hplcelsd法測定芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量論文

《hplcelsd法測定芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、HPLCELSD法測定芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量論文【摘要】目的建立芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量測定方法，為芪紅膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究提供依據(jù)。方法采用HPLC法分離并測定了中藥芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量。色譜條件：DiamnosilC18柱(460mm×250mm,5μm)，以乙腈水(體積比35∶65)為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)。結(jié)果：此方法線性為2.53～15.18μg，平均加樣回收率為99.4%。結(jié)論本方法精密度高，分離度良好，可用于中藥芪紅膠囊中黃芪甲苷的含量測定?！娟P(guān)鍵詞】芪紅膠囊；黃芪甲苷；

2、高效液相色譜Abstract:ObjectiveTodevelopamethodfordeterminingthecontentofastragalosideIVinQihongcapsule.MethodsAstragalosideIVnosilC18column(4.6mm×250mm,5μm)usingacetonitrileobilephase.ResultsThecalibrationcurveethodisaccurate,reliableandreproducible,onsilC18(4.

3、6mm×250mm,5μm)(迪馬公司產(chǎn))為色譜柱；乙腈水(體積比35∶65)為流動相；柱溫：30℃；流速1.0mL/min；SEDEX55蒸發(fā)光散射檢測器(漂移管溫度60℃，增溢為7，氣壓2.1×105Pa)。在此色譜條件下，黃芪甲苷與樣品中其他組分分離良好，理論板數(shù)按黃芪甲苷色譜峰計大于3000。色譜圖見圖1、2。圖1黃芪甲苷對照品HPLC圖略圖2芪紅膠囊HPLC圖略2.2對照品溶液的制備精密稱取黃芪甲苷對照品12.65mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。2.3供試品溶液的制備

4、精密稱取樣品8g，加水50mL使溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取5次，每次30mL，合并正丁醇液，以氨試液洗滌5次，每次20mL，棄去氨試液，合并正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。2.4線性關(guān)系考察分別精密吸取上述對照品溶液5、10、15、20、30μL，注入液相色譜儀，照上述色譜條件測定黃芪甲苷峰面積，以對照品進樣量(m)自然對數(shù)為橫坐標(biāo)、峰面積值(A)自然對數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定結(jié)果表明

5、，黃芪甲苷對照品在進樣量2.53～15.18μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：A=1.5210m+10.6662，r=0.9997。2.5精密度試驗分別精密吸取上述對照品溶液10μL,連續(xù)進樣5次,測定黃芪甲苷峰面積值，求得黃芪甲苷峰面積值平均值為537179，RSD為1.2%，結(jié)果表明儀器精密度良好。2.6穩(wěn)定性試驗精密稱取本品，照上述方法制備供試品溶液，精密吸取15μL，在上述色譜條件下，每隔一定時間進樣,.freelg/粒，RSD為2.0%，表明本法測定的重復(fù)性良好。2.8準(zhǔn)確度試驗采用加樣回收

6、法，取已知含量樣品(黃芪甲苷含量為：0.099mg/粒)6份，精密稱取各約4g，分別精密加入黃芪甲苷對照品，照供試品溶液制備方法制備，照上述色譜條件，精密吸取供試品溶液15μL，進樣，測定，計算，求得黃芪甲苷平均回收率為99.4%，RSD為2.0%。結(jié)果說明本法準(zhǔn)確。表1回收率試驗結(jié)果略2．9陰性對照試驗取缺黃芪的各味藥材按工藝制備成陰性對照溶液，照供試品的測定項下的方法測定，結(jié)果在黃芪甲苷對照品吸收峰位置處無干擾(見圖3)。2．10樣品的測定取3批樣品，分別按“2.3”項方法制得供試品溶液，分別精密吸取對

7、照品溶液10μL和20μL，供試品溶液15μL，注入液相色譜儀，測定，計算，3批樣品黃芪甲苷含量的測定結(jié)果分別為0.099、0.136、0.114mg/粒。圖3缺黃芪陰性對照HPLC圖略3討論3.1供試品溶液的制備由于黃芪甲苷類成分在正丁醇中的溶解度比較大，因此選用正丁醇進行提取，經(jīng)回收試驗證明方法可行。作者曾試驗采用未經(jīng)氨試液處理的供試品溶液進行測定，含量大大偏低，故供試品溶液經(jīng)氨試液處理才能進行含量測定。3.2檢測器的選擇黃芪甲苷的含量測定法有薄層掃描法［1～3］，紫外檢測的HPLC法［4］及HPLC

8、ELSD法［5～6］，由于薄層掃描法對黃芪甲苷的含量測定結(jié)果誤差大，紫外檢測的HPLC法則選擇203nm的末端吸收波長來測定，其誤差也很大，故目前專家建議采用HPLCELSD法測定，此方法減少了誤差，滿足了含量測定的要求，故本文也選擇蒸發(fā)光散射檢測器。3.3流動相的選擇HPLC測定選擇了乙腈水(體積比35∶65)，乙腈水(體積比30∶70)，甲醇水(體積比35∶65)幾種流動相體系，通過比較分離情況，確定