資源描述：
《生物毒素膠體金免疫層析檢測試紙的研制》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文生物毒素膠體金免疫檢測試紙的研制摘要蓖麻毒素是一種植物蛋白，具有極強(qiáng)的細(xì)胞毒性，是一種對公共安全存在潛在威脅的生物恐怖毒劑，因此，發(fā)展和建立其特異、靈敏的檢測方法十分重要。膠體金免疫層析檢測法作為一種蓖麻毒素檢測方法，其檢測特異性強(qiáng)、高效、靈敏，結(jié)果的判定只需肉眼或簡單的光學(xué)儀器。本文研究并優(yōu)化了免疫層析檢測用膠體金的制備方法，建立了特異性強(qiáng)、靈敏度高的定性檢測蓖麻毒素的膠體金免疫層析方法。免疫層析檢測用膠體金要求粒徑在20~40nm左右、粒徑分布窄，因此對膠體金制備工藝進(jìn)行考察和優(yōu)化。本實驗選擇了檸檬酸鈉
2、（Na3C6H5O7）和抗壞血酸（AA）兩種還原劑，以膠體金的粒徑及其分布為主要指標(biāo)，在單因素研究的基礎(chǔ)上，采用Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化制備工藝，結(jié)果如下：（1）檸檬酸鈉法：Na3C6H5O7/HAuCl4體積比為1.6，100℃下200r/min攪拌6min。制得的膠體金顆粒多為球形，粒徑在24nm左右，單分散性好，溶液4℃穩(wěn)定性佳。（2）抗壞血酸法：AA/HAuCl4摩爾比為1，pH為11，20℃下反應(yīng)2h。所得膠體金顆粒多為球形，粒徑在45nm左右，單分散性較好，溶液4℃穩(wěn)定性較佳。比較兩種制備方法，選擇膠體金的粒徑
3、分布更窄、穩(wěn)定性更好的檸檬酸鈉法。I萬方數(shù)據(jù)浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文通過鹽析、親和層析、凝膠過濾等方法提取并純化得到蓖麻毒素和相思子毒素，用于蓖麻毒素膠體金免疫層析試紙的性能評價。對純化后的蓖麻毒素和相思子毒素進(jìn)行血細(xì)胞凝集實驗，結(jié)果表明兩者均有較高的凝集活性。對膠體金的最佳抗體標(biāo)記量進(jìn)行了優(yōu)化，利用間接ELISA法考察了金標(biāo)抗體的活性。在此基礎(chǔ)上建立了雙抗體夾心的膠體金免疫層析試紙用于檢測蓖麻毒素，該試紙檢測限為1μg/mL，與牛血清白蛋白、相思子毒素?zé)o交叉反應(yīng)，模擬樣本的檢測結(jié)果可靠，可用于蓖麻毒素的快速定性檢測。關(guān)鍵詞：膠體
4、金，響應(yīng)面優(yōu)化，生物毒素，膠體金免疫層析II萬方數(shù)據(jù)浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文DEVELOPINGGOLDIMMUNOCHROMATOGRAPHYASSAYFORRAPIDDETECTIONOFBIOTOXINABSTRACTRicinisonekindofplanttoxin.Itexhibitsstrongcytotoxiceffect，andwouldbeusedasbioterrorismagentwhichexistedpotentialthreattopublicsecurity．Therefore，itisimport
5、anttodevelopandestablishnewmethodstodetectricinwithhighspecificityandsensitivity.Colloidal-goldimmunochromatographicassayisakindofmethordforricindetection.Itisspecific,efficientandsensitive,andthetestingresultreadsbythenakedeyesorsimpleopticalinstrument.Inthispaper，th
6、epreparationofcolloidalgoldusedinlater-flowimmunossayhasbeeninvestigatedandoptimized，andthenestablishedaspecificandsensitivemethordfordetectingricinbasedoncolliodalgoldimmunochromatographicassay.Thesizeofcolloidalgoldusedinlater-flowimmunossayis20~40nmwithnarrowsizedi
7、stribution.Therefore,thepreparationtechniqueofcolloidalgoldhasbeeninvestigatedandoptimized.Inthisstudy,trisodiumcitrate(Na3C6H5O7)andascorbateacid(AA)werechoosedIII萬方數(shù)據(jù)浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文asreducingagents,basedonthemono-factorialresearch,thentheoptimalsynthesisconditionsforco
8、lloidalgoldwerefurtheroptimizedbyBox-Behnkenresponsesurfacemethodologyandweredeterminedasfollows:(1)trisodiumcitratemethord:
