間接紅細(xì)胞凝集試

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1、間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（IHA）漢川市血吸蟲(chóng)病診療?？漆t(yī)院用途日本血吸蟲(chóng)病是由于日本血吸蟲(chóng)寄生于人和哺乳動(dòng)物體內(nèi)所引起的一種人獸共患寄生蟲(chóng)病。人體感染血吸蟲(chóng)病后，其血清中可產(chǎn)生相應(yīng)的抗血吸蟲(chóng)抗體，該抗體在患者治愈后，仍可在體內(nèi)存在較長(zhǎng)時(shí)間。本產(chǎn)品的預(yù)期用途為檢測(cè)人血清中日本血吸蟲(chóng)特異性抗體。用于血吸蟲(chóng)病流行區(qū)域人群血吸蟲(chóng)病的初篩。間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（indirecthaemagglutinationtest，IHA）：糞檢血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵陽(yáng)性者與IHA陽(yáng)性符合率為92.3%～100%，正常人假陽(yáng)性率在2％左右，與肺吸蟲(chóng)、華支睪吸蟲(chóng)

2、、旋毛蟲(chóng)感染者可出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。IHA操作簡(jiǎn)便，用血量少，判讀結(jié)果快，目前國(guó)內(nèi)已廣泛應(yīng)用。原理將日本血吸蟲(chóng)可溶性蟲(chóng)卵抗原（SEA）吸附于紅細(xì)胞載體上，使其成為致敏紅細(xì)胞。致敏紅細(xì)胞與病人血清中抗體相遇時(shí)，在適宜的條件下，紅細(xì)胞表面吸附的抗原與特異性抗體結(jié)合形成肉眼可見(jiàn)的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，即為陽(yáng)性反應(yīng)。間接凝集反應(yīng)的原理試劑組成凍干致敏紅細(xì)胞（主要組成成分為SEA，人“0”型紅細(xì)胞和蔗糖）致敏紅細(xì)胞稀釋液（主要成分為PH7.2磷酸鹽緩沖液）標(biāo)本稀釋液（生理鹽水）陰陽(yáng)性對(duì)照使用說(shuō)明書(shū)檢驗(yàn)器材加樣槍及吸頭（10-50UL1支，1

3、00-200UL1支）水浴箱PV板（96人份）震蕩器記號(hào)筆加樣槍、吸嘴水浴箱PV板、記號(hào)筆震蕩器操作方法5-1配置致敏紅細(xì)胞懸液：取凍干致敏紅細(xì)胞1支，加入致敏紅細(xì)胞稀釋液1ML，充分混勻備用。操作方法5-2用加樣槍加標(biāo)本稀釋液100UL于PV板第一排第一孔，第二三四排各加入25UL。操作方法5-3再向第1排第1孔加待測(cè)血清25UL，充分混勻后吸出25UL于第2孔，第2孔充分混勻后吸出25UL于第3孔，第3孔充分混勻后吸出25UL于第4孔，第4孔混勻后吸出25UL棄去，操作方法5-4第二至四孔血清稀釋度分別為1：10，1

4、：20，1：40。最后向第2至4孔每孔加入致敏紅細(xì)胞懸液25UL，震搖1-2分鐘后，置37度水浴箱水浴30分鐘觀察結(jié)果。操作方法5-5每次試驗(yàn)勻應(yīng)設(shè)陰性，陽(yáng)性對(duì)照。陰陽(yáng)性對(duì)照血清為凍干品，使用前每管加100UL稀釋液。充分溶液解后使用。參考值以血清稀釋度1：10出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)作為陽(yáng)性參考值，被測(cè)血清陽(yáng)性反應(yīng)稀釋度≥1：10為陽(yáng)性。結(jié)果判斷陰性反應(yīng)為紅細(xì)胞全部沉入孔底，肉眼見(jiàn)一邊緣光滑，致密的小圓點(diǎn)。結(jié)果判斷陽(yáng)性反應(yīng)＋＋＋＋紅細(xì)胞形成薄層凝集，邊緣呈現(xiàn)不規(guī)則的皺褶。＋＋＋紅細(xì)胞形成薄層凝集，充滿整個(gè)孔底。＋＋紅細(xì)胞形成薄層凝

5、集，面積較＋＋＋者小。＋紅細(xì)胞大部分沉集于孔底，形成一圓點(diǎn)，周圍有少量凝集的紅細(xì)胞，肉眼見(jiàn)周邊模糊（或中間出現(xiàn)較為明顯的空白點(diǎn)）。注意事項(xiàng)推薦使用加樣槍加樣，檢測(cè)不同標(biāo)本一定要更換吸嘴。使用定量吸管每人次一定要洗凈，避免相互污染。待檢血清或血漿不能混有紅細(xì)胞或被細(xì)菌污染。樣本若不能及時(shí)檢測(cè)可在2-8度保存2-3天，長(zhǎng)時(shí)間保存應(yīng)放零下20度冰箱凍存。結(jié)果判斷的時(shí)間與溫度有關(guān)，在20-30度條件下，建議30-60分鐘判斷結(jié)果。試劑盒每次取出后先平衡至室溫后使用。試驗(yàn)所用的一次性血凝板應(yīng)頭天用蒸餾水沖洗干凈，晾干備用。謝謝大家