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1、二精丸提取工藝的實驗研究論文喇孝瑾，白素芬，劉倩，喇萬英【摘要】目的優(yōu)選二精丸的提取工藝。方法采用水提醇沉法，以浸膏得率和多糖含量為指標，用正交實驗法優(yōu)選工藝條件。結(jié)果最佳條件為：藥材脫脂后，加10倍量水于80℃水浴中溫浸3次，每次2h.freelin-1)20min，合并上清液。加入乙醇使含醇量為80%。結(jié)論優(yōu)選工藝穩(wěn)定，安全，簡便易行。【關(guān)鍵詞】二精丸；正交實驗；提取工藝；水提醇沉Abstract：ObjectiveToestablishtheoptimalextractiontechnologyofErjingPill.Methods
2、Orthogonaltestdesignalextractionprocessarinated0.5h,immersed3timesand2heachtimeinaltechnologyofErjingPillissimple,stableandeffective.KeybarbarumL.的干燥成熟果實，百合科植物黃精PolygomatumsibiricumRed.的干燥根莖。2方法與結(jié)果2.1水提工藝條件的優(yōu)選2.1.1正交實驗設(shè)計根據(jù)二精丸組方功效和生產(chǎn)實際要求，擬定影響浸出效果的3個主要因素A(水浸時間)，B（水浴溫度），C（提取次
3、數(shù)）為優(yōu)選因素，每個因素3個水平進行L9(34)正交實驗。正交設(shè)計見表1。以處方比例稱取烘干后粉碎的藥材20g，混勻，脫脂。室溫下加95%乙醇100ml浸泡0.5h，加熱回流1h，過濾，殘渣加100ml80%乙醇回流1h，過濾。按表1設(shè)計的工藝條件，加入10倍量水于水浴中溫浸，離心(3000r·min-1)20min，殘渣繼續(xù)加10倍量水于水浴中溫浸，離心，合并上清液。表1正交實驗因素水平（略）2.1.2浸膏得率測定精密吸取水提液10ml置于已稱重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，105℃真空干燥3h，置干燥器中，冷卻至室溫后，迅速精密稱重，計算浸膏得
4、率。結(jié)果見表2。表2二精丸多糖正交實驗結(jié)果（略）2.1.3多糖含量測定對照品溶液的配制：精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的無水葡萄糖對照品3mg，置10ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成每毫升中含無水葡萄糖0.3mg的對照品溶液。標準曲線的制備：精密量取對照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1ml，分別置10ml具塞刻度試管中，各加水至2.0ml，搖勻，在冰水浴中緩慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，搖勻，冷卻后置沸水浴中保溫10min，取出，立即置冰水浴中冷卻10min，取出，以相應(yīng)試劑為空白。照紫外-可見分光光度法，
5、在490nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，Y=3.9287X+0.0723，r=0.9991。結(jié)果表明無水葡萄糖在0.036～0.36g·L-1范圍內(nèi)，其質(zhì)量濃度與吸收度線性關(guān)系良好。供試品溶液的制備：取干燥后的二精丸多糖0.01g，加蒸餾水溶解，定容于250ml量瓶中，搖勻。即得供試品溶液。精密度實驗：精密吸取對照品溶液6份各0.2ml，分別置10ml具塞干燥試管中，照線性關(guān)系考察項下方法，自“加水至2.0ml”起依法操作，測定吸收度。結(jié)果RSD為1.08%，表明精密度良好。穩(wěn)定性實驗：精密移取樣品液0.2ml，按標準
6、曲線項下方法操作，每30min測一次吸光度,測得平均吸光度為0.168，RSD為2.59%，測定值在120min內(nèi)保持穩(wěn)定。樣品含量測定：精密量取供試液1ml,按“標準曲線”項下操作,測定吸光度值，并代入回歸方程，計算多糖含量。結(jié)果見表2。方差分析見表3～4。表3二精丸多糖浸膏得率方差分析，表4二精丸多糖含量方差分析（略）。直觀分析表明，以多糖含量為指標，理論最佳工藝為A3B1C3，極差R大小為C＞A＞B。以浸膏得率為指標，較好的方案為為A3B1C3。方差分析表明，以多糖含量及得膏率為指標，提取次數(shù)均有顯著影響。結(jié)合實際角度考慮，擬將提取工
7、藝定為：取枸杞、黃精粉末各半,混勻加5倍量95%乙醇浸泡30min，加熱回流1h,過濾，殘渣加5倍量80%乙醇回流1h,過濾，殘渣加水溫浸3次，2h/次，水浴溫度80℃，離心，合并上清液，濃縮。2.2驗證試驗稱取藥材按上述方法進行驗證試驗，結(jié)果浸膏得率為17.07%，多糖含量為36.48%。說明該工藝可行。2.3醇沉濃度的優(yōu)選將上述優(yōu)選工藝的二精丸提取物等分成3份，分別加入乙醇使含醇量分別達到60%，70%，80%，冷藏過夜,離心,上清液回收乙醇,.freell量瓶中,測定二精丸多糖的含量。測定方法及條件同上。結(jié)果表明，二精丸水提部分醇沉至
8、含醇量為80%最佳。此時浸膏得率為11.41%，多糖含量為54.56%。根據(jù)以上研究結(jié)果，最佳工藝為：取烘干后粉碎的藥材，混勻，室溫下加95%乙醇浸泡30min，加熱回流1h，過
