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《人參二醇組皂苷及人參皂苷rb1對(duì)體外培養(yǎng)黑色素細(xì)胞的影響論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、人參二醇組皂苷及人參皂苷Rb1對(duì)體外培養(yǎng)黑色素細(xì)胞的影響論文程基焱，鐘桂書，韓藝，余鴻【關(guān)鍵詞】人參二醇組皂苷；,,.freelechanismofPanaxadiolsaponinsandGinsenosideRb1oncultivationmelanocytesandmelaninsynthesisinvitro.Methods①Cultureandpassagethemelanocytesinvitro；interferethemelanocyteseasuretheOD；②Displaythechangeofe
2、xpressionofnitricoxidesynthaseinthemelanocytesmunohistochemistry.ResultsTheODhadnosignificantdifferencebetentgroupofPanaxadiolsaponinsorGinsenosideRb1（P0.05），theexpressionofnitricoxidesynthasehadsignificantdifferencebetentgroupofPanaxadiolsaponinsorGinsenosideRb
3、1（P0.05）.ConclusionThePanaxadiolsaponinsandGinsenosideRb1cannotaffectthegroelanocytes,butcaninhibittheexpressionofnitricoxidesynthaseinmelanocytes.Keyelanocyte）相關(guān)的黃褐斑、雀斑、黑變病、妊娠斑、白癜風(fēng)、白化病等疾病，美容學(xué)上黑色素（melanin）對(duì)皮膚的顏色的決定作用，都是目前醫(yī)學(xué)界的一個(gè)熱門話題。因此，對(duì)黑色素細(xì)胞的研究必然會(huì)對(duì)美容學(xué)和皮膚病學(xué)產(chǎn)生重要的影
4、響。信使分子一氧化氮(nitricoxide；NO)是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase；NOS)催化產(chǎn)生，文獻(xiàn)報(bào)道表明［1，2］NO供體可以促進(jìn)黑色素合成增加以及酪氨酸酶的活性增強(qiáng)，提示NO是黑色素合成的強(qiáng)效激活因子。所以NOS的表達(dá)可以反應(yīng)黑色素細(xì)胞的功能狀態(tài)。人參具有保護(hù)機(jī)體細(xì)胞和全身免受應(yīng)激的影響，降低血糖和血膽固醇，促進(jìn)新陳代謝等功能，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床的許多方面，包括在很多皮膚保健品和化妝品內(nèi)［3，4］。本研究觀察用人參的有效成分―人參二醇組皂苷(Panaxadiolsaponins
5、；PDS)、人參皂苷Rb1（GinsenosideRb1）對(duì)培養(yǎng)黑色素細(xì)胞及細(xì)胞NOS表達(dá)的影響，目的在于闡明人參對(duì)黑色素細(xì)胞及黑色素合成的調(diào)節(jié)作用及機(jī)理，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料與方法1.1材料人參二醇組皂苷和人參皂苷Rb1；黑色素細(xì)胞株；NOS免疫組化試劑盒；1640培養(yǎng)基；MTT試劑；二甲亞砜；小牛血清；CO2恒溫培養(yǎng)箱；無菌操作臺(tái)；帶數(shù)碼相機(jī)XSJD倒置相差顯微鏡；細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)孔板；平板震搖儀；等。1.2方法與結(jié)果細(xì)胞培養(yǎng)和傳代：細(xì)胞株復(fù)蘇后，加1640培養(yǎng)基稀釋至3×105/ml，轉(zhuǎn)種于培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。
6、細(xì)胞以3×105/ml常規(guī)傳代，倒置相差顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和培養(yǎng)基顏色變化及時(shí)更換培養(yǎng)基或傳代。實(shí)驗(yàn)分組與處理方法：用MTT法測(cè)定培養(yǎng)細(xì)胞的數(shù)量變化，以確定黑色素細(xì)胞的最佳生長(zhǎng)時(shí)間為72h。將細(xì)胞稀釋成3×105/ml，接種于可拆卸式96孔板，每組12孔，每孔200μl。參照文獻(xiàn)采用不同濃度人參二醇組皂苷和人參皂苷Rb1進(jìn)行干擾并分組：對(duì)照組（正常1640培養(yǎng)基，controlgroup；CG）；人參二醇組皂苷實(shí)驗(yàn)組（PDStreatmentgroup；按濃度10，20，50μg/ml分為PG1、PG2
7、、PG3）；人參皂苷Rb1實(shí)驗(yàn)組（GinsenosideRb1treatmentgroup；按濃度10，20，50μg/ml分為RG1，RG2，RG3）。培養(yǎng)72h后每孔加入MTT(5mg/ml)20μl，繼續(xù)培養(yǎng)5h后，吸棄上清液，每孔加入DMSO200μl，平板震搖儀上震搖10min，測(cè)OD值(波長(zhǎng)490nm)。免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)：參照文獻(xiàn)，用SABC法顯示各組NOS［5］。圖象分析采用盲法進(jìn)行。用IS4400圖象分析儀，在400倍下進(jìn)行圖象分析，每組隨機(jī)選取5張切片的25個(gè)視野，每個(gè)視野2個(gè)細(xì)胞，由計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)測(cè)
8、定各組黑色素細(xì)胞胞質(zhì)的光密度，結(jié)果以+s表示。1.3統(tǒng)計(jì)分析OD值及圖像分析資料進(jìn)行單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNKq法；以上統(tǒng)計(jì)學(xué)均采用SPSS10.0forpus顯微鏡400倍下觀察，黑色素細(xì)胞為球形，細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，排列緊密，細(xì)胞折光性好。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞密度、細(xì)胞形態(tài)均無顯著差異。2.2實(shí)驗(yàn)組各組黑色素細(xì)胞OD值與
