輪葉黨參提取物對腦血栓栓塞大鼠溶血磷脂酸和磷脂酸水平的影響

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1、輪葉黨參提取物對腦血栓栓塞大鼠溶血磷脂酸和磷脂酸水平的影響作者：呂立勛韓剛董月原海忠王成強(qiáng)【摘要】目的考察輪葉黨參乙醇提取物對腦血栓栓塞大鼠血漿溶血磷脂酸（LPA）和磷脂酸（PA）水平的影響。方法采用頸內(nèi)動脈直接插管注入凝血酶建立大鼠腦血栓栓塞模型。SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對照組、模型組、假手術(shù)組、輪葉黨參提取物低、中劑量組。除正常對照組外，其余4組大鼠建立腦血栓栓塞模型。輪葉黨參提取物組預(yù)先14d灌胃給予輪葉黨參乙醇提取物，觀察輪葉黨參乙醇提取物對大鼠腦血栓栓塞后LPA和PA水平的影響。結(jié)果與正常對照組比較，模型組大鼠血漿溶血LPA和PA水平升高

2、（P<0.05）；預(yù)防性給予輪葉黨參乙醇提取物可明顯降低血漿LPA和PA水平（P<0.05）。結(jié)論輪葉黨參乙醇提取物可降低腦血栓栓塞大鼠血漿LPA和PA水平?！娟P(guān)鍵詞】輪葉黨參；溶血磷脂酸；磷脂酸；腦血栓栓塞　輪葉黨參(Codonopsislanceolata)屬桔?？泣h參屬多年生草本植物，分布于我國東北、華南、西南等地〔1〕。輪葉黨參含多種維生素、皂苷、多糖、黃酮類化合物、齊墩果酸及揮發(fā)油，具有抑制腫瘤生長、抗疲勞、降血脂、抗氧化及清除自由基等作用〔2～4〕，對人血小板有抗凝集作用〔5〕，但其抗血栓研究鮮見報(bào)道。磷脂代謝的中間產(chǎn)物溶血磷脂

3、酸(lysophosphatidicacid，LPA)和磷脂酸(phosphatidicacid,PA),在(心)腦卒中的發(fā)生過程中可能起重要作用。血漿LPA的增高標(biāo)志著血小板活化,而PA水平的增高則反映腦缺血缺氧程度,與氧自由基的過度形成有關(guān)。當(dāng)血漿中LPA明顯增高時(shí)，凝血過程開始，預(yù)示有形成血栓的可能〔6〕。LPA一般在體內(nèi)含量較低，主要在血小板被激活時(shí)釋放，刺激血小板聚集和平滑肌收縮，促進(jìn)血管內(nèi)皮增生，在凝血和血栓形成過程中起著重要的作用〔7〕。血小板活化在腦梗死的發(fā)生發(fā)展、治療和預(yù)后中有重要意義。本文采用凝血酶凝血的方法建立大鼠腦血栓栓塞模型，

4、研究輪葉黨參乙醇提取物對腦血栓栓塞大鼠LPA和PA水平的影響?！　?材料與方法　　1.1儀器　　TU1810型紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用公司）；RE52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；KDC1042低速離心機(jī)（科大創(chuàng)新股份有限公司）；SK1型快速混勻器（江蘇醫(yī)療儀器廠）?！　?.2試劑　　凝血酶（安徽桑尼生物藥業(yè)有限公司，規(guī)格500U）；LPA測定用套裝試劑盒（北京泰福仕科技開發(fā)有限公司）；輪葉黨參（產(chǎn)于長白山）由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院提供；其余試劑均為分析純?！　?.3動物　　健康清潔級SD大鼠40只，雌雄各半，體重240～260g，購于

5、北京實(shí)驗(yàn)動物有限公司，動物許可證號：SCXK（京）20060330?！　?.4方法　　1.4.1輪葉黨參乙醇提取物的制備　　將切碎的輪葉黨參根莖浸入70%乙醇中，于70℃水浴中浸泡，并不斷攪拌4h，過濾得到上清液，將濾渣重復(fù)操作一次，合并上清液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中于70℃減壓濃縮，干燥后得到輪葉黨參乙醇提取物，備用?！　?.4.2動物分組與給藥　　40只大鼠隨機(jī)分為，正常對照組、模型組、假手術(shù)組、輪葉黨參乙醇提取物低、中劑量組，每組8只。除正常對照組外，其余4組大鼠建立腦血栓栓塞模型。正常對照組、假手術(shù)組、模型組術(shù)后4h斷頭處死取血；輪葉黨參乙醇提取物低(

6、0.5g/kg)、中(1g/kg)劑量組術(shù)前每天灌胃給予輪葉黨參乙醇提取物，連續(xù)給藥14d，其余過程同模型組。　　1.4.3大鼠腦血栓栓塞模型的建立〔8〕　　術(shù)前大鼠禁食12h，用1%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉后，仰臥位固定于手術(shù)臺上。頸正中部縱向切開皮膚，切口長約2cm，游離出右側(cè)頸總動脈，從頸總動脈分叉處向上分離頸外動脈和頸內(nèi)動脈。結(jié)扎頸外動脈，然后向顱底方向分離頸內(nèi)動脈，在顱底處分離出翼腭動脈，并結(jié)扎其根部，僅保留頸內(nèi)動脈入顱底主干；結(jié)扎頸總動脈，暫用2只微型動脈夾間隔一定距離夾閉頸內(nèi)動脈，在近心端頸總動脈處用眼科剪剪一小口，插入導(dǎo)

7、管(內(nèi)已抽好血栓誘導(dǎo)劑凝血酶10U加生理鹽水0.05ml)固定后，移去近導(dǎo)管端血管夾，少量血液流入導(dǎo)管頭端，放置約10min形成一小血栓，然后移去另一只血管夾，緩慢將此血栓和凝血酶注入頸內(nèi)動脈后，拔出導(dǎo)管,并將頸總動脈切口處結(jié)扎，縫合切口；術(shù)后單籠飼養(yǎng)。假手術(shù)組手術(shù)操作過程同上，只是不注入血栓和凝血酶，而注入等量生理鹽水?！　?.4.4血漿LPA和PA測定　　取全血約4ml，置于涂有肝素抗凝劑的離心管中。4000r/min離心10min，準(zhǔn)確吸取上清1ml，抽提磷脂成分。加入顯色劑于90℃水浴5min，取出放置35min后經(jīng)紫外分光光度計(jì)測定吸光度值，

8、計(jì)算LPA和PA的濃度。　　1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析　　計(jì)量資料均以x±s表示。采用SPSS11.5統(tǒng)