盆底器官脫垂患者盆底肌α

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1、盆底器官脫垂患者盆底肌α【關(guān)鍵詞】內(nèi)臟下垂；肌動蛋白類；子宮脫垂；骨盆底；免疫組織化學(xué)盆底由多層肌肉、筋膜和韌帶組成,盆底肌是支撐子宮、膀胱、直腸的重要結(jié)構(gòu),對其組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的研究是目前基礎(chǔ)研究的重要內(nèi)容。盆底膨出(pelvicorganprolapse,POP)是常見的中老年女性疾病,嚴(yán)重影響女性的健康和生活質(zhì)量。>90%的POP發(fā)病是由于盆底結(jié)構(gòu)松弛所致。筆者研究盆底肌α-肌動蛋白含量變化,探討盆底肌肉損傷在POP發(fā)病中的作用?！　?對象與方法　　1.1對象　　收集南京軍區(qū)福州總醫(yī)院婦產(chǎn)科和武警福建省總隊醫(yī)院婦產(chǎn)科2004年10月－2007年1月就診的POP患者2

2、0例(POP組),年齡中位數(shù)40.5歲(51.37±3.58歲)；無壓力性尿失禁(stressurinaryincontince,SUI)和POP的直腸癌患者30例(對照組)，年齡中位數(shù)45.5(52.83±4.12歲）。POP組行陰式子宮全切術(shù)和陰道后壁修補(bǔ)術(shù);對照組行直腸癌經(jīng)腹、會陰聯(lián)合根治術(shù)。2組均于術(shù)中行盆底肌活檢?！　?.2儀器與試劑　　一抗鼠抗橫紋肌肌動蛋白單克隆抗體及生物素化兔抗大鼠IgG,ABC試劑盒，顯色劑DAB(武漢博士德生物公司)?！　?.3方法　　1.3.1電鏡制作　　在陰式手術(shù)中,經(jīng)陰道后側(cè)壁準(zhǔn)確取盆底肌標(biāo)本(0.5cm×0.5cm),制作成<

3、;1mm3標(biāo)本,參照文獻(xiàn)［1］,以3%戊二醛固定,常規(guī)制片,透射電鏡下觀察。　　1.3.2免疫組織化學(xué)染色(SP法)　　采用SP法檢測α-肌動蛋白含量,按試劑盒說明操作,DAB顯色,蘇木精對比染色,中性樹膠封固。　　1.3.3結(jié)果判斷　　α-肌動蛋白陽性染色為細(xì)胞核呈棕褐色顆粒沉著。免疫組織化學(xué)切片經(jīng)數(shù)碼顯微攝像后輸入計算機(jī),用ImageProPlus4.5軟件采取免疫組織化學(xué)染色陽性區(qū)域所占面積點數(shù)及切片組織總面積點數(shù)?！　?.4統(tǒng)計學(xué)處理　　計量資料以x±s表示。用SPSS10.0對結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,2組間比較進(jìn)行獨立樣本的t檢驗。　　2結(jié)果　　2.1盆底肌肉組織　　光

4、鏡下觀察切片中肌肉組織,POP組3例含肌肉組織(15.0%),對照組20例標(biāo)本均含豐富肌肉組織。比較統(tǒng)計結(jié)果表明比較肌肉組織豐富與否的POP患者的年齡、產(chǎn)次、絕經(jīng)年限、疾病嚴(yán)重程度、腹部測尿點壓力(LPP),差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)?！　?.3盆底肌α-肌動蛋白免疫組織化學(xué)染色情況　　切片中α-肌動蛋白免疫組織化學(xué)顯色為棕褐色(圖2)。POP組α-肌動蛋白為(0.813±0.575)，對照組為（1.339±0.141),2組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。A:對照組;B:盆底膨出組.　　3討論盆底是一個復(fù)雜而緊密聯(lián)系、多層次相互影響的系統(tǒng)整體。盆底器官

5、脫垂常發(fā)生于多個部位而呈現(xiàn)整個盆底組織薄弱。本研究通過透射電鏡對POP患者的盆底肌進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)其中平滑肌成分存在超微結(jié)構(gòu)改變:細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)不完整,線粒體腫脹甚至消失,平滑肌萎縮,肌纖維密度降低,排列紊亂,排列較為稀疏,零星呈島狀分布,被較豐富的肌纖維組織充填、取代,間質(zhì)有炎性細(xì)胞浸潤,著色不均,有較多的核中心移位,個別肌纖維有角形變和空泡變性,與國內(nèi)報道一致［2］。上述改變均為細(xì)胞不可逆損傷的表現(xiàn),表明細(xì)胞功能下降。盆底肌是盆底支持組織的主要成分之一,其損傷可直接造成盆底組織松弛、支持能力減弱,導(dǎo)致POP發(fā)生。Shafik等研究發(fā)現(xiàn)成人肛提肌盆腔部分即恥尾肌主要由平滑肌纖維

6、構(gòu)成［3］。對腹腔內(nèi)壓力和臟器重量所產(chǎn)生的適應(yīng)性表現(xiàn),通過不自主運動產(chǎn)生張力,起到支持盆底器官作用。平滑肌的肌動蛋白是細(xì)肌絲的主要結(jié)構(gòu)和功能蛋白,與肌絲滑行直接相關(guān),其分子單體呈球形,在細(xì)肌絲中聚合成雙螺旋狀,成為細(xì)肌絲的主干［4-5］。肌動蛋白是富含于真核細(xì)胞中的結(jié)構(gòu)蛋白,作為細(xì)胞骨架中一種重要的肌動蛋白,它通過與其相關(guān)蛋白包括整合素(in-tegrins)、鈣黏素(cadherin)以及細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路中的信號分子等的協(xié)同作用,在穩(wěn)定細(xì)胞黏附、調(diào)節(jié)細(xì)胞形狀及細(xì)胞運動中發(fā)揮著重要作用。本研究POP患者α-肌動蛋白含量較對照組明顯減少,筆者認(rèn)為恥尾肌α-肌動蛋白表達(dá)減少是造

7、成盆底肌肉收縮功能障礙,導(dǎo)致POP發(fā)生的重要因素之一。有報道肌動蛋白的的減少標(biāo)志著肌細(xì)胞的萎縮和退變［6］。肌動蛋白約占骨骼肌纖維蛋白的20％,占骨骼肌總蛋白含量的12％。收縮活動的強(qiáng)度和時間的改變及調(diào)節(jié)骨骼肌蛋白的表達(dá)是運動生物化學(xué)的一個基本問題。因為肌肉的力量主要決定于肌纖維蛋白的數(shù)量和體積,肌動蛋白表達(dá)增加無疑對提高盆底肌肉的力量大有裨益。α-肌動蛋白作為肌纖維的重要組成部分,其表達(dá)受多種因素的影響。近年來發(fā)現(xiàn)運動對骨骼肌α-肌動蛋白基因表達(dá)有明顯的影響［7］,女性平時應(yīng)重視盆底肌肉的營養(yǎng)及力量訓(xùn)練,避免過度