電針治療對大鼠脊髓損傷后nogo

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1、電針治療對大鼠脊髓損傷后Nogo作者:李振鵬,孔抗美,陳育春,郭天明,陳澤鋒,劉加貝【摘要】目的:探討電針治療對大鼠脊髓損傷(SCI后Nogo_A蛋白表達的影響。方法:以96只2月齡AGINGSYSTEMS軟件進行灰度分析,以Nogo_A蛋白和內(nèi)標蛋白(actin灰度的比值作為Nogo_A蛋白的相對表達量。1.3病理標本制備術后1、7、14和28d時,隨機取大鼠每組3只,質(zhì)量濃度20g/L戊巴比妥鈉(40mg/kg腹腔注射麻醉后開胸,自左心室插管至主動脈,剪開右心耳,先灌注PBS150mL,再灌注質(zhì)量濃度40g/L多聚

2、甲醛250mL,固定。2h后取出以傷段為中心的長約20mm(T8~T10脊髓組織,放入相同固定液繼續(xù)固定,24h后常規(guī)石蠟包埋,連續(xù)切片(厚約4μm,分別進行蘇木精_伊紅及Nogo_A抗體免疫組化染色,觀察受損節(jié)段組織學改變。1.4免疫組化染色免疫組化染色采用ABC法,切片脫蠟至水,微波修復抗原,滴加封閉液,及抗Nogo_A工作液,室溫37℃1d,PBS沖洗,DAB顯色,蘇木精輕度對比染色,脫水、封固。實驗中設立嚴格的正常血清對照和陰性對照。1.5統(tǒng)計學處理結果以±s表示,分別比較A、B、C組各時間點Nogo_A表達,

3、采用t檢驗,α≤0.05,SPSS10.0統(tǒng)計軟件分析。第3期李振鵬等.電針治療對大鼠脊髓損傷后Nogo_A蛋白表達的影響2結果2.1蘇木精_伊紅染色光鏡下見B、C組脊髓組織有較多片狀出血及出血壞死后形成的囊腔,組織疏松水腫,神經(jīng)細胞變性,部分神經(jīng)纖維溶解消失,炎癥細胞浸潤明顯。D組脊髓組織點灶狀出血、壞死,范圍局限,組織輕度水腫。A組脊髓組織未見出血、壞死及組織水腫、變性等。2.2S,AINEM,etal.Intrinsicversusextrinsicfactorsindeterminingtheregenerat

4、ionofthecentralprocessesofratdorsalrootganglionneurons:theinfluenceofaperipheralnervegraft[J].JpNeurol,1996,370(1:97-104.[4]FOUADK,DIETZV,SCHE.Improvingaxonalgroentalspinalcordinjurybyneutralizingmyelinassociatedinhibitors[J].BrainResRev,2001,36(223:204-212.[5]G

5、RANDPRET,NAKAMURAF,VARTANIANT,etal.IdentificationoftheNogoinhibitorofaxonregenerationasareticulonprotEin[J].Nature,2000,403:439-444.[6]BENOS,HUBERAB,SCHE,etal.Nogo_AisamyelinyassociatedneuriteoutgroonoclonalantibodyIN_1[J].Nature,2000,403(6768:434-439.[8]李曉濱,曾園山

6、,陳玉玲.督脈電針與神經(jīng)干細胞移植聯(lián)合應用促進脊髓全橫斷大鼠受損傷的神經(jīng)元存活及其軸突再生[J].解剖學報,2006,37(1:30-35.[9]郭家松,曾園山,陳玉玲.督脈電針治療大鼠全橫斷性脊髓損傷的實驗研究[J].中國針灸,2003,23(6:351-354.[10]陳雅云,曾園山,陳玉玲.電針在脊髓損傷修復中的應用基礎研究概況[J].針刺研究,2005,3(2:120-124.

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