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《腦通靈對大鼠腦缺血再灌注baxmrna表達變化的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、腦通靈對大鼠腦缺血再灌注BaxmRNA表達變化的影響【關(guān)鍵詞】基因;腦通靈;自由基;腦;缺血再灌注損傷;BaxmRNA;大鼠 【ABSTRACT】Objective:ToobservetheprotectiveeffectofNaotonglingonischemiareperfusioninjuryinrat.Methods:ThemodifiedBannistermethodakethemodleoffocalcerebralischemiareperfusioninjuryinratstostudytheeffectofNaotonglingon
2、BaxmRNAincerebralcortexinthemodlerats.Results:Naotonglingdecreasedaveragenumerialandincreasedaveragegrayvalue,thereageinducedbyfocalcerebralischemiareperfusion. 【KEYDA、SOD測定試劑盒由南京建成生物研究所生產(chǎn)?！ ?.2方法 1.2.1模型制備及分組 健康雄性i[2]栓線法建立腦缺血再灌注大鼠模型，大鼠麻醉后，固定大鼠于手術(shù)臺上，頸部正中切口，暴露右側(cè)頸總動脈、右側(cè)頸外動脈及其分支，
3、在近頸總動脈分叉約3mm處剪一個小口，用動脈栓線插入頸內(nèi)動脈約(18±0.5)mm，遇輕微阻力后，結(jié)扎頸內(nèi)動脈，再灌注時只需將栓線抽出。動物清醒后至少具備同側(cè)Horner征，提尾時對側(cè)前肢內(nèi)收屈曲者為造模成功。缺血90min后，拔出栓線再灌注120min。腦通靈治療組分別于梗塞前及再灌注前5min灌胃給藥2mL;模型對照組腹腔注射等量生理鹽水;正常對照組僅手術(shù)暴露血管?！ ?.2.2標本采集和處理 各組均斷頭取腦，在腦的視交叉后和下丘腦后橫斷(冠狀面)將腦分成前、中、后三部分，在前、中切面上，取1.5mm厚腦片用于光鏡切片。 1.2.3腦組織超氧化物
4、歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)測量將大鼠斷頭取腦，去離子水沖靜表面，取視交叉與腳間窩間切片約200～300mg，用SOD、MDA試劑盒和721分光光度計測定?！ ?.2.4BaxmRNA原位雜交具體操作按說明書進行?！ ?.4統(tǒng)計學(xué)分析 實驗數(shù)據(jù)用(x±s)表示,采用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。將數(shù)據(jù)輸入先進行單因素方差齊性檢驗,若方差齊(本組資料全部方差齊)。采用方差分析,組間比較采用q檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義?！ ?結(jié)果 表1腦缺血再灌注后大腦皮質(zhì)MDA、SOD表達注：與模型對照組相比*P<0.01表2腦缺血再
5、灌注損傷后大腦皮質(zhì)BaxmRNA的表達(陽性細胞密度)(×103/μm3)(x±s)注：與正常對照組相比*P<0.05;與模型對照組相比#P<0.05表3腦缺血再灌注損傷后大腦皮質(zhì)BaxmRNA的表達(平均灰度值注：與正常對照組相比*P<0.01;與模型對照組相比#P<0.05 3討論 缺血性腦血管病嚴重危害人類身體健康,其發(fā)病機理錯綜復(fù)雜,在臨床上初次卒中的病例占中、大腦中動脈阻塞很大比例。本實驗制作腦缺血再灌注動物模型,同時缺血90min后再灌注,此模型模擬的病理過程與臨床卒中很相似。Bax基因在細胞內(nèi)膜、細胞漿和細胞核
6、均有分布[3]，Bax基因在凋亡發(fā)生過程中，起重要樞紐作用[4]。一般說來,在胞質(zhì)中Bax以單體形式存在,然而在細胞發(fā)生凋亡時,與線粒體關(guān)聯(lián)的Bax既可能以無活性的單體形式存在，也可以與線粒體膜結(jié)合的大分子量的活性復(fù)合物形式存在。當Bax同源二聚體形成,便促進細胞凋亡。自由基攻擊細胞膜，改變細胞膜的通透性，打開電壓依賴性鈣通道，促使興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸和天冬氨酸的釋放，打開了受體依賴性鈣通道，使細胞外鈣離子內(nèi)流。此外，自由基引發(fā)的脂質(zhì)過氧化造成細胞成份間的義聯(lián)，使整個神經(jīng)元喪失了功能。本實驗采用原位雜交技術(shù)觀察到模型對照組BaxmRNA呈強陽性表達，較正
7、常對照組差異有顯著性意義(P<0.01)，說明Bax基因在CIR中表達增強，促進神經(jīng)細胞的凋亡。腦通靈治療組與模型對照組比較皮質(zhì)神經(jīng)元BaxmRNA表達減弱，說明腦通靈可能通過干預(yù)促調(diào)亡基因表達和清除自由基而發(fā)揮治療作用。腦通靈是在“當歸四逆湯”和“補陽還五湯”的基礎(chǔ)上加減化裁而成，全方具有益氣養(yǎng)血、活血化瘀、溫經(jīng)通脈、通脈健腦的功效，對多種心腦血管病有很好的療效?！緟⒖嘉墨I】 1MayerTE,HamannGF,BaranczykJ,etal.DynamicCTperfusionimagingofacutestroke[J].AJNR,2000
8、,21(8):14411449 2KugeY，MinematsuK，Yama
