血細(xì)胞分離原理及應(yīng)用

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1、血細(xì)胞分離機(jī)原理及應(yīng)用生物診療中心王勤2012.05.15主要內(nèi)容工作原理安裝及設(shè)置重點(diǎn)及處理沉降率離心式高速旋轉(zhuǎn)血細(xì)胞離心機(jī)管路安裝及參數(shù)的設(shè)置意義機(jī)器安裝及運(yùn)轉(zhuǎn)過程中注意點(diǎn)及處理工作原理基本原理是離心技術(shù)。離心技術(shù)是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力，使置于旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮，從而使某些顆粒濃縮或與其他顆粒分離。血細(xì)胞分離機(jī)的基本工作原理是通過特制的封閉管路，使供血者的部分全血通過血細(xì)胞分離機(jī)進(jìn)行體外循環(huán)—從供血者的全血中提取相應(yīng)成份的血細(xì)胞，再將剩余血液還輸給供血者。全血離心結(jié)果經(jīng)過血細(xì)胞分離機(jī)分離后

2、的結(jié)果血漿白膜(白細(xì)胞+血小板)紅細(xì)胞血細(xì)胞分離機(jī)管路安裝采血前準(zhǔn)備1.獲得患者即時(shí)指標(biāo)：性別年齡身高體重血常規(guī)血生化凝血四項(xiàng)傳染病四項(xiàng)肝腎功能心電圖2.選擇正確程序及耗材autoMNC全自動(dòng)采集（單個(gè)核細(xì)胞）材料：P1YA血細(xì)胞分離機(jī)管路安裝3.其它用品準(zhǔn)備：生理鹽水1000mlACD-A（通常500—1000ml，具體根據(jù)程序種類及治療過程情況而定）16G－18G采血穿刺針（最好為17G）必備藥品（葡萄糖酸鈣、腎上腺素等）其它用品：血管鉗至少2支安裝步驟a.開機(jī)并選擇程序顯示當(dāng)前安裝的軟件版本,按下“繼續(xù)Contiu

3、ne繼續(xù)”鍵按“I”鍵設(shè)備開機(jī)。安裝步驟b選擇程序及耗材用“↑”和“↓”鍵選擇PLT-5d程序，按下“OK”鍵。按下“OK”鍵安裝步驟C安裝耗材出現(xiàn)“InstallsetC5L”（安裝C5L套件），提示操作者安裝分離套件安裝步驟d.安裝耗材打開泵蓋，先將泵頭轉(zhuǎn)至12點(diǎn)位置→掛上收集細(xì)胞袋，關(guān)閉細(xì)胞袋上兩個(gè)白色夾子，掛起采血回輸針頭，關(guān)閉兩個(gè)白色，一個(gè)紅色夾子→安裝泵管，使其泵管進(jìn)入泵內(nèi)→安裝大滴壺，然后順勢(shì)將滴壺上方和下方的管路裝入相應(yīng)的自動(dòng)夾中→安裝抗凝劑滴壺→安裝兩條鹽水管路（注意1.顏色匹配2.留夠長度）→擰緊兩個(gè)

4、壓力監(jiān)測(cè)頭→根據(jù)不同程序?qū)⑻囟ü苈费b入相應(yīng)控制閥與探測(cè)器→安裝分離盤安裝步驟e準(zhǔn)備預(yù)充按下“繼續(xù)Coutinue”鍵安裝步驟屏幕顯示“報(bào)警測(cè)試Alarmtest”。指示測(cè)試正在進(jìn)行。測(cè)試的開始和結(jié)束都可通過提示音得到指示。警報(bào)測(cè)試是全自動(dòng)進(jìn)行的。f開始預(yù)充安裝步驟g已經(jīng)預(yù)充按下“繼續(xù)Continue”鍵安裝步驟連接獻(xiàn)血者并收集獻(xiàn)血前樣品參數(shù)設(shè)置在該屏幕上通過↓，↑，＋和－鍵，輸入獻(xiàn)血者的數(shù)據(jù)（身高、體重等），這些數(shù)值必須輸入。輸入這些值后，按下“確認(rèn)OK”鍵。參數(shù)設(shè)置用“↑”和“↓”鍵選擇需要變化的數(shù)值用“＋”和“－”變

5、換選擇的數(shù)值參數(shù)設(shè)置在分離過程中的屏幕顯示分離過程分離程序結(jié)束時(shí)的屏幕顯示分離過程回輸沖管分離結(jié)束終止回輸沖管，屏幕顯示。拔出回輸管路穿刺針分離結(jié)束屏幕顯示，準(zhǔn)備排氣分離結(jié)束屏幕顯示檢查打印是否結(jié)束？（核對(duì)）關(guān)機(jī)血細(xì)胞分離機(jī)管路安裝治療后的處理拔針后應(yīng)伸直前臂，或前臂伸直后稍稍上抬，用另一只手的食指和中指按壓針眼處及上方10分鐘止血。針眼處要保持清潔，以免發(fā)生感染，有時(shí)在針眼周圍有些青緊現(xiàn)象，這是因?yàn)橛猩倭垦毫鞯窖芡獾木壒剩^幾天會(huì)消退，必要時(shí)可做一下熱敷。參數(shù)設(shè)置意義參數(shù)設(shè)置原則：①V(Cycle)（每循環(huán)血量）：

6、開始可用默認(rèn)值，程序運(yùn)行過程中觀察白膜情況（2mm左右且質(zhì)地適宜）。即：如果白膜太厚，應(yīng)下調(diào)該值；反之應(yīng)上調(diào)②V(Spillover)（白膜泵出量）：可用默認(rèn)值；也可將管路從細(xì)胞監(jiān)測(cè)器中取出，根據(jù)肉眼觀察情況，按“StopPhase”鍵進(jìn)行設(shè)定；采集淋巴細(xì)胞時(shí)應(yīng)設(shè)為11.5ml。參數(shù)設(shè)置意義③V(Buffycoat)（白膜收集量）：通常8ml；也可根據(jù)肉眼觀察情況，使用“StopPhase”鍵決定，（例如：如果希望減少RBC混入，應(yīng)在后面“少收”一些）④No.ofcycles（循環(huán)次數(shù)）：根據(jù)所需終產(chǎn)品量進(jìn)行設(shè)定。設(shè)好參

7、數(shù)后，按下“OK”鍵參數(shù)設(shè)置意義Bloodflow（全血流速）：根據(jù)運(yùn)行過程中血流情況進(jìn)行增減，最高不要超過70ml/min②ACD:Blood（抗凝劑比例）：當(dāng)處理全血量達(dá)到患者全身血容量后，可調(diào)低；同時(shí)也要根據(jù)患者癥狀進(jìn)行調(diào)整③RPM（離心機(jī)轉(zhuǎn)速）：一般情況下設(shè)置1500，機(jī)器默認(rèn)值設(shè)好參數(shù)后，按下“OK”鍵所有參數(shù)調(diào)節(jié)均以第三個(gè)循環(huán)開始為準(zhǔn)重點(diǎn)及處理掛針和袋時(shí)可能需要關(guān)閉管路上相應(yīng)的夾子（后分別詳述），但千萬別關(guān)藍(lán)色夾子壓力監(jiān)測(cè)頭不能先于泵管安裝壓力監(jiān)測(cè)頭要擰緊，同時(shí)不要彎折將分離盤安裝到離心腔內(nèi)時(shí)，只能“逆時(shí)針”

8、轉(zhuǎn)動(dòng)不要急于連接鹽水和抗凝劑，一定要在完全裝好耗材并按下“Continue（繼續(xù)）”鍵出現(xiàn)“PreparePrime（準(zhǔn)備預(yù)沖）”頁面之后才能接鹽水和抗凝劑重點(diǎn)及處理連接鹽水和抗凝劑時(shí)遠(yuǎn)離離心室上孔預(yù)沖前鹽水滾輪要開到最大位置預(yù)沖前要檢查采血壓力和回流壓力顯示是否都在“0”，如果不是，擰松相應(yīng)的壓力接頭使壓力回零后再