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《組蛋白去乙酰化酶抑制劑saha誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤細胞株u266細胞凋亡及其機制研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、廈門大學(xué)碩士學(xué)位論文組蛋白去乙?;敢种苿㏒AHA誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤細胞株U266細胞凋亡及其機制研究姓名:于濤申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:張鵬201206摘要目的:研究辛二酰苯胺異羥肟酸(suberoylallilidehydrox鼬icacid,SAHA)對多發(fā)性骨髓瘤細胞株U266細胞增殖和凋亡的影響,并探討其可能機制。方法:采用臺盼藍拒染法、四氮唑藍(MTT)比色法檢測SAHA對U266細胞增殖的影響;Hoechst33342染色檢測凋亡細胞的形態(tài);AmexinV和PI染色后應(yīng)用流式細胞儀檢測S-吼~作用U266細胞的凋亡率;W-eStem-b10t方法檢測組蛋白H3乙?;?/p>
2、水平、細胞周期依賴性蛋白激酶抑制劑p2l蛋白表達水平以及p38MAPK信號通路相關(guān)蛋白表達水平。結(jié)果:臺盼藍拒染法和四氮唑藍(MTT)比色法均顯示,SAHA可明顯抑制U266細胞增殖,且具有時間劑量依賴性;Hoechst33342染色在熒光顯微鏡下可見S趾iA處理組細胞胞核出現(xiàn)明顯的核固縮、核碎裂的情況,出現(xiàn)較多量的凋亡細胞;利用AnnexiIlV伊I雙標(biāo)法經(jīng)流式細胞儀檢測不同濃度的S趾認(rèn)(0.5、1、2、4umol/L)作用U266細胞凋亡率24h分別為(2.83±0.87)%、(10.00±0.87)%、(18.97±1.19)%和(31.47±1.66)%,48h分別為(10.37±O
3、.65)%、(24.33±2.11)%、(30.37±2.97)%和(57.7±2.45)%,呈時間劑量依賴性。Wrestem—blot結(jié)果顯示U266細胞經(jīng)SAHA處理后,U266細胞組蛋白H3乙?;郊皃21蛋白表達水平升高,呈現(xiàn)時間劑量依賴性。p38MAPK通路相關(guān)蛋白表達水平無明顯改變。結(jié)論:SAHA抑制多發(fā)性骨髓瘤細胞株u266細胞增殖并誘導(dǎo)凋亡,SAHA可以促進組蛋白H3乙?;缴撸⑶掖龠Mp21蛋白表達增加。SAHA對U266細胞p38MAPK信號通路不產(chǎn)生影響。關(guān)鍵詞:SAHA;U266細胞;增殖抑制;凋亡;乙?;疕3;p21;p38MAPKA夙婦cfAbstracto
4、BtⅢCTIVE:ToinVestigatethee髓ctsofsubcmylallilidehydrox鋤icacid(SAHA)onproliferationandapoptosisofmultiplemyelomaceUlineU266cellsinVitro鋤deXplorcitspossiblemechanism.METHoDS:Thecellproliferationw鶴meaSu鵬dby缸ypanblueexclusionmemodandMTTaSsay;the印optoticmoqphologi謝ch朋gew嬲observed嘶thHoechst33342staining;t
5、heAnnexinVandPImlilling、Vasusedtodetecttheapoptoticratesbynowc”ome時;theexpressionofaCe鑼l—H3aIldcyClin-dependentl【inaseinllibitorp21proteinas、vellaSthep38ML”K-aSsociatedprotein、ⅣeredetectedbyWbstem.blot柚alysis.RESULTS:呻paIlblueexclusionaSsay鋤dMTTaSsaysimul切neousindicatedmeproliferationra瞳eofU266cell
6、swasdecreaSedinSAHA-骶atedgroupinatirne-dosed印endentmanner.ObViouSkaryopyknosisandnuclear仔鵯mentaIionaswell嬲alotofapoptoticcellscouldbeseeniIlSAHA-treatedgrouptlⅡou曲fluorescencemicroscopebyHoechst33342staining.Andme舢mexinV鋤dPIstainingshowedSAHAcaIlinduceapoptosisofU266cells,仃e釉ent晰thSAHA(O.5、l、2a11d4
7、岫。忱)for24h,theapoptoticratesofU266cellswere(2.83士0.87)%、(10.OO士0.87)%、(18.97士1.19)%and(31.47士1.66)%respectiVely,臼I:a缸nentwitllSAHA(O.5、l、2a11d4啪ol/L)for48h,theapoptoticmtesofU266cells、Ⅳere(10.37士O.65)%、(24.