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1、河南大學碩士學位論文茯苓多糖的發(fā)酵、提取及其理化、結(jié)構(gòu)性質(zhì)鑒定的研究姓名：林標聲申請學位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學指導教師：楊生玉20080501河南大學2008屆碩士研究生學位論文中文摘要茯苓是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材，茯苓多糖是茯苓的最有效的成分之一。實驗證明茯苓多糖能提高人體免疫機能，具有防治腫瘤、促進細胞分裂、抗炎等生物學活性，逐步被應用于臨床，市場需求日益增大，具有較高的開發(fā)價值及良好的應用前景。目前，茯苓多糖的生產(chǎn)來源主要為野生或人工種植的子實體，周期長、成本高、產(chǎn)量小，限制了人們的使用；并
2、且，從茯苓子實體中提取茯苓多糖的效率較低。本論文采用液體發(fā)酵法培養(yǎng)茯苓菌絲體，從中提取茯苓多糖，具有周期短、成本低、產(chǎn)量大的優(yōu)勢，還可以獲得標準一致的多糖產(chǎn)品滿足工業(yè)化的要求。本論文以茯苓菌株HD06．10為研究材料，通過茯苓菌絲染色觀察、菌絲核相觀察、單孢菌株的配對實驗，對茯苓的基本生物學特性進行了初步研究。通過茯苓的搖瓶液體培養(yǎng)，確定茯苓液體發(fā)酵的最適發(fā)酵培養(yǎng)基和最適培養(yǎng)條件，為大規(guī)模茯苓多糖的生產(chǎn)提供了參考性的依據(jù)，即：發(fā)酵溫度26℃、搖瓶轉(zhuǎn)速150rpm、種子液接種量為6％、葡萄糖4％、蛋白
3、胨O．75％、硝酸鉀0．75％、MgS04·7H200．05％、KH2P040．1％、pH5．5、裝液量為80nlL／250rnL。比較發(fā)酵茯苓菌絲體和商品藥材茯苓的多糖提取，結(jié)果表明，雖然從發(fā)酵茯苓菌絲體提取的總多糖含量低于商品藥材茯苓提取的總多糖，但發(fā)酵菌絲體中含有更高比例的具有較強生理活性的水溶性多糖。對發(fā)酵液中提取的茯苓多糖進行羧甲基化的結(jié)構(gòu)改造，獲得了較高生物活性的羧甲基茯苓多糖(CMP)，并通過多步純化、組分分析、理化結(jié)構(gòu)性質(zhì)的鑒定，結(jié)果表明：CⅧ為多糖純品，未檢測出核酸、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，
4、僅由羧甲基葡萄糖組成，C御是伊D構(gòu)型的葡聚＼’!糖，糖環(huán)為吡喃型，糖苷鍵的連接方式為夕．<1-÷3)，分子量大約為4．2×104Da，旋光度為．3．10，特性黏數(shù)為62．55。相對于原茯苓多糖，CⅧ的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)發(fā)生了一些變化，多糖的羧甲基化改造取得了一定的效果。關(guān)鍵詞：茯苓多糖發(fā)酵提取鑒定茯苓多糖的發(fā)酵、提取及其理化、結(jié)構(gòu)性質(zhì)鑒定的研究Abstract尸卯腸∞cDsw雒avaluable仃aditionalchillesemedicine，Pachymanw嬲themostefl’ectiVeing
5、redient．SoIneexpe血entsproofedttlatpachymancanimproVehuman’simmune凡nction，p陽Vent鋤d仃10atnlecaIlcer．Pachym鋤c孤promOtecelldiVisiOn船well，suchaLs鋤ti·inflammatOry11hesebiologicalacti、ritiesaregraduallybemgcHnicallyusedandthemarketdemandisi11creaLsillg．Pachyman
6、hadhigllValueandpromisingpmspects．Atpresent，pachymallwaLSmainlyproducted行omtlle劬itbodyofartificialcultiVationorwild，whichlimitsitSuseforthelongcycIe，highcost鋤dlowyieldofproduction．Illthispaper，tlleliquidf．e肌entationcultureofPD，．砌∞c∞w舔carefIlllystudied．
7、ThepmcessOfpolysacch撕deisolatedf而mf．eHnentationbrotIlhadadVantages：shortcycle，lowcostandla唱eproduction，produciIlgpolysaccharideproductswithsanlestandardtomeett}lerequirementsofindustrialization．111isp印erstudiedonthebaSicbiologicalcharacterS0fPDv腸∞c∞byu
8、singHD06·l0aSthesubject，thmu曲t
9、lemyceliastaillingtechnique，nucleusdistributionresearchandmatingtestofsingle-spores．Fementationconditionssuch簽carbonsourceaIldni仃ogensourceforPD，．腸∞cDwereoptimized．Theoptimalfemlentationmediumcontained4％gl
