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《慢性乙型肝炎患者血清cccdna定量檢測臨床相關(guān)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、慢性乙型肝炎患者血清cccDNA定量檢測臨床相關(guān)【摘要】 目的探討慢性乙型肝炎（CHB）患者血清中cccDNA為肝臟損害的臨床標(biāo)志。方法隨機(jī)選取慢性乙型肝炎輕中度、慢性乙型肝炎重度及重型、乙肝病毒攜帶者各20例（所有病例HBVDNA均陽性）。使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法分別檢測入選病例血清中cccDNA值及同時(shí)定量檢測血清中HBVDNA和ALT、AST、TBIL。結(jié)果三組之間cccDNA拷貝數(shù)分布位置不相同，存在差別（P=0.000<0.01）。60例患者血清中cccDNA值和ALT秩相關(guān)（Rs=0.612，P=0.000<0.01）；cccDNA值與AST秩
2、相關(guān)（Rs=0.632，P=0.000<0.01）；cccDNA值與TBIL秩相關(guān)（Rs=0.337,P=0.008<0.01，但Rs＜0.4）。結(jié)論患者血清中cccDNA為肝臟損害的標(biāo)志，可作為判斷肝功能損害的又一臨床參數(shù)?！娟P(guān)鍵詞】慢性乙型肝炎；cccDNA；實(shí)時(shí)熒光定量PCR；肝臟損害【Abstract】ObjectiveToverifythecccDNAinchronichepatitisBpatients’seraisansignaloftheliverdamage.MthodsSelectedrandomly20slightandmildpati
3、entsefluorescentquantitativePCR,HBVDNAethod.ResultsTherecccDNAlevelofchronichepatitisBpatientsage,maybeanotherimportantclinicalparameter.【Keyage；real-timefluorescentquantitativePCR肝細(xì)胞核內(nèi)有穩(wěn)定的共價(jià)閉合環(huán)狀DNA（covalentlycircularclosedDNA,cccDNA）存在，為保持慢性感染的基礎(chǔ)。研究發(fā)現(xiàn)部分患者血清中出現(xiàn)cccDNA，可能為肝臟損害釋放至血液中［1］。筆者采
4、用實(shí)時(shí)熒光定量PCR定量檢測慢性乙肝（CHB）患者血清中cccDNA，探討患者血清中cccDNA的臨床相關(guān)意義。1對象與方法1.1研究對象隨機(jī)選取南昌市第九醫(yī)院住院和門診CHB患者或病毒攜帶者，所有入選患者血清中HBVDNA均為陽性，共計(jì)60例。CHB輕中度、CHB重度及重型、乙肝病毒攜帶者各20例。診斷符合2000年9月中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲學(xué)會(huì)、肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的病毒性肝炎防治方案，全部患者均經(jīng)血清免疫學(xué)檢查確診，無合并甲、丙、丁、戊型病毒性肝炎。同時(shí)排除了酒精性肝病、非酒精性脂肪肝和自身免疫性肝病等損害肝臟的原因。1.2標(biāo)本采集與保存患者入院次日測cccDNA
5、水平。采靜脈血5ml，檢測肝功能、乙肝病毒標(biāo)志物、HBVDNA定量等，另一份靜脈血5ml離心后儲(chǔ)藏于-70℃冰箱。1.3HBVcccDNA檢測采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）。用德國羅氏公司LightCycler定量PCR儀檢測，試劑盒購于藍(lán)星生物科技開發(fā)有限公司，檢測值用拷貝/ml。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法為一般性描述統(tǒng)計(jì)，秩和檢驗(yàn)，秩相關(guān)。2結(jié)果2．1CHB患者血清中cccDNA水平三組之間的比較CHB輕中度組在發(fā)病初均能檢測出cccDNA；CHB重度及重型組17例檢出cccDNA，且拷貝數(shù)高，3例陰性；乙肝病毒攜帶者組
6、只有1例陽性，其余均陰性。三組之間cccDNA水平分布位置不相同，差異有顯著性（P=0.000＜0.01）；CHB輕中度組與乙肝病毒攜帶者組cccDNA水平分布位置明顯不相同，差異有顯著性（P=0.000＜0.01）；CHB輕重度及重型組與乙肝病毒攜帶者組cccDNA水平分布位置明顯不相同，差異有顯著性（P=0.000＜0.01）；但CHB輕中度組與CHB重度及重型組水平分布位置差異無顯著性，雙側(cè)檢驗(yàn)P=0.330，雙側(cè)確切概率P=0.341＞0.05,故CHB輕中度組與CHB重度及重型組cccDNA水平差異無顯著性,見表1。表1三組之間cccDNA水平的比較注：1組為
7、CHB輕中度組，2組為CHB重度及重型組，3組為乙肝病毒攜帶者組(以上數(shù)值為log10對數(shù)值)2.2CHB患者血清中cccDNA水平與ALT、AST相關(guān)性分析CHB患者血清cccDNA水平與AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）的秩相關(guān)系數(shù)Rs=0.632,P=0.000＜0.01，可以認(rèn)為CHB患者血清cccDNA水平與AST存在正相關(guān)關(guān)系；CHB患者血清cccDNA水平與ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）的秩相關(guān)系數(shù)Rs=0.612,P=0.000＜0.01，可以認(rèn)為CHB患者血清cccDNA水平與ALT存在正相關(guān)關(guān)系。3討論乙肝病毒復(fù)制是一種保守的機(jī)制，在轉(zhuǎn)錄后模
