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1、HPLC法測(cè)定黃芪中的黃芪甲苷含量摘 要：用HPLC法測(cè)定了黃芪甲苷含量.樣品從東北黃芪中提取，用色譜純甲醇溶解并稀釋，采用YWG-C18柱，流動(dòng)相為甲醇，在205nm下檢測(cè)，靈敏度為0.1AUFS,測(cè)定了黃芪甲苷的含量.平均回收率為96.1%，RSD為2.15%，結(jié)果表明，樣品濃度在0.01～0.2mg/mL之間與峰面積成良好的線性關(guān)系.High-performanceLiquidChromatographicDeterminationofAstragalosideinAstragalusmembranaceu
2、s(Fisch.)Bunge.TianFeng，DengYingjie（DepartmentofPharmacy,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110015）Abstract：Asensitivemethodwasdevelopedtodetermineastragalosidebyhigh-performanceliquidchromatographywiththeC18column.ThemobilephasewasmethanolandtheUVabsor
3、bencywasmonitoredat205nm.ThisassaydemonstratedthatastragalosidehadadequatesensitivityandselectivitytomeasuretheconcentrationsofastragalosideinAstragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.Keywords：highperformanceliquidchromatography；astragaloside;Astragalusmembranaceus
4、(Fisch.)Bunge.▲ 黃芪為常用中藥，素有“補(bǔ)藥之長(zhǎng)”之稱，具有益氣固表，利尿托毒等功效.黃芪藥用價(jià)值很高，臨床上常用來(lái)治療非特異性免疫功能低下、乙肝和心血管系統(tǒng)疾病.黃芪甲苷作為黃芪成分之一，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖1所示，它具有降壓、抗炎、穩(wěn)定紅細(xì)胞膜、提高血漿cAMP含量，促進(jìn)小鼠再生肝DNA合成和增強(qiáng)免疫功能等多種作用〔1〕.因此在研究黃芪過(guò)程中，我們對(duì)其成分黃芪甲苷進(jìn)行了含量測(cè)定方法研究.已有的測(cè)定方法多為薄層掃描法〔2〕和香草醛-硫酸比色法〔3〕，前者操作繁瑣，背景干擾多，誤差較大；后者空白吸收值高
5、，受時(shí)間因素干擾大，均難以準(zhǔn)確測(cè)定.本文試用HPLC法測(cè)定黃芪甲苷的含量.其樣品濃度的范圍在0.01～0.2mg.mL之間與峰面積呈線性，該法靈敏度高，重現(xiàn)性好，可準(zhǔn)確地測(cè)定東北黃芪甲苷的含量.Fig.1 Theformulationofastragaloside1 儀器與方法 儀器：Waters高效液相色譜儀，510型泵，490E紫外檢測(cè)儀.對(duì)照品 黃芪甲苷購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所.樣品 黃芪飲片(生品)，購(gòu)自沈陽(yáng)京盛藥店，本校許春泉教授鑒定為東北黃芪.試劑 乙腈(色譜純，天津四友生物醫(yī)學(xué)公司)、甲醇(色譜
6、純，天津四友)、正丁醇(分析純)、乙醚(分析純)、水、重蒸餾水、去離子水、中性氧化鋁(層析用)、輕質(zhì)氧化鎂(AR).2 方法與結(jié)果2.1 色譜條件色譜柱：YWG18柱2504.6mm10μL，大連依利特科學(xué)儀器有限公司；流動(dòng)相：甲醇(色譜純)；流速：0.8ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：205nm；靈敏度：0.1AUFS.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取10.03mg黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品，置于50mL容量瓶中，加入色譜純甲醇溶解并定容，分別精密吸取0.5、1.5、2.5、5、10mL用甲醇稀釋并定容于10mL容量瓶中，用0.45
7、μ微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣20μL，按上述色譜條件測(cè)定.在tR=3.375左右有唯一吸收峰，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，得一工作曲線.回歸方程為A=0.1717C+0.4657，r=0.9996，線性范圍0.01～0.2mg/mL-1，如表1所示.Tab.1 TheconcentrationandpeakareaofthestandardsampleC／(mg.mL-1)×10-1Peakarea/×1060.10.48300.30.50780.50.55211.00.63302.00.82002.3 精密度實(shí)
8、驗(yàn)精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品4.50mg，用甲醇溶解并定容于10mL容量瓶中，精密吸取20μL進(jìn)樣，連續(xù)5次，測(cè)定峰面積，其RSD為2.14%.2.4 回收率試驗(yàn)取5g已測(cè)定黃芪甲苷含量的生藥提取水煎液平均分成10份，取5份，再分別準(zhǔn)確加入1.447mg/mL的黃芪甲苷對(duì)照品溶液0.5mL，按“樣品測(cè)定”項(xiàng)下方法操作，結(jié)果見(jiàn)表2.Tab.2 Theresultsofrecov
