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1、紫外分光光度法測定虎杖中白藜蘆醇的含量論文鄭湘娟余淑嫻徐曉芳萬南紅李玉琳張小強(qiáng)【摘要】目的建立虎杖提取物中白藜蘆醇含量的測定方法。方法采用紫外分光光度法，測定波長為305nm。結(jié)果檢測濃度在3～16μg/ml范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好(r=0.9990)。結(jié)論該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可作為提取過程中的實(shí)時(shí)監(jiān)測?！娟P(guān)鍵詞】虎杖白藜蘆醇紫外分光光度法Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminationmethodforresveratrolinextractofPolygonumcuspidatum.MethodsUVspectrophotometry
2、.ResultsThereethodissimple，rapid，accurate.Keycuspidatum；Resveratrol；UVspectrophotometry虎杖PolygonumcuspidatumSied.etZucc，又名斑根紫金龍、活血龍、陰陽蓮［1］，其根莖具有活血定痛、清熱利濕、止咳化痰作用。主要用于關(guān)節(jié)麻痹、濕熱黃疸、經(jīng)閉、咳嗽痰多、水火燙傷、跌打損傷等癥的治療［2］?，F(xiàn)代藥理研究表明其主要有效活性成分白藜蘆醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、調(diào)節(jié)脂類代謝等多種功能。目前定量檢測白藜蘆醇的方法主要有高效液相色譜法（HPLC）［3］、氣相色譜/質(zhì)譜法(G
3、C/MS)［4］以及氣相色譜法(GC)［5］等。國內(nèi)還未見有關(guān)用紫外分光光度法測定虎杖中白藜蘆醇含量的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用紫外分光光度法測定了虎杖提取液中白藜蘆醇含量?，F(xiàn)報(bào)道如下。1儀器與試藥1.1儀器GoldS54紫外可見分光光度計(jì)（上海棱光技術(shù)有限公司）；AB204-N電子天平(Mettler-Toledo設(shè)備有限公司)；FC-160型錘式粉碎機(jī)（上海中藥機(jī)械廠制造）。1.2試劑虎杖藥材購自江西省藥材公司（產(chǎn)地江西樟樹），經(jīng)江西醫(yī)學(xué)院馮江教授鑒定為正品虎杖.freelg，于50ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻，即得到0.108mg·ml-1的對照品溶液。2.2供試品溶液的
4、制備準(zhǔn)確稱量細(xì)塊狀虎杖10.0g，加10倍量的水，在沸騰狀態(tài)下提取180min，提取1次，冷卻后將提取液過濾，濾液定容至一定體積，即為供試樣品液。精密稱取一定量試液于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。2.3測定波長的選擇將白藜蘆醇對照品和供試品溶液按實(shí)驗(yàn)方法操作，在200～500nm進(jìn)行波長掃描。結(jié)果表明，對照品和供試品溶液均在305nm處有最大吸收，且兩者光譜形狀極為相似，滿足分光光度法測定的基本要求。因此，選定305nm作為測定波長。2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取“2.1”項(xiàng)下對照品溶液0，0.3，0.6，0.9，1.2，1.5ml各置于10ml容量
5、瓶中，以甲醇定容至刻度，搖勻，即得濃度分別為0，3.24，6.48，9.72，12.96，16.20μg/ml的對照品溶液。以甲醇做參比，分別測定305nm吸光度，以吸光度(A)對濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程A=0.13427C+0.04859(r=0.9990)。結(jié)果表明，白藜蘆醇檢測濃度在3～16μg/ml范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。見表1及圖1。表1白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與吸光度（略）2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批虎杖樣品，精密稱取4份，按“2.2”項(xiàng)下方法分別制備成4份供試品溶液。在305nm下分別測定其吸光度并計(jì)算白藜蘆醇的含量。結(jié)果(見表2)表明，4份提取液中白藜蘆醇的平均
6、含量為1.46％，RSD=2.41％（n=4）。表2白藜蘆醇含量測定結(jié)果（略）2.6回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法，精密吸取已知含量為3.32μg/ml虎杖提取液2ml于25ml容量瓶中，加入3.24μg/ml對照品溶液2ml，各4份，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，測定吸光度，計(jì)算回收率。結(jié)果得到平均回收率為98.8％，RSD為1.35％。3小結(jié)本實(shí)驗(yàn)建立了紫外分光光度法測定虎杖提取物中白藜蘆醇的方法。實(shí)驗(yàn)表明,本法具有操作簡單、速度快、準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)。其加樣回收率和重復(fù)性均較好，可作為一種虎杖提取液中白藜蘆醇含量測定的方法。【
