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1、山綠茶不同炮制品中總黃酮的含量測定【關鍵詞】山綠茶;,,總黃酮;,,蘆丁;,,紫外分光光度法,, 摘要:目的建立山綠茶不同炮制品的質量研究方法。方法以蘆丁為對照品,采用紫外分光光度法測定山綠茶不同炮制品中總黃酮的含量。結果蘆丁濃度在8.112~48.672(μg/ml)之間與吸光度值呈良好的線性關系,回歸方程為C=85.2245A+0.6427,r=0.9990。平均回收率為101.24%,RSD=2.73%。結論該測定方法靈敏,簡便,重現性好,可用于山綠茶不同炮制品的質量控制?! £P鍵詞:山綠茶;總黃酮;蘆??;紫外分光光度法 DeterminationofTotal
2、FlavonoidsinDifferentProcessedProductsofIlexhainanensisMerr Abstract:ObjectiveToestablishtheevidenceforqualityofdifferentprocessedproductsofIlexhainanensisMerr.MethodsRutinasthestandardandusingultravioletspectrophotometertodeterminethecontentoftotalflavonoidsinIlexhainanensisMerr.Results
3、ThelinearrelatEionshipofrutin8.112(μg/ml)to48.672(μg/ml),C=85.2245A+0.6427,r=0.9990.Theaveragerecoveryethodisaccurate,simpleandreproducible,andcanbeappliedtothequalitycontrolofthedifferentprocessedproductsofIlexhainanensisMerr. Keyg,置25ml量瓶中,加70%乙醇適量,置水浴上微熱使溶解,放冷,加70%乙醇至刻度,搖勻。精密量取10ml,置5
4、0ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,搖勻,即得(每毫升含無水蘆丁0.2028mg)。 2.2檢測波長的測定精密量取上述對照品溶液2ml于25ml量瓶中,加水至6ml,分別加5%亞硝酸鈉溶液1ml,搖勻,靜置6min,加10%硝酸鋁溶液1ml,搖勻,靜置6min,加氫氧化鈉試液10ml,再加水至刻度,搖勻,放置15min。以相應試劑作空白,照分光光度法[3],在400~800nm測定吸收光譜圖,其最大吸收波長為502nm[3]。光譜圖見圖1。 圖1蘆丁對照品吸收光譜圖(略) 2.3標準曲線的制備精密吸取對照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml,分別置
5、于25ml量瓶中,各加水至6ml,分別加5%亞硝酸鈉溶液1ml,搖勻,靜置6min,加10%硝酸鋁溶液1ml,搖勻,靜置6min,加氫氧化鈉試液10ml,再加水至刻度,搖勻,放置15min,照分光光度法[3],在502nm波長處測定吸收度。以濃度(C,μg/ml)為縱坐標,吸收度(A)為橫坐標繪制標準曲線,得回歸方程為C=85.2245A+0.6427,r=0.9990。結果表明蘆丁濃度8.112~48.672μg/ml之間與吸光度值呈良好的線性關系。標準曲線見圖2?! D2蘆丁對照品標準曲線(略) 2.4供試品溶液的制備取本品粗粉約0.1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,
6、精密加入70%乙醇25ml,稱定重量,超聲處理1h,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液2ml,置25ml量瓶中,照標準曲線制備項下方法,自“加水至6ml”起依法測定吸收度,用回歸方程求出供試品溶液中總黃酮的含量(mg),計算,即得?! ?.5精密度實驗取同一供試品溶液重復測定6次,平均吸收度為0.344,RSD為0.27%(n=6),表明精密度良好。 2.6穩(wěn)定性實驗對同一份供試品每間隔6min測定吸光度,在30min內平均吸收度為0.302,RSD=1.63%(n=6),說明在30min內顯色基本穩(wěn)定?! ?.7重復性實驗取同一批
7、藥材,平行測定6次,平均含量為77.35mg/g,RSD為1.87%,表明重復性良好。結果見表1?! ”?重復性實驗結果(略) 2.8加樣回收率實驗取已測知含量的樣品約0.05g,精密稱定,分別加入一定量的蘆丁對照品,照供試品溶液制備方法處理并測定含量。結果見表2?! ”?總黃酮回收率測定結果(略) 2.9樣品測定取藥材粉末0.1g,精密稱定,照供試品溶液的制備方法處理并測定。結果見表3?! ?討論 3.1在提取過程中,曾用醋酸乙酯-石油醚30~60℃(3∶1)混合溶液進行超聲脫脂處理,發(fā)現總黃酮的含量較低,可能在脫脂過