款冬花及其所含生物堿對小鼠肝臟毒性作用的研究

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1、款冬花及其所含生物堿對小鼠肝臟毒性作用的研究【摘要】  目的探討款冬花提取物、總生物堿部位、非生物堿部位和克氏千里光堿(senkirkine)對小鼠肝臟的毒性作用。方法小鼠灌胃給予款冬花水提液、醇提液、總生物堿、非生物堿、克氏千里光堿及腹腔注射克氏千里光堿,連續(xù)給藥7d后,測定體重變化、肝臟指數(shù),血清中GOT,GPT,TBIL的含量,并進行肝臟病理組織學檢查。結果總堿組、克氏千里光堿口服和腹腔注射組顯著抑制小鼠體重增加,血清生化指標顯著升高,克氏千里光堿兩組的肝臟指數(shù)明顯增加。病理切片顯示,水提組與對照組形態(tài)學無差異;總堿組形態(tài)學有所改變,肝細胞呈輕度細胞水腫,可見肝細胞點狀壞死,肝

2、小葉及匯管區(qū)未見炎細胞浸潤;克氏千里光堿兩組肝細胞均呈不同程度細胞水腫,可見肝細胞點狀和碎片狀壞死,肝小葉及匯管區(qū)可見少量炎細胞浸潤。結論在所給劑量下,水提液無肝臟毒性,用藥安全;總生物堿、克氏千里光堿有明顯的肝臟毒性。【關鍵詞】款冬花肝臟毒性小鼠血清生化指標病理組織學  Abstract:ObjectiveTostudythehepatotoxicityoftheFlosFarfaraeinmice.MethodsMiceeasuredbyexperimentaldataofbodyofmouse;histologicalexaminationofmouseliverofmice;

3、thesenkirkine-IGandIPobviouslyincreasedthecoefficientofliver.paredinationofthemouselivershoicetooktheaqueousextracticeattheexperimentaldose,butthetotalalkaloidsandsenkirkinearetoxictoliverofmice.  Keybiochemicalindicators;Histopathologicexamination  款冬花為菊科植物款冬TussilagofarfaraL.的干燥花蕾,又稱冬花,性溫、味辛,

4、具有潤肺下氣、止咳化痰之功效,臨床上主要用于新久咳嗽、喘咳痰多、勞嗽咳血等癥〔1〕,為止咳平喘方劑中的常用中藥。但是,化學成分的研究表明款冬花中含有具有肝臟毒性的吡咯里西啶生物堿(hepatotoxicpyrrolizidinealkaloids,HPAs)〔2〕。據(jù)報道,款冬花藥材中含的HPAs有senecionine和senkirkine〔3〕,所以其臨床使用的安全性引起了世界各國的重視〔4〕,部分國家明令禁止使用款冬花〔5〕??疃ǖ亩拘缘降兹绾?,是否可以在臨床上繼續(xù)使用,目前尚無實驗性文獻報道。為了探討款冬花的毒性及其大小,本研究就款冬花不同提取物(水提物,醇提物),提取部位

5、(總生物堿部位,非生物堿部位),以及HPAs單體克氏千里光堿(senkirkine)對小鼠有無肝臟毒性進行了研究?! ?材料與方法  1.1材料、藥品及儀器  款冬花,購于安徽亳州,經(jīng)中國藥科大學生藥學研究室張勉教授鑒定為款冬TussilagofarfaraL.的干燥花蕾。水提組:款冬花藥材加10倍量水熱回流提取3次,合并提取液,濃縮至0.5g/ml;醇提組:款冬花藥材加10倍量90%乙醇熱回流提取3次,合并提取液,回收乙醇,濃縮至0.5g/ml;總堿組(總生物堿部位):醇提液回收至無醇味,用2.5%稀鹽酸調(diào)pH至2~3,酸水用氯仿萃?。ɑ厥章确碌脷堅麵,待用)后,酸水層用5%稀Na

6、OH調(diào)pH至10~11,堿水用氯仿萃取,回收氯仿即得;非堿組(非生物堿部位):上述氯仿萃取后的堿水用稀鹽酸調(diào)至中性,與殘渣I合并,濃縮至折合生藥量為0.5g/ml,即得;克氏千里光堿由本研究室從款冬花中分離得到??倝A和克氏千里光堿以0.5%CMC-Na混懸,供小鼠灌胃用?! 」缺D氨酶測定試劑盒(GPT),批號20070423;谷草轉氨酶測定試劑盒(GOT),批號20070423;血清總膽紅素測定試劑盒(TBIL),批號20070423;均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。離心機,常州國華電器有限公司。1500酶標儀,ThermoElectrom公司?! ?.2動物  ICR小鼠,雄性,

7、體重(20±2)g,江蘇南京青龍山動物繁殖場提供?! ?.3方法  取健康小鼠70只,隨機分成7組,每組10只,分別為空白對照組、水提組、醇提組、總堿組、非堿組、克氏千里光堿口服(senkirkine-IG)組和腹腔注射(senkirkine-IP)組。其中水提組、醇提組、總堿組、非堿組和senkirkine-IG組以0.2ml/10g灌胃,1次/d;senkirkine-IP組以0.2ml/10g腹腔注射;對照組灌胃等量CMC-Na溶液。連續(xù)給藥7d,正

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