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《早發(fā)型重度子癇前期孕婦胎盤組織中差異表達(dá)基因的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、早發(fā)型重度子癇前期孕婦胎盤組織中差異表達(dá)基因的研究廣東省清遠(yuǎn)市佛M縣人民醫(yī)院廣東佛M511600【摘要】目的：探宄早發(fā)型重度子癇前期孕婦胎盤組織中差異表達(dá)基因。方法：選取2014年1月-2014年12月期間我院接受治療的7例胎膜早破的早產(chǎn)孕婦作為對(duì)照組，選取同期7例早發(fā)型重度子癇前期孕婦作為觀察組。采用牛.物學(xué)通路分析法和基因木體（GO）功能注釋分析法對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行分析和功能注釋，并對(duì)與氧化應(yīng)激相關(guān)的基因表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：觀察組中有大量參與氧化應(yīng)激反應(yīng)的基因，括FLT1、LEP、CYP11
2、A1、SH3PXD2A、SEPP1和TFRC,與對(duì)照組比較有顯著的差異表達(dá)。其中LEP基因的表達(dá)上調(diào)與對(duì)照組比較差異表達(dá)倍數(shù)為61.5倍。結(jié)論：早發(fā)型重度子癇前期孕婦與健康孕婦相比較胎盤組織中存在差異表達(dá)基因，這些差異表達(dá)基因與早發(fā)型重度子癇前期的發(fā)生有密切的關(guān)系。【關(guān)鍵詞】早發(fā)型重度子癇前期；胎盤組織；差異表達(dá)基因胎盤組織是對(duì)子癇前期發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究的重要靶器官，對(duì)子癇前期病理過程有重要作用。臨床上常用基因芯片檢測(cè)技術(shù)對(duì)生物學(xué)通路和疾病相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè)，因而許多研宄者對(duì)子癇前期孕婦的胎盤外周血
3、基因表達(dá)譜和胎盤基因表達(dá)譜進(jìn)行基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)，但是由于妊娠周數(shù)、種族差異、操作步驟不同和基因芯片檢測(cè)平臺(tái)差異等造成諸位研究者的結(jié)論有一定差異［1］。因此木文對(duì)早發(fā)型重度子癇前期孕婦胎盤組織中差異表達(dá)基因進(jìn)行了研究?，F(xiàn)報(bào)告如下。1資料與方法1.1一般資料選取2014年1月-2014年12月期間我院接受治療的7例胎膜早破的早產(chǎn)孕婦作為對(duì)照組,選取同期7例早發(fā)型重度子癇前期孕婦作為觀察組。觀察組:男3例，女4例；年齡20?43歲，平均年齡29.4±3.5歲。對(duì)照組：男5例，女2例；年
4、齡21?44歲，平均年齡30.2±3.7歲。比較兩組性別、年齡，差異無顯著性（P〉0.05）,可比性高。1.2方法（1）采集標(biāo)本：胎盤娩出后，立即將接近臍帶附著處的胎盤中央小葉母體面的胎盤組織剪出約0.2-0.5cm3,并使用生理鹽水將殘余的血液充分洗滌,將組織保存在RNA穩(wěn)定溶液中放置-20'C的冰箱中冷藏。（2）提取、質(zhì)檢、擴(kuò)增和標(biāo)記胎盤組織總RNA：采取美國LifeTechnologies公司生產(chǎn)的TRIzol試劑將胎盤組織中的總RNA提取出來，然后使用ND-2000分光光度
5、儀對(duì)RNA進(jìn)行定量檢測(cè)，然后采用瓊脂糖甲醛變性凝膠電泳對(duì)RNA的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，并采用擴(kuò)增試劑盒將cRNA合成為模板，并以Klenow片段酶標(biāo)記DNA。（3）基因芯片的雜交、清洗和掃描：采用Agilent平臺(tái)的基因微陣列技術(shù)對(duì)基因表達(dá)譜進(jìn)行雜交、清洗和掃描，進(jìn)而得到基因芯片雜交圖。（4）數(shù)據(jù)分析：采用生物學(xué)通路富集分析法和基因本體（geneontology，GO）功能注釋分析'法對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能注釋和分析。2結(jié)果2.1參與氧化應(yīng)激的差異表達(dá)基因的GO功能注釋分析結(jié)果研究結(jié)果顯示，觀察組中有大
6、量參與氧化應(yīng)激反應(yīng)的基因，包括FLT1、LEP、CYP11A1、SH3PXD2A、SEPP1和TFRC,與對(duì)照組比較有顯著的差異表達(dá)。其中LEP基因的表達(dá)上調(diào)與對(duì)照組比較差異表達(dá)倍數(shù)為61.5倍。見表1。3討論子癇前期是常見的妊娠期并發(fā)癥，根據(jù)子癇的發(fā)病吋間將患者分為早發(fā)型子癇和晚發(fā)型子癇，孕婦孕周不超過34周為早發(fā)型子癇，孕周超過34周圍晚發(fā)型子癇［2］。根據(jù)子癇前期孕婦的臨床表現(xiàn)可以將患者分為重度子癇和輕度子癇［3】。在四種類型的子癇孕婦中早發(fā)型重度子癇前期孕婦的病情最為嚴(yán)重，孕婦和嬰兒的預(yù)
7、后情況較差，且容易發(fā)生胎盤異常。本文研究結(jié)果顯示，觀察組中有人量參與氧化應(yīng)激反應(yīng)的基因，包括FLT1、LEP、CYP11A1、SH3PXD2A、SEPP1和TFRC,與對(duì)照組比較有顯著的差異表達(dá)。其?中LEP基因的表達(dá)上調(diào)與對(duì)照組比較差異表達(dá)倍數(shù)為61.5倍。LEP主要存在于胎盤組織和脂肪中，能夠?qū)κ菟餍盘?hào)通路和滋養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行活化，進(jìn)而促進(jìn)胎盤細(xì)胞的抗凋亡和生長作用［4】。但是關(guān)于LEP基因作用的研究并沒有明確的結(jié)果，需要進(jìn)一步進(jìn)行研究。但是由于本文僅選取了孕周為30周左右的孕婦作為研究對(duì)象，因而
8、得到的基因表達(dá)譜并不能反映子癇前期發(fā)病過程中全部基因的表達(dá)狀態(tài)，不能夠以基因水平的方式將子癇前期如何發(fā)生和起始的過程表現(xiàn)出來。綜上所述，早發(fā)型重度子癇前期孕婦與健康孕婦相比較胎盤組織中存在差異表達(dá)基因，這些差異表達(dá)基因與氧化應(yīng)激反應(yīng)、免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)等病理機(jī)制有關(guān)，并與早發(fā)型重度子癇前期的發(fā)生有密切的關(guān)系。參考文獻(xiàn)：［1】顏建英，徐霞.孕婦血清游離脂肪酸水平及胎盤線粒體氧化應(yīng)激損傷程度變化與子癇前期發(fā)病的關(guān)系［」］.中華婦產(chǎn)科雜志，2012,47(6)：412-417.［2］王雪梅，甕占平，王
