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1、生地黃多糖的微波提取及含量測定【摘要】目的從生地黃中提取多糖,并測定其含量。方法運用微波技術用水提醇沉法提取生地黃多糖,用酚-硫酸比色法測定多糖含量。結果測得生地黃多糖含量13.4186%,平均回收率為98.94%,RSD=1.34%(n=5)。結論運用微波技術從生地黃中提取出多糖,反應速度加快,實驗結果令人滿意?!娟P鍵詞】微波技術;生地黃;多糖;提取;含量測定Microinationofpolysaccharideofrehmanniaglutinosaliboschroot【Abstract】Ob
2、jectiveTheextractionandcontentdeterminationspolysaccharidesofRehmanniaglutinosaLiboschroot.MethodsMicroanniaglutinosaLiboschrootinationetry.ResultsThepolysaccharidescontentofRehmanniaglutinosaLiboschrootis13.418%,recoveryrateis98.94%.ConclusionMicroanni
3、aglutinosaLiboschroothasbeenobtainedforthefirsttime.【Keyicroanniaglutinosaliboschroot;polysaccharide;extraction;contentdetermination生地黃為玄參科植物地黃RehmanniaglutinosaLibosch.的干燥塊根,別名地髓、生地、干地黃等,地黃根莖主要含梓醇、地黃素、糖類、氨基酸、維生素A等成分。生地黃有敗毒抗癌、清熱涼血、養(yǎng)陰生津、醫(yī)瘡消腫、促進免疫、降壓、抑制皮膚
4、癬菌等作用,可用于治療傳染性肝炎、功能性子宮出血等。微波技術的應用,近年來得到很大發(fā)展。微波具有穿透力強、選擇性高、加熱效率高等特點。微波輻射(MCL-3型連續(xù)微波反應器(四川大學無線電系)。葡萄糖(AR)105℃干燥恒重,苯酚(AR),硫酸(AR)。生地黃:購買于石河子市藥店,干燥品,粉碎待用?! ?標準曲線的繪制2.1標準葡萄糖溶液的配制精確稱取干燥恒重的葡萄糖25.2mg,加適量水溶解,轉移至250ml容量瓶中,加水至刻度,搖勻,配成濃度為100.8μg/ml標準葡萄糖溶液備用。2.25%苯酚試
5、劑的配制取苯酚100g,加鋁片0.1g和NaHCO30.05g,蒸餾,收集182℃餾份,稱取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶內放冰箱備用。2.3標準曲線繪制精確量取葡萄糖標準溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置干燥試管中,分別加水使成1.0ml,再分別加入5%苯酚溶液1.6ml,搖勻,然后加濃H2SO47.0ml,充分搖勻,室溫放置25min,在400~600nm處測定其最大吸光度,同時做一空白。將上述實驗數(shù)據(jù)做回歸處理得回歸方程:A=0.0691C+3×10-3R2
6、=0.9981r=0.99905。3生地黃多糖的提取及精制生地黃破碎后,稱取30g,置500ml燒瓶中,將此燒瓶放入MCL-3型連續(xù)微波反應器中,依次用300ml石油醚(60~90℃)、乙醚和80%乙醇回流提取,調整功率560CL-3型連續(xù)微波反應器中,繼續(xù)以水回流提取20min,調整功率630g,水溶解后定容到100ml容量瓶中,搖勻,作為多糖儲備液。精確量取多糖儲備液0.20ml,加水至1.0ml,按測定標準曲線同樣的方法測其吸光度值。按下式計算換算因素:f=W/CD式中:W為多糖重量(μg),C
7、為多糖液中葡萄糖的重量(μg),D為多糖的稀釋倍數(shù)。測得f=2.9115。5樣品測定分別精確稱取生地黃粉末0.200g、0.250g、0.203g,用80%乙醇浸泡過夜,再于MCL-3型連續(xù)微波反應器中用80%乙醇回流20min,調整功率560CL-3型連續(xù)微波反應器中,繼續(xù)以水回流提取20min,調整功率630CL-3型連續(xù)微波反應器中用80%乙醇回流20min,調整功率560CL-3型連續(xù)微波反應器中,繼續(xù)以水回流提取20min,調整功率630Φ細胞等免疫細胞的功能,還能促進白介素、干擾素、腫瘤壞
8、死因子等細胞因子的產(chǎn)生。目前對多糖的研究方興未艾,多糖的作用機制以及生物功能與結構的關系的研究不斷深入,而且不斷有新的多糖物質被發(fā)現(xiàn)。微波技術應用于植物細胞破壁,大大地加快了反應速度,有效地提高了收率。本實驗從生地黃中提取多糖,并對其含量進行測定,反應時間縮短了12倍,多糖含量為13.4186%。生地黃多糖的提取方法、結構組成、藥理作用及生物學功能有待進一步研究。【參考