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《天然腦活素促細胞增殖和抗細胞衰老作用的研究.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、天然腦活素促細胞增殖和抗細胞衰老作用的研究作者：李映紅吳正治吳偉康李明張曉麗陳茵楊敏【摘要】目的：探討天然腦活素對人胚肺二倍體成纖維細胞增殖能力和復制性衰老的影響及其機理。方法：光鏡下觀察MRC-5細胞衰老表型，常規(guī)計數細胞代齡、傳代速度，MTT法檢測細胞增殖活度，X-Gal染色法觀察細胞衰老情況，計數衰老細胞百分率。結果：天然腦活素可維持細胞的非衰老表型，增加MRC-5細胞代齡，天然腦活素孵育MRC-5細胞的細胞增殖能力較空白老齡對照組明顯升高，細胞的增殖速度顯著加快。另外，天然腦活素連續(xù)培養(yǎng)的細胞在老齡階段衰老細胞數顯著低于老齡對照細胞。結論：天然腦活素可升高MRC-5細胞增殖能
2、力，有效延緩細胞的復制性衰老?！娟P鍵詞】天然腦活素；人胚肺成纖維細胞；增殖活度；復制性衰老；延緩〔Abstract)0bjectiveToexploretheeffectsofNaturalCerebrolysinoncellproliferationactivityandreplicativesenescyoniclungdiploid5cells)anditsmenceofhumanembrfibroblasts(MRC~echanism.MethodsToobservethechangesofsenescentphenotypebylightmicroscope,countth
3、epassageagesandvelocity,detectthe)potentialofcellproliferationbyMTT.ThechangesofcellssenescenceofNaturalCerebrolysin-effectedMRC-5cellswerestudiedbyX-Galstainingmethod,andthepositivecel1ratesofsenesceneecellsweredetectedandanalyzed..ResultsNaturalCerebrolysinmaintainedunalteredcellmorphologyand
4、increasedlifespanofMRC-5byatleast18~21passages.Comparingwiththecontrolseniumcells,theproliferationpotentialofMRC-5cellsincubatedwithNaturalCerebrolysinwasincreasedobviously(P〔KeyWords)NaturalCerebrolysin；Humanembryoniclungdiploidfibroblasts；Proliferationactivity；Delay；Replicativesenescence衰老是細胞
5、的重要生命現象之一，絕大多數正常細胞被認為僅有有限的分裂能力，當其經過一定的倍增之后，將進入終末增殖狀態(tài)，稱為細胞衰老。一般來講，人類胚胎的成纖維細胞在迗到衰老時，能夠復制50代左右，由于這種衰老是由分裂傳代而達到的，故又稱之為復制性衰老［1］。探討細胞衰老的分子機理是人類認識自我研究的重要組成部分，從分子水平研究衰老過程中基因及調控變化，已成為目前衰老機理研究的主要方向，同時研究開發(fā)延緩衰老的藥物將為提高人類生存質量提供重要保證，也為衰老相關疾病的防治提供理論基礎和實驗依據。天然腦活素為結合臨床經驗和現代藥效學正交實驗優(yōu)化篩選而成，本研究在以往基礎上以人胚肺二倍體成纖維細胞為研究對
6、象，觀察了天然腦活素對MRC-5細胞表型、細胞代齡、傳代速度、細胞生長增殖能力及衰老相關指標的影響，旨在探討其延緩MRC-5細胞復制性衰老的作用及其機理。1材料與方法材料細胞株與動物MRC-5細胞是人胚肺成纖維細胞，由美國ATCC細胞庫提供，并規(guī)定28代及以下為年輕細胞，50代及以上為老年細胞，采用含10%胎牛血清的EMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)。新西蘭家兔，雄性，體重kg，購自廣東省醫(yī)學實驗動物中心，經1周的適應性飼養(yǎng)之后進行實驗。藥品及試劑研究用藥天然腦活素由深圳市中西醫(yī)結合臨床研究所進行生藥鑒定并由西安楊森制藥廠制備成臨床安全級粉劑，純度為98%。胎牛血清、EMEM培養(yǎng)基購自美國Gibco
7、公司。MTT購自Sigma公司。P-半乳糖苷酶細胞化學染色試劑盒購自美國KPL公司。其他試劑均為國產分析純級。主要儀器BI0-RAD680型酶聯免疫檢測儀，LEicaDM16000B型圖象分析系統(tǒng)，SANY0MC0-15AC型二氧化碳培養(yǎng)箱。方法實驗分組共分5組，年輕對照組；空白老齡對照組；天然腦活素低劑量組；天然腦活素中劑量組；天然腦活素高劑量組，年輕對照組和空白老齡對照組以含10%正?？瞻籽宓腅MEM培養(yǎng)，天然腦活素低、中、高劑量組分別以含％、5%、
