廣西不同產(chǎn)地與加工方法山銀花中綠原酸的含量比較

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1、廣西不同產(chǎn)地與加工方法山銀花中綠原酸的含量比較作者：王柳萍，辛寧，張守平，彭英奎，歐陽明秀【摘要】　　目的分析比較廣西不同產(chǎn)地、不同加工方法山銀花中綠原酸含量。方法采用高效液相色譜法(HPLC)進行測定。色譜柱為ODS-2HYPERSIL(250mm×4.6mm,5μｍ),流動相為乙腈-0.4%磷酸(12∶88)，檢測波長327nm。結果綠原酸在0.25～2μg范圍內線性關系良好(r=0.99990)，樣品平均回收率為100.6%，RSD=2.98%（n=6）。結論南寧九塘、羅城懷群鄉(xiāng)、羅城龍岸鄉(xiāng)、融水桿桐鄉(xiāng)的山銀花綠原酸的含量較高；以脫水加工

2、的山銀花中綠原酸含量最高，蒸干、熏硫的次之?！娟P鍵詞】山銀花綠原酸高效液相色譜　　Abstract：ObjectiveToparethechlorogenicacidcontentofFlosLoniceraeethods.MethodsExperimentsedonODS-2HYPERSILcolumn(250mm×4.6mm,5μｍ).Themobilephase.ResultsThestandardcurveofchlorogenicacidJiutang，HuaiqunofLuocheng,LonganofLuocheng,Rongsh

3、uiofLiuzhouedandtheonesmokedacranthoidesHand.-Mazz.、紅腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.或華南忍冬LoniceraconfusaDC的干燥花蕾或帶初開的花。夏初花開放前采收、干燥，在我國大部分地區(qū)均有分布。綠原酸為山銀花中的主要有效成分，它是評價山銀花質量優(yōu)劣的主要指標之一，《中國藥典》規(guī)定山銀花中綠原酸的含量不得低于1.5%［1］。山銀花為常用中藥，性味甘寒，具有清熱、解毒、涼散風熱的功效。主要用于癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱血毒痢、風熱感冒等［2］。廣西為山銀花藥材商品的主產(chǎn)區(qū)

4、之一。本文采用HPLC法對廣西不同產(chǎn)地、不同加工方法的山銀花進行含量比較,為開發(fā)廣西山銀花的生藥資源及進一步研究提供參考。　　1儀器與試劑　　美國AgilentHP1100高效液相色譜儀；梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司AE100型電子分析天平；KQ-250型超聲提取器；美國MILLIPORE公司Simplicity185超純水系統(tǒng)；甲醇、乙腈為色譜純，其余實驗試劑均為分析純，水為超純水。綠原酸對照品，購自中國藥品生物制品檢定所，供量測定用。山銀花樣品分別采集于南寧九塘、馬山縣加芳鄉(xiāng)、都安縣龍灣鄉(xiāng)、橫縣陶圩鎮(zhèn)、羅城龍岸鄉(xiāng)、羅城懷群鄉(xiāng)、融安泗頂

5、鄉(xiāng)、融水桿桐鄉(xiāng)、忻城北更鄉(xiāng)、上林縣，加工方法分別為熏硫、蒸干、陰干、脫水，山銀花藥材經(jīng)廣西中醫(yī)學院劉壽養(yǎng)副教授鑒定均為忍冬科植物紅腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.?！　?方法與結果　　2.1色譜條件色譜柱為美國ThermoODS-2HYPERSIL（4.6mm×250mm,5μm）；流動相為乙腈-0.4%磷酸(12:88)；流速：1ml/min；柱溫：30℃；檢測波長327nm；進樣量10μl；理論塔板數(shù)按綠原酸峰計算應不低于1000?！　?.2對照品溶液制備精密稱取綠原酸對照品10.0mg，置50ml棕色瓶中，用50%甲醇溶

6、液溶解并定容至刻度，搖勻，備用。　　2.3供試品溶液的制備精密稱取山銀花藥材粉末(過4號篩)0.5g，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，浸泡10min，超聲提取30min，放冷，稱重，用50%甲醇補足損失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置25ml量瓶中，50%甲醇定容，0.45μm濾膜濾過，備用?！　?.4線性關系考察以濃度0.2mg/ml的對照品溶液為原液，分別稀釋成0.025，0.05，0.10，0.15mg/ml的溶液，每個濃度進樣10μl，以峰面積（A）對濃度（C）進行線性回歸，得回歸方程為：A=19383.83C-25.

7、25，線性范圍為0.25～2.00μg，相關系數(shù)r=0.99990?！　?.5精密度實驗取對照品溶液10μl，連續(xù)進樣6次，對峰面積進行考察，峰面積的RSD為0.41%，說明精密度良好?！　?.6穩(wěn)定性實驗取同一份供試品溶液，于配制后0，2，4，6，12，24h依法測定，對峰面積進行考察，峰面積的RSD為0.48%，表明樣品在24h內穩(wěn)定?！　?.7重復性實驗取同一批樣品6份，按“2.3”項下制備供試品溶液，在上述色譜條件下分別測定峰面積，峰面積的RSD為0.22%，表明重復性良好。2.8加樣回收率實驗精密量取已知綠原酸含量的山銀花樣品提取液6

8、份，分別精密加入綠原酸標準液，各進樣10μl，測定峰面積，計算加樣回收率，結果平均回收率100.6%；RSD=2.98%，表明本方法準確度較好?！　?