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1、銀翹散標準湯劑比較研究論文.freeledicalinstitutiondecoctionanddecoctionbinedarchaicoderntechnology,selectthebestmethodandprovidetheimportanttheorybasisforstandardizationofdecoctiontechnicsofdiaphoreticrecipes.MethodsThemajorcontentsoftraditionalChinesemedicineinedbyHPLCandusedastheevaluatingindicatoraseth
2、odofarchaicdecoctiongotthehighestsyntheticscores,andthevalidatingexperimentalresultethodofarchaicdecoctioncouldbeusedasthereferencestandardforpreparationtechnologyofYinqiaoPoin和6min為優(yōu),實際煎煮過程中亦發(fā)現(xiàn)銀翹散在煮沸3min后即香氣大出。因此,把沸后3min作為銀翹散古代方劑煎煮法的煎煮時限。本試驗按處方比例稱取藥材,粉碎成最粗粉,置砂鍋中,加10倍水,以大火燒開后保持沸騰3min,過濾,濾液備用
3、。2.1.2日本標準湯劑煎煮法在日本,稱取相當于日劑量中藥制劑的標準藥材,粉碎,加20倍量水,煎煮30min以上,濃縮至原體積的一半,趁熱過濾,即可制得標準煎劑3。本試驗按處方比例稱取藥材,粉碎成最粗粉,置燒杯中,加20倍量水,煎煮,保持微沸30min以上,藥液至原體積的一半,停止加熱。過濾,濾液備用。2.1.3醫(yī)療機構(gòu)煎煮法參考醫(yī)院煎藥操作規(guī)程4,按處方比例稱取藥材,置砂鍋中,浸泡30min,煎煮2次,第1次加7倍量水,煎煮,保持微沸15min,第2次加3倍量水,煎煮,保持微沸10min,過濾,合并濾液備用。2.1.4古今結(jié)合煎煮方法按處方比例稱取藥材,置砂鍋中,浸泡30mi
4、n,煎煮2次,分別加7、3倍量水,2次煎煮均保持微沸3min,過濾,合并濾液備用。2.2色譜條件2.2.1金銀花色譜柱:依利特ODS柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相:乙腈-0.4%磷酸溶液(9∶91);檢測波長:327nm;柱溫:25℃;流速:1mL/min;進樣量:對照品10μL,樣品5μL。色譜圖見圖1。注:A.對照品;B.樣品(下同)圖1綠原酸HPLC圖譜2.2.2連翹色譜柱:依利特ODS柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相:乙腈-水(18∶82);檢測波長:277nm;柱溫:25℃;流速:1mL/min;進樣量:對照品、樣品均為5μL。色譜圖見圖2。
5、圖2連翹苷HPLC圖譜2.2.3荊芥、薄荷色譜柱:依利特ODS柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相:乙腈-水(38∶62);檢測波長:256nm,柱溫:25℃;流速:0.8mL/min;進樣量:對照品5μL,樣品20μL。色譜圖見圖3。圖3胡薄荷酮HPLC圖譜2.2.4牛蒡子色譜柱:依利特ODS柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相:甲醇-水(1∶1.1);檢測波長:280nm;柱溫:30℃;流速:1mL/min;進樣量:對照品5μL,樣品10μL。色譜圖見圖4。圖4牛蒡苷HPLC圖譜2.3對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品6.78mg,加50%甲醇制成每1mL
6、含0.2712mg的溶液;精密稱取連翹苷對照品4.89mg,加甲醇制成每1mL含0.1956mg的溶液;精密稱取胡薄荷酮對照品2.53mg,加甲醇制成每1mL含0.1012mg的溶液;精密稱取牛蒡苷對照品11.95g,加甲醇制成每1mL含0.478mg的溶液。上述各溶液分別作為綠原酸、連翹苷、胡薄荷酮、牛蒡苷對照品溶液。2.4樣品溶液的制備精密吸取上述古代方劑煎煮法、日本標準湯劑煎煮法、醫(yī)療機構(gòu)煎煮法、古今結(jié)合煎煮方法的各標準湯劑煎出液10mL,置25mL容量瓶中,綠原酸待測樣品用50%甲醇定容至刻度,連翹苷、牛蒡苷、胡薄荷酮待測樣品用甲醇定容至刻度,搖勻,用0.45μm微孔濾
7、膜過濾,取續(xù)濾液即得古代方劑煎煮法、日本標準湯劑煎煮法、醫(yī)療機構(gòu)煎煮法、古今結(jié)合煎煮法樣品溶液。2.5標準曲線及線性范圍分別吸取上述4種對照品溶液,注入液相色譜儀中,按上述色譜條件測定,記錄峰面積和進樣濃度。以對照品峰面積為縱坐標、進樣量(μg)為橫坐標繪制標準曲線。綠原酸進樣量在0.2712~4.068μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為:Y=410.89X-2.84,r=0.9999;連翹苷進樣量在0.0978~2.934μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為:Y=18