血細胞分析儀檢測原理ppt課件

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1、河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院東院檢驗科楊紅芳血細胞分析儀檢測原理庫爾特和血細胞分析儀血球之父---庫爾特一電阻抗法檢測原理（庫爾特原理）1.白細胞檢測LymphocyteMonocyteGranulocyte淋巴細胞大單個核細胞群粒細胞淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細胞二聯(lián)合檢測型原理主要體現(xiàn)在白細胞分類，實質(zhì)是選用較特異的方法將血含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細胞。共有特點是：均使用了鞘流技術(shù)。前鞘流后鞘流檢測窗1.VCS檢測技術(shù)光散射傳導(dǎo)性電阻抗每個細胞接受三維分析定義到三維散點圖的相應(yīng)位置(1).Conductivity—傳導(dǎo)性—針對細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的測量方法利用高頻電磁波對細

2、胞傳導(dǎo)性的特點，檢測:細胞核大小細胞核密度細胞核結(jié)構(gòu)核漿比—異淋和淋巴全角度：10°-70°的全角度激光散射量它是準確區(qū)分嗜酸性細胞和中性粒細胞的一個重要參數(shù)。(2)LaserScatter—激光散射—針對細胞顆粒特性的測量方法VCS白細胞分類VCS電阻抗技術(shù)細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)細胞內(nèi)的顆粒性、核分葉性和細胞表面結(jié)構(gòu)MAPSS0°：前向散射光：細胞大小、數(shù)量10°：側(cè)向散射光：細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)及核染色質(zhì)的復(fù)雜性90°：垂直角度散射光：細胞內(nèi)部顆粒及分葉狀況90°D：垂直角度去偏振散射光，鑒別E與N2.多角度偏振光散射法（MAPSS)3.光散射與細胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用（1）過氧化物酶（Per

3、oxidase,Perox)染色通道過氧化物酶活性強度：E>N>M,L和B則無。（2）嗜堿性粒細胞/分葉核（baso/lobul-arity)通道:除B外其他細胞僅剩裸核，不同細胞的裸核結(jié)構(gòu)不同，分葉越多散點越靠近橫軸右側(cè)，根據(jù)多分葉核和單個核的比例，可計算出左移指數(shù)。4.電阻抗、射頻與細胞化學(xué)聯(lián)合這類儀器是利用電阻抗、射頻這一成熟細胞計數(shù)技術(shù)結(jié)合細胞化學(xué)技術(shù)，通過4個不同的檢測系統(tǒng)對白細胞、幼稚細胞進行分類和計數(shù)。（1）嗜酸性粒細胞檢測系統(tǒng)（2）嗜堿性粒細胞檢測系統(tǒng)（3）淋巴、單核和粒細胞檢測系統(tǒng)（4）幼稚細胞檢測系統(tǒng)5.雙鞘流動力連續(xù)系統(tǒng)(DHSS)用鎢光源流式細胞光吸收

4、、化學(xué)染色和電阻抗法①WBC計數(shù)通道：電阻抗法②嗜堿性粒細胞通道：專用染液③WBC分類通道：雙鞘流系統(tǒng)中，用流式細胞光吸收、電阻抗和細胞化學(xué)染色液聯(lián)合檢測除B以外的WBC。白細胞分類散射圖聯(lián)合使用多項技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細胞化學(xué)染色)同時分析一個細胞，綜合分析實驗數(shù)據(jù)，從而得出較為準確的白細胞“五分群”結(jié)果。三血紅蛋白測定原理血紅蛋白測定采用光電比色原理血細胞懸液中加入溶血劑后，紅細胞溶解釋放血紅蛋白，后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)特定波長(530～550nm)下進行光電比色血紅蛋白血紅蛋白衍生物吸光度Hb濃度溶血劑λ＝5

5、40nm血紅蛋白測定的溶血劑溶血劑含氰化物的溶血劑不含氰化物的溶血劑