禹州漏蘆誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤u266細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究

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1、分類號(hào):R55密級(jí):?jiǎn)挝淮a:10114學(xué)號(hào):201010324禹州漏蘆誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤瘤U266細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研宄TheStudyofApoptosisandMechanismonMultipleMyelomaCellU266InducedbyRadixEchinopsis研宄生:呂紅指導(dǎo)教師:馬豐色萍申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別:醫(yī)學(xué)碩士(科學(xué)學(xué)位)稱:血液內(nèi)科向:多發(fā)性骨髓瘤基礎(chǔ)與臨床院:第二臨床醫(yī)學(xué)院屮國(guó)山西二o—三年五月四日學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學(xué)位論文系在導(dǎo)師指導(dǎo)下本人獨(dú)立完成的研究成果。文屮任何引用他人的成果,均已做出明確標(biāo)注或得到許可。論文內(nèi)容未包含法律意義上已屬于

2、他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他學(xué)位中請(qǐng)的論文或成果。與我一同工作的同志對(duì)木研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。本文如違反上述聲明,愿意承擔(dān)以卜責(zé)任和后果:1、交回學(xué)校授予的學(xué)位證書;2、學(xué)??稍谙嚓P(guān)媒體上對(duì)作者本人的行為進(jìn)行通報(bào);3、本文按照學(xué)校規(guī)定的方式,對(duì)因不當(dāng)取得學(xué)位給學(xué)校造成的名譽(yù)損害,進(jìn)行公開(kāi)道歉。4、木人負(fù)責(zé)因論文成果不實(shí)產(chǎn)生的法律糾紛。論文作者簽名:日期:¥_月_日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解山西醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)山西醫(yī)科

3、大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。木人離校后發(fā)表或使用學(xué)位論文或與該論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí),署名單位仍然為山西醫(yī)科大學(xué)。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名:日期:■年_月_日指導(dǎo)教師簽名:口期:_年_月_口(本聲明的版權(quán)歸山西醫(yī)科大學(xué)所有,未經(jīng)許可,任何單位及任何個(gè)人不得捎自使用)摘要ADQTDACT丨丨娜i司IV.3.3削胃1正文.第一章材料及方法,第二章結(jié)果8第三章討論15@i侖18參考文獻(xiàn)19綜施211?似召212.S-亞硝基化反應(yīng)的特點(diǎn)213.S-亞硝基化對(duì)凋亡的調(diào)控224.S-

4、亞硝基化修飾對(duì)蛋白質(zhì)功能的調(diào)控235.S-亞硝基化對(duì)凋亡影響的臨床怠乂24參考文獻(xiàn)26個(gè)人簡(jiǎn)介28至文i射29摘要禹州漏蘆誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究目的:研宂屮藥禹州漏蘆(RadixEchinopsis)對(duì)人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266的誘導(dǎo)凋亡作用并初步探究其誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。為多發(fā)性骨髓瘤的治療尋找一種有效低毒的中草藥抗腫瘤制劑,有助于新藥的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。方法:采用血清藥理學(xué)的方法模擬禹州漏蘆在體內(nèi)發(fā)生的藥物效應(yīng);首先將購(gòu)得的禹州漏蘆原藥材利用醇提法制備不同濃度禹州漏蘆粗提液(4g/ml,2g/ml,lg/ml),后分別灌胃大鼠,一定吋間后腹主動(dòng)脈采血,無(wú)菌分離血清,并

5、將不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用于人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞株;Hoechst33258染色后激光掃描共聚焦顯微鏡觀察不同濃度禹州漏蘆含藥血淸作用后U266細(xì)胞凋亡形態(tài);AnnexinV/PI雙染后采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后的細(xì)胞凋亡率;HDAC活性/抑制直接分析試劑盒(比色法)檢測(cè)不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后骨髓瘤細(xì)胞內(nèi)組蛋白去乙?;?histonedecetylase,HDAC)的活性及其抑制率。結(jié)果:1將不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞48h后在激光掃描共聚焦顯微鏡下可觀察到處于不同凋亡進(jìn)程中的細(xì)胞,且中濃度組和高濃度組可見(jiàn)凋亡小體。

6、2流式細(xì)胞儀檢測(cè)禹州漏蘆含藥血清誘異的細(xì)胞凋亡作用具有濃度、時(shí)間依賴性,且高濃度禹州漏蘆含藥血清可顯著誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞凋亡(P<0.001)。3HDAC活性/抑制試驗(yàn)結(jié)果顯示,不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用于人骨髓瘤U266細(xì)胞后,可檢測(cè)到HDAC活性與劑量-吋間呈負(fù)相關(guān),抑制率隨著吋間及濃度的增高而增高(P<0.05)。結(jié)論:禹州漏蘆具有抗骨髓瘤作用,禹州漏蘆含藥血淸作用人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266后可誘導(dǎo)凋亡,其誘導(dǎo)凋亡的途徑是通過(guò)降低HDAC活性。關(guān)鍵詞:多發(fā)性骨髓瘤,禹州漏蘆,含藥血清,HDAC,凋亡ABSTRACTTheStudyofApoptosisandMechanism

7、onMultipleMyelomaCellU266InducedbyRadixEchinopsisObjective:StudyontheapoptosisofhumanmultiplemyelomacellU266inducedbythetraditionalChinesemedicineRadixEchinopsisandfurthertoexploreit’smechanism.Thenlookingforaneffectiv

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