究?？疾炝瞬煌w積乙醇沉淀多糖試樣的效果和不同體積三氯乙酸沉淀多糖試樣中蛋白質(zhì)的效果，并經(jīng)SephadexG-75的洗脫。研究結(jié)果表明：乙醇體積為多糖液體積的3．5倍時(shí)，沉淀效果最好；多糖液中加入等倍體積的10茗三氯乙酸時(shí)，脫蛋白效果最佳；多糖經(jīng)SephadexG
2、一75的洗脫，出現(xiàn)兩個(gè)洗脫峰。關(guān)鍵詞：山茶蜂花粉；多糖；脫蛋白TheResearchontheDeprotelnizatiOnofCamelliaBeePollenCrudePOIysaccharideFUZhong—min。LIUWei，YANGWen—chao，MIAOXiao—qing(BeeSciencesCollege．FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002，China)Abstract：Westudiedthemethodso
3、fthedeDrOtelnlza—tionofCamelliabeepollencrudepolysaccharide．Theef-fectsofdeDrOtejnlzatlonondifferentvolumesethanolshowedthat。whenthevolumeratioofethanolandpolysac-charideliquidwas3．5：1。themaximump01ysaccharldewasobtained．Thestudiesoneffectsofdifferentvo
4、lumesl0篇trichloroaceticacid01qdeproteinizationshowedthat，ithadbestdeproteinizationeffectwhenthevolumeratioof10名trichloroaceticacidandpolysaccharideliquidwas1：1．TwopolysaccharidepeakswerefoundthoughSephadexG-75elution．Keywords：Camelliabeepollen；polysacch
5、aride；depro—。teinization中圖分類(lèi)號(hào)：$896．4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1003-9139(2009)03-0003-03多糖的研究已經(jīng)得到眾多藥物研究開(kāi)發(fā)者的重視，蜂花粉多糖也FI益受到火注。在研究蜂花粉多糖提取工藝的基礎(chǔ)上，選擇一種較好的方法分離純化多糖很重要。在多糖的分離純化方法的選擇上，應(yīng)根據(jù)被分離的糖類(lèi)的性質(zhì)，分析采用何種方法。往往單一的方法，不能取得滿(mǎn)意的效果。所以，為充分開(kāi)發(fā)生物活性多糖的藥用功能，提高花粉的利用率，有必要進(jìn)一步探討其分離純化條件。1材料與方法1．
6、1材料濃度為5．7m#mL的山茶蜂花粉粗多糖。1．2儀器與試劑收稿日期：2008—07—22基金項(xiàng)目：福建省“6．18”對(duì)接項(xiàng)目課題(閩發(fā)改推進(jìn)[20051958號(hào))UV9100紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)；RE一52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；BSE245S電子天平。95％乙醇、磷酸、三氯乙酸、石油醚、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、鹽酸、茚三酮、蒽酮、三氯化鐵、氫氧化鈉、碘化鉀、硫酸銅均為國(guó)產(chǎn)分析純；SephadexG一75，購(gòu)自sigma公司；考馬斯亮藍(lán)G-250，困藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；牛血清白蛋白，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司
7、。1．3方法1．3．1蛋白質(zhì)含量的測(cè)定一考馬斯亮藍(lán)法川(1)牛血清蛋白的配制。準(zhǔn)確稱(chēng)取100mg牛血清白蛋白，溶于100mL蒸餾水中，即為1000斗#mL的原液。(2)考馬斯亮藍(lán)G一250的配制。稱(chēng)取100rng考馬斯亮藍(lán)G一250，溶于50rnL95％乙醇中，加入85％(w／v)的磷酸100mL。最后用蒸餾水定容到1000mLo此溶液在常溫下可放置一個(gè)月。(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作。取10支干凈的帶塞試管，分別吸取牛血清蛋白原液0．02、0．04、0．06、0．08、0．10、0．12、0．14、0．16
8、、0．18、0．20mL，各以水補(bǔ)至1．0mL，然后分別加入5．0mL考馬斯亮藍(lán)G一250溶液，蓋塞，將各試管中溶液縱向倒轉(zhuǎn)混合。水按同樣顯色操作為空白，放置2rain后用1cm光徑的比色杯在595nm波長(zhǎng)下比色，記錄各管測(cè)定的吸光度，并做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。1．3．2山茶蜂花粉粗多糖乙醇沉淀分離實(shí)驗(yàn)取10只燒杯各吸取多糖液10mL，分別加入無(wú)水乙醇為5、10、15、20、25、30、35、40、45、50mL，充分混勻后，靜置于4。C冰箱內(nèi)過(guò)夜，離心分離沉淀。上
