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1、血細胞分析儀 檢測原理與影響因素前言傳統(tǒng)的血常規(guī)分析法完全采用手工法。20世紀50年代，庫爾特（W.H.Coulter）先生根據(jù)電阻抗原理，又稱庫爾特原理，生產(chǎn)出第一臺血細胞計數(shù)儀，開創(chuàng)了血細胞分析儀的新紀元，使人工計數(shù)實現(xiàn)自動化。隨著科學技術的發(fā)展，血細胞分析儀也日新月異，目前己普及至縣或衛(wèi)生院。前言美國COULTER公司的STKS、MAXM系列血細胞分析儀--電阻抗、高頻電導及激光散射聯(lián)合檢測法Bayer公司的Advia120型和新近推出的Advia2120型血細胞分析儀--激光和細胞化學法日本東亞公司的NE1500、SYSMEX公司的SE9000血細胞
2、分析儀--電阻抗和射頻電導聯(lián)合檢測法ABBOTT公司的CD3000，CD3500血細胞分析儀--多角度激光偏振光散射檢測法常用的血細胞分析儀：血細胞分析儀的主要功能血細胞計數(shù)功能測量WBC、RBC、PLT、MCV、RET等白細胞分類功能測量NE%、LYM%、MO%、EO%、BA%等血紅蛋白檢測功能測量HGB血細胞計數(shù)的檢測原理電阻抗法流式細胞術與光散射法檢測原理電阻抗法檢測原理血細胞具有相對非導電的性質懸浮在電解質溶液中的血細胞顆粒通過計數(shù)小孔時可引起電阻及電壓的變化，出現(xiàn)脈沖信號脈沖的數(shù)量==細胞的數(shù)量脈沖的大小==細胞的大小該原理又稱庫爾特原理（Coul
3、terprinciple）測量RBC,WBC,PLT,MCV,MPV電阻抗法檢測原理電阻抗法影響因素白細胞:由于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增殖性疾病、轉移癌、自身免疫性疾病、感染及某些原因不明疾病血中含有冷球蛋白，或骨髓瘤、癌癥、白血病、妊娠、血栓疾病、糖尿病病人血中存在有冷纖維蛋白等，均可導致血液中某些物質凝集，致使白細胞計數(shù)增高。此時將稀釋標本放在37度水浴10min后立即計數(shù)可消除此影響.有核紅細胞出現(xiàn)使白細胞計數(shù)假性增高；低色素性貧血或紅細胞內含大量sHb或HbCO，或某些新生兒及某些肝病病人紅細胞膜脂類異常,從而產(chǎn)生抗溶血劑作用，紅細胞溶
4、解不完全；多發(fā)性骨髓瘤的M蛋白增多時，PH低的情況下，M蛋白可與溶血劑發(fā)生反應而使結果偏高；各種病理引起的血栓前狀態(tài)使血小板易于聚集，上機時影響結果電阻抗法影響因素紅細胞:血小板:紅細胞碎片和脂血中與血小板大小相似的乳糜微粒等作為血小板計數(shù)，導致血小板計數(shù)偏高。RBC:在某種病理情況下，如白血病，白細胞數(shù)明顯增加而又伴嚴重貧血時，即可使所得各項參數(shù)產(chǎn)生明顯誤差。MCH:不能探測單個紅細胞的結構（MCH=總HGB/RBC）MCV及MCHC:紅細胞通過小孔時經(jīng)受一定的形態(tài)學變化，紅細胞形態(tài)與細胞質黏度有關，細胞質黏度受細胞HGB含量影響，因此HGB濃度可影響細胞
5、形態(tài)，進而影響MCV及MCHC的準確性（MCHC=HGB/HCT)流式細胞術與光散射法檢測原理白細胞計數(shù)紅細胞和血小板計數(shù)網(wǎng)織紅細胞計數(shù)有核紅細胞計數(shù)流式細胞術與光散射法檢測原理白細胞計數(shù)利用流式細胞術,單個細胞隨著流體動力聚集的鞘流液通過激光照射的檢測區(qū)時,使光束發(fā)生折射、衍射和散射散射光由光檢測器接受后產(chǎn)生脈沖脈沖的大小與被照細胞的大小成正比脈沖的數(shù)量代表細胞的數(shù)量流式細胞術與光散射法檢測原理紅細胞和血小板計數(shù)在紅細胞/血小板通道中，RBC/PLT試劑與血液混合反應，將自然狀態(tài)下的紅細胞/血小板變成球形并經(jīng)戊二醛固定后使單個細胞逐個經(jīng)過檢測器低角度前向激
6、光（2°～3°）測量單個細胞體積與總數(shù)高角度激光（5°～15°）測量單個細胞的折射指數(shù)(RI)根據(jù)單個細胞體積和其相應細胞的折射指數(shù)，可將紅細胞和血小板區(qū)分開來，并準確得出相應的參數(shù)。細胞的折射指數(shù)(RI):反映細胞內容物的濃度。流式細胞術與光散射法檢測原理紅細胞和血小板計數(shù)紅細胞體積和血紅蛋白濃度散射圖1低角度光散射（2°-3°）2高角度光散射（5°-15°）3含有紅細胞的Mie圖4紅細胞方法中檢測的血小板流式細胞術與光散射法檢測原理網(wǎng)織紅細胞計數(shù)網(wǎng)織紅細胞分析采用某些染料（如核酸染料Oxazine750）染色的原理，并將細胞球形化，用激光二維法對網(wǎng)織紅細
7、胞進行分析測定。前向角光散射強度==細胞大小熒光強度==胞內RNA濃度根據(jù)熒光強度，可將網(wǎng)織紅細胞分成低吸收熒光強度網(wǎng)織紅細胞（LFR)、中吸收熒光強度網(wǎng)織紅細胞(MFR)和高吸收熒光強度網(wǎng)織紅細胞(HFR)三部分。幼稚網(wǎng)織紅細胞顯示最強的熒光流式細胞術與光散射法檢測原理儀器還可提供網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)（reticulocytematureindex，RMI）。RMI=網(wǎng)織紅細胞計數(shù)RMI增高與骨髓移植、慢性溶血、近期出血或療效反應有關；RMI降低通常提示骨髓衰竭或無效造血。HFR+MFRLFR流式細胞術與光散射法影響因素病人樣品中的有核紅細胞(尤其是新生兒樣
8、品)能夠使白細胞計數(shù)假性升高。樣品的冷凝集現(xiàn)象可能引
