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《氣相色譜法測定蛇床子提取物中蛇床子素的含量》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、氣相色譜法測定蛇床子提取物中蛇床子素的含量作者:張曉霞,周卯星,張高勇,宮竹云,聶永亮【關(guān)鍵詞】蛇床子素;,,氣相色譜法, 摘要:目的建立完善的氣相色譜測定蛇床子素含量的方法。方法首先采用柱層析的方法對樣品進行預(yù)處理,分離蛇床子提取物中的甘油三酯,并結(jié)合紅外和核磁圖譜驗證;然后采用DB5色譜柱,外標(biāo)法測定蛇床子素的含量。結(jié)果經(jīng)過預(yù)處理的樣品在該條件下測定蛇床子素,線性范圍好,r=0.9997;回收率為97.97%~102.4%;RSD為1.09%(n=5)。結(jié)論該方法簡便、準(zhǔn)確度高,重現(xiàn)性好。 關(guān)鍵詞:蛇床子素;氣相色譜法 TheDeterminationfort
2、heOstholeoftheExtractsfromFructusCnidiibytheGasChromatography Abstract:FructusidiithefruitsofCnidiumMonnieri(L.)Cusson,icalprincipleisolated,inedandquantitativelyanalysedbythecapillarygaschromatography.Themethodofcolumnchromatographyployedfortheseparationoftriglyceridefromtheextracts.Th
3、efractionconsistedofDB-5columncouldbeappliedforthedeterminationfortheosthole.Externalstandardmethodethodissimple,easyandreliable.Italsohasgoodrepeatabilityandsensibility. Keyatagraphy 蛇床子FructusCnidii,為傘形科蛇床屬植物蛇床Cnidiummonnieri(L.)Cusson的干燥成熟果實,具有散寒、祛風(fēng)、燥濕、殺蟲、止癢等功能[1]。蛇床子中的有效成分為蛇床子素,常用的
4、分析方法包括薄層掃描法[2]、高效液相色譜法[3]和氣相色譜法[4]。其中,采用氣相色譜法測定蛇床子素時,樣品均采取直接進樣的方式,然而蛇床子提取物中含有甘油三酯等油脂成分,甘油三酯分子量大,沸點高,測定中很難流出,因此,如果不在測定前去除甘油三酯,會在色譜柱中積聚甚至造成測定時鬼峰的出現(xiàn),從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文首先采用柱層析的方法對蛇床子提取物進行了預(yù)處理,分離去除了甘油三酯,然后用外標(biāo)法測定了蛇床子素的含量?,F(xiàn)將結(jié)果報道如下?! ?材料與方法 1.1儀器GC9A氣相色譜儀,帶火焰離子化檢測器(FID)及CR3A數(shù)據(jù)微處理機(日本島津公司);ESJ20型電子
5、天平(沈陽龍騰電子稱重儀器有限公司);27030型紅外光譜儀(日本日立公司);DRX300型超導(dǎo)核磁共振儀(瑞士布魯克公司);層析柱(自制Φ=15mm,h=300mm)?! ?.2藥品與試劑蛇床子素對照品(廣州合成三先生物科技有限公司)按本實驗方法測定,經(jīng)歸一化計算含量為98%;蛇床子(武漢天惠生物有限公司);硅膠(青島海洋化工廠;80~100目,使用前于120℃烘5h);石油醚(沸程30~60℃)、苯、丙酮、95%乙醇均為分析純。蛇床子提取物為超臨界CO2萃取物(自制)?! ?.3色譜條件色譜柱:DB5石英毛細管柱(30m×0.32mm);檢測器:FID;柱溫采用程序
6、升溫:初始溫度為80℃,保持2min后以5℃/min的速率升至310℃,恒溫8min;檢測室與進樣口溫度∶320℃;載氣:He;流速:30ml/min;分流比30∶1;進樣量:1μl?! ?.4方法將蛇床子提取物經(jīng)柱層析處理后,精密稱取適量于50ml容量瓶中,用丙酮溶解并稀釋至刻度,按1.3色譜條件測定蛇床子素的含量。圖1~2分別為蛇床子素標(biāo)樣及樣品的氣相色譜圖?! D1蛇床子素的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖(略) 圖2樣品的色譜圖(1∶蛇床子素)(略) 2結(jié)果 2.1樣品預(yù)處理 2.1.1柱層析分離條件的選擇硅膠是一種微酸性的吸附劑,吸附活性比氧化鋁稍低,可用于分離大多數(shù)弱極性
7、、中等極性和較強極性的化合物。本實驗中,被分離的甘油三酯極性很弱,故選用硅膠為吸附劑。展開與洗脫是色譜分離的關(guān)鍵操作。參考各種有機溶劑的溶解度參數(shù)和它們在硅膠上的吸附強度參數(shù)[5]以及柱層析分離甘油酯混合物(黎順蘭,吳伯濤.油脂及其衍生物的標(biāo)準(zhǔn)分析方法.糧食部陜西油脂科學(xué)研究所,內(nèi)部資料,1981:140.),本實驗選用石油醚、苯、95%乙醇為洗脫劑。多次實驗結(jié)果表明:分別采用石油醚、石油醚∶苯=20∶80(體積比)和95%乙醇梯度洗脫,可以將石蠟和甘油三酯從蛇床子提取物中分離(圖3為蛇床子提取物的柱層析淋洗曲線)。從圖中可以看出,經(jīng)過柱