蜂膠活性提取物抑菌效果的研究

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)第39卷第4期2009年8月工業(yè)微生物IndustrialMicrobiologyVd．39No．4Aug．2009doi：10．39691j．ism．1001—6678．2009．04．0010蜂膠活性提取物抑茵效果的研究周小理1，王正1”，俞苓1，張正強(qiáng)3，祝青1(1．上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院，上海200235；2．上海海洋大學(xué)，上海200090；3．上海師范大學(xué)，上海200234)摘要采用超聲波乙醇浸提法和超臨界CQ萃取法制備蜂膠活性提取物，分別以70％乙醇、丙三醇、聚乙二醇400作為溶劑將蜂膠活性提取物制成溶液。并通過(guò)超聲波和

2、加熱方式對(duì)蜂膠活性提取物溶液進(jìn)行預(yù)處理，觀察其對(duì)常見食品致病茵的抑茵和延長(zhǎng)鮮牛肉的保鮮期效果。結(jié)果表明：兩種蜂膠活性提取物溶液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球茵、枯草桿茵、蠟樣芽孢桿茵、黑曲霉、產(chǎn)黃青霉均有不同程度的抑茵效果，其中對(duì)金黃色葡萄球茵、蠟樣芽孢桿菌抑茵效果較好。同時(shí)發(fā)現(xiàn)兩者都能較好地延長(zhǎng)鮮牛肉的保鮮期。關(guān)鍵詞：蜂tt；超臨界cch萃??；超聲波；抑茵；保鮮蜂膠(Pmpolis)素有“紫色黃金”之稱[1】，是蜜蜂從膠源植物的新生芽條和愈傷組織處采集的分泌物，加入腺體如蜜蜂舌腺、蠟腺等腺體的分泌物及花粉等混合轉(zhuǎn)化而成的一種具有芳香氣味的

3、膠粘狀物質(zhì)[2】。其抗氧化、抗病毒、抗?jié)儭⒖寡?、局部麻醉、抗血壓和增?qiáng)免疫力等生物學(xué)和藥理作用越來(lái)越引起人們的重視【3]。本文對(duì)超聲波乙醇浸提法和超臨界C02萃取法提取蜂膠活性物，采用濾紙片抑菌圈法初步確認(rèn)其抑菌效果并探索其在牛肉保鮮上的應(yīng)用前景。1材料與方法1．1材料1．1．1蜂膠市售。1．1．2鮮牛肉上海清真食品有限公司提供。1．1．3供試菌種大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、蠟樣芽孢桿菌、黑曲霉、產(chǎn)黃青霉，均由本院微生物實(shí)驗(yàn)室提供。1．1．4培養(yǎng)基牛肉蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。1．2方法1．2．1蜂膠活性提取

4、物的制備超聲波乙醇浸提法提取蜂膠活性物：以1：15(v／v)的無(wú)水乙醇浸提蜂膠12h，然后采用超聲波(S00w)提取3次，每次15min。蜂膠活性提取物得率為32．63％。超臨界CQ萃取法提取蜂膠活性物：采用無(wú)水乙醇為夾帶劑，在萃取壓力為25MPa，萃取溫度50℃，萃取時(shí)間3．5h，固液比6：1的條件下萃取蜂膠活性提取物，得率為31．96％。1．2．2溶劑對(duì)蜂膠活性提取物溶液抑茵效果的影響稱取超聲波乙醇浸提法和超臨界cch萃取法提取的蜂膠活性物，分別以70％乙醇、食用級(jí)丙三醇、食用級(jí)聚乙二醇400為溶劑，將其配制成濃度為0．5％、1．

5、0％、1．5％的蜂膠溶液，待用。1．2．3蜂膠活性提取物溶液預(yù)處理方式對(duì)抑茵效果的影響通過(guò)加熱10min(40℃、60℃、80℃)、超聲波(功率600W，2min、4min、6min)等進(jìn)行預(yù)處理，觀察比較不同預(yù)處理方式對(duì)蜂膠活性提取物抑菌效果的影響。以未經(jīng)任何預(yù)處理的蜂膠活性提取物為對(duì)照組。1．2．4蜂膠海出良取物溶液的抑茵效果實(shí)驗(yàn)1．2．4．1菌種的培養(yǎng)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、蠟樣芽作者簡(jiǎn)介：周小理(1957～)，女，教授。E—mBil：zh伽xl@sit．edu．cn。·-——47·-——萬(wàn)方數(shù)據(jù)第4期工業(yè)微生物第3

6、9卷孢桿菌用牛肉蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為37℃，24h；黑曲霉、產(chǎn)黃青霉用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為28℃，48h。采用斜面接種法[4]在無(wú)菌條件下對(duì)以上菌種進(jìn)行純化培養(yǎng)。1．2．4．2抑菌效果實(shí)驗(yàn)【5】選擇吸水性強(qiáng)的濾紙，用打孔器打成若干直徑為6ml-rl的圓形濾紙片，經(jīng)干熱滅菌后，浸在兩種蜂膠活性提取物溶液后，取出瀝干，備用。無(wú)菌條件下分別挑取菌苔，用無(wú)菌生理鹽水配制成含菌數(shù)約109cfu／mL的菌懸液，備用。在供試平板上，分別加入O．2mL供試菌，涂布均勻。將制備好的濾紙片在每個(gè)平皿內(nèi)以一定間隔貼3片，并以空

7、白溶劑濾紙片作對(duì)照。在適宜的條件下培養(yǎng)(細(xì)菌在37℃下培養(yǎng)24h，霉菌、真菌在28℃下培養(yǎng)48h)后，比較其抑菌圈直徑的大小，初步確定兩種蜂膠活性提取物溶液的抑菌效果。1．2．5蜂膠活性提取物溶液延長(zhǎng)牛肉保鮮期的效果實(shí)驗(yàn)1．2．5．1肉樣的處理上海清真食品有限公司提供的新鮮牛肉，在潔凈條件下切成50g左右的小塊，隨機(jī)分成5組，每組20塊，分別在70％乙醇溶液(I)、以70％乙醇為溶劑的濃度為1．5％的超聲波提取蜂膠活性提取物溶液(Ⅱ)、聚乙二醇400溶液(IlI)、以聚乙二醇400為溶劑的濃度為1．5％的超臨界CQ萃取蜂膠活性提取物溶

8、液(Ⅳ)中浸漬30S后取出，置于潔凈的瓷盤中，瀝水5min，然后用真空包裝袋包裝，于7℃±O．5℃溫度下冷藏保存。1．2．5．2牛肉保鮮期內(nèi)細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定采用G吲T4789．2—94，食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)，菌落總數(shù)測(cè)tj